检测牛病毒性腹泻病毒的方法逆转录环介导等温扩增反应试剂盒的制备及其使用方法

    公开(公告)号:CN101696453A

    公开(公告)日:2010-04-21

    申请号:CN200910073126.0

    申请日:2009-11-02

    Abstract: 检测牛病毒性腹泻病毒的方法逆转录环介导等温扩增反应试剂盒的制备及其使用方法,它涉及反应试剂盒的制备及其使用方法。它解决了现有检测牛病毒性腹泻病毒的方法存在成本昂贵,需要专业设备及专业人员参与检测且不适于现阶段中国畜牧业发展状况的问题。方法:首先设计引物,然后配制逆转录环介导等温扩增反应液,即完成。使用方法:取含牛病毒性腹泻病毒样品的RNA提取物,加入反应液,混合后进行逆转录环介导等温扩增反应,再离心检测;或加入10000×SYBR GREEN I,然后置于紫外灯下检测;或进行电泳检测;或采用Real-time PCR仪进行保温反应检测。本发明反应试剂盒的检测方便,无需昂贵仪器,降低成本。

    鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列

    公开(公告)号:CN101302512A

    公开(公告)日:2008-11-12

    申请号:CN200810064840.9

    申请日:2008-07-02

    Abstract: 鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列,它涉及了鉴别诊断口蹄疫的抗原的基因序列。本发明解决了现有的口蹄疫鉴别抗原会出现非特异性反应,造成检出假阳性的问题。本发明的鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度分别为72bp、177bp、351bp、525bp和699bp。本发明的基因序列表达的蛋白克服了大分子量重组蛋白出现非特异性反应,造成检出假阳性的问题。

    抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用

    公开(公告)号:CN105886474B

    公开(公告)日:2019-09-17

    申请号:CN201610244264.0

    申请日:2016-04-19

    Abstract: 本发明公开了抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用。本发明以携带鹅CD8α链胞外区基因的原核表达载体为模板,设计1对特异性引物扩增得到鹅CD8α链胞外区238‑480bp基因,构建重组原核表达载体,采用大肠杆菌表达鹅CD8α链胞外区80‑160aa,得到重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex。以重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex为免疫原,免疫小鼠,经筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD8α链胞外区80‑160aa单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为9E4,保藏号是:CGMCCNO.11194。研究表明,该单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD8α链胞外区80‑160aa蛋白反应,同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡的外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此,本发明的提出为检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。

    可高效表达的成熟鸡α干扰素多肽的制备方法

    公开(公告)号:CN102121013B

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN200910073285.0

    申请日:2009-11-27

    Abstract: 可高效表达的成熟鸡α干扰素多肽的制备方法,它涉及鸡α干扰素多肽的制备方法。它解决了现有重组鸡α干扰素基因不能在大肠杆菌中表达或者表达量很低,以及重组鸡α干扰素在制备中复性效果差的问题。方法:一、将成熟鸡α干扰素基因中的稀有密码子全部同义替换为大肠杆菌偏好性密码子,经合成得优化后的鸡α干扰素基因;二、克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌感受态细胞中,经筛选后诱导表达,离心后得湿菌,再进行包涵体的提取和溶解;三、进行复性及纯化,收集蛋白。本发明成熟鸡α干扰素基因能在大肠杆菌中高效表达,表达量可达总菌体蛋白的30%,复性效果好。

    功能性微生物多样性分析用引物和使用该引物的多重扩增

    公开(公告)号:CN102618632A

    公开(公告)日:2012-08-01

    申请号:CN201210017537.X

    申请日:2012-01-20

    Abstract: 本发明公开了一种功能性微生物多样性分析用引物和使用该引物的多重扩增,涉及3对用于功能性微生物多样性分析的针对β-葡萄糖苷水解酶基因的引物。经DNAMAN6.0软件进行序列同源性比对后分别设计β-葡萄糖苷水解酶GH1家族的通用简并引物GH1F,GH1R,GH1R-GC,和β-葡萄糖苷水解酶GH3家族细菌、放线菌的通用简并引物GH3BF,GH3BR,GH3BF-GC,以及β-葡萄糖苷水解酶GH3家族真菌的通用简并引物GH3EF,GH3ER,GH3EF-GC,本发明提供的引物具有很好的通用性和实用性,能良好的反应实验对象中参与降解纤维素的功能性微生物的多样性,可以适用于来源于土壤,沉积物,人畜胃肠道等环境样品的分析。

    一种鹅干扰素-α多肽基因
    20.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101603043A

    公开(公告)日:2009-12-16

    申请号:CN200910072332.X

    申请日:2009-06-19

    Abstract: 一种鹅干扰素-α多肽基因,它涉及一种鹅干扰素-α基因。它解决了目前天然的鹅干扰素-α基因在大肠杆菌内不能表达的问题。本发明鹅干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明木糖还原酶基因序全长505bp,10bp处有起始密码子ATG,496bp处有终止密码子TAA,有489bp完整的开放阅读框。本发明鹅干扰素-α多肽基因能够在大肠杆菌表达系统中高效表达鹅干扰素-α成熟多肽。本发明的鹅干扰素-α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然鹅干扰素-α多肽基因,提高了鹅干扰素-α在大肠杆菌系统中的表达量,实现了高效表达。

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