-
公开(公告)号:CN117305474A
公开(公告)日:2023-12-29
申请号:CN202311359292.3
申请日:2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于PxGLD基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒,该试剂盒包含以下靶标基因特异引物:如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法,操作简便、特异性强、需人力及样品量少,检测时间短,检测数量大,而且灵敏度高和准确可靠,因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断,同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN117305475A
公开(公告)日:2023-12-29
申请号:CN202311359294.2
申请日:2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于miR‑8545的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒,该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对:如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少,检测时间短,检测数量大,而且灵敏度高和准确可靠,是一种有效的小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性检测表观生物标志物,因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断,同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN117286261A
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202311359293.8
申请日:2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于转录因子PxDfd基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒,该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对:如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少,检测时间短,检测数量大,而且灵敏度高和准确可靠,因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断,同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN110616267A
公开(公告)日:2019-12-27
申请号:CN201910684686.3
申请日:2019-07-26
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种基于四个APN基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒,该试剂盒包含特异引物序列:正、反向引物如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示;或如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示;或如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9所示;或如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示。本发明方法检测周期短,检测数量大,需人力及样品量少,且灵敏度高、特异性强、准确可靠,能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断,可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN110592044A
公开(公告)日:2019-12-20
申请号:CN201910683005.1
申请日:2019-07-26
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了一种昆虫蛋白激酶,其编码基因Fused,所述基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;本发明还公开了Fused基因特异片段,用于dsRNA的合成,该dsRNA注入Bt Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性小菜蛾3龄初幼虫体腔后,小菜蛾生长发育迟缓,并最终导致小菜蛾在幼虫期和蛹期的死亡。本发明为小菜蛾Bt抗性治理提供了新的靶标,因此具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN117551778A
公开(公告)日:2024-02-13
申请号:CN202311531237.8
申请日:2023-11-16
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于PxJHE基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白抗性的检测方法及其试剂盒。究结果表明:在Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性小菜蛾的中肠组织中,PxJHE基因的m6A修饰水平升高而导致PxJHE基因的表达水平降低是促使小菜蛾形成稳定抗性机制的重要因素。因此,对两种分子标志物的共同检测,可以十分准确有效的检测出小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN116814799A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310182733.0
申请日:2023-02-23
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的特异性PCR引物对及其检测方法。所述正向引物序列为:5′‑AATTCAACGCGTTCGCAAGT‑3′,反向引物序列为:5′‑GGAGTACCTACTGCATAGCT‑3′。利用本发明所提供的特异性引物可以通过PCR方法直接检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,该检测方法快速简便,准确性高,可用于监测小菜蛾种群对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的发展动态,为田间小菜蛾的科学治理提供重要依据,对延缓Bt抗性发展具有重要意义。
-
公开(公告)号:CN110616267B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN201910684686.3
申请日:2019-07-26
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种基于四个APN基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒,该试剂盒包含特异引物序列:正、反向引物如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示;或如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示;或如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9所示;或如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示。本发明方法检测周期短,检测数量大,需人力及样品量少,且灵敏度高、特异性强、准确可靠,能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性,适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断,可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报,应用前景广泛。
-
公开(公告)号:CN109680009A
公开(公告)日:2019-04-26
申请号:CN201811502420.4
申请日:2018-12-10
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
CPC classification number: C12N15/902 , C07K14/43563
Abstract: 本发明公开了一种非模式昆虫小菜蛾中用于敲除ABCC2基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统的建立及其在Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性机制分子研究中的应用。所述CRISPR/Cas9基因编辑系统主要包括:小菜蛾ABCC2基因特异性sgRNA靶标序列、小菜蛾卵的显微注射方法和突变个体及其基因型的无损检测方法。将构建的可稳定遗传的小菜蛾ABCC2基因纯合突变种群用于Bt Cry1Ac杀虫蛋白毒力生物测定,结果证实小菜蛾ABCC2基因突变可以导致其对Bt Cry1Ac杀虫蛋白产生高抗性。本发明对于小菜蛾Bt Cry1Ac抗性的功能基因筛选、田间抗性水平检测以及田间防治均具有重要的理论和实践意义,应用前景广泛。
-
-
-
-
-
-
-
-