LfcinB15-Mag12编码基因的合成及在大肠杆菌中表达的方法

    公开(公告)号:CN101509007B

    公开(公告)日:2011-04-13

    申请号:CN200810209661.X

    申请日:2008-12-10

    Abstract: 本发明提供了一种LfcinB15-Mag12编码基因的合成及在大肠杆菌中表达的方法,根据E.coli密码子偏爱性设计编码Lfcin B1-15个氨基酸的活性基因片段和Magainin(1-12)的活性基因片段,利用表达载体pET-32a构建重组表达载体pET-32a-Lfcin B15-Mag12,在pET-32a的多克隆位点前存在编码6个组氨酸标签的密码子,同时加入终止密码子TAG、TAA。本发明利用基因工程方法在大肠杆菌中成功表达了LfcinB15-Mag12,为基因工程方法规模化生产杂合肽及其它贵重肽类奠定了理论与实践基础,对建立肽类基因工程菌和抗菌肽研究的共性技术具有重要意义。

    一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽CFH及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118373886B

    公开(公告)日:2025-04-18

    申请号:CN202410537329.5

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 本发明提供一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽CFH及其制备方法和应用,属于生物工程领域,其氨基酸序列为C14‑(FHHFHHH)3‑(Dab)6;本发明通过肉豆蔻酸为抗菌脂肽提供自组装驱动力,模板多肽为抗菌脂肽提供杀灭病原体的疏水力,Dab为抗菌脂肽提供吸附病原体膜的正电荷并避免被胰蛋白酶识别,制出一条高稳定抗菌脂肽CFH。本发明的抗菌脂肽CFH在胰蛋白酶、糜蛋白酶、人工胃液和人工肠液存在下对猪副伤寒沙门氏菌具有高效杀菌活性,同时对人血红细胞没有毒性,使其具备成为饲用抗生素替代物的潜力。

    成猪快速转移装车用无损绑定装置

    公开(公告)号:CN111960252B

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202010823090.X

    申请日:2020-08-17

    Abstract: 成猪快速转移装车用无损绑定装置,属于动物科学技术领域,由背衣(1)、钩环(2)、蒙眼(3)、兜带(4)、沉坠(5)、电击条(6)、环钩(17)组成,其特征在于:所述的背衣(1)是覆盖在成猪背部的兜布,前方连接有蒙眼(3),背衣(1)两侧连接有3个兜带(4);3个兜带交替分布,在蒙眼(3)两底角处的圆润边缘各设置1个沉坠(5),在顶角与底边垂直线下端设置1个电击条(6),兜带(4)基部相互阻隔,与背衣(1)一起在成猪身体四周形成一个相对宽松的盛猪空间,不至于将成猪勒紧,从而达到可快速随意无损移动成猪到指定位置的目的。本发明结构简单,成本低廉,使用方便,能够大大节省养殖运输成本。

    一种产酸的民猪源罗伊氏乳杆菌及其培养方法与应用

    公开(公告)号:CN114891705A

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210809447.8

    申请日:2022-07-11

    Abstract: 本发明公开了一种产酸的民猪源罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)及其培养方法与应用,属于农业微生物应用技术领域,该菌保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC M 20211424,分类命名为Lactobacillus reuteri XYJ‑MZ056N。该菌在生长过程中,可生产乙酸和乳酸,其无细胞上清液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌等常见致病性细菌存在抑菌效果。该菌具有良好的耐酸耐胆盐能力和肠上皮细胞粘附性,并对多种抗生素敏感,具有开发为预防仔猪断奶性腹泻的用途微生态制剂的潜力。

    猪源杂合抗菌肽PP-1及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110283252A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910629105.6

    申请日:2019-07-12

    Abstract: 本发明提供一种猪源杂合抗菌肽PP-1及其制备方法和应用,抗菌肽的序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明以PR-39为目标,截取其片段与猪源骨髓抗菌肽PMAP-23或PMAP-36的片段杂合而获得氨基酸长度19至22的3条抗菌肽序列;然后使用多肽合成仪,进行固相合成法合成多肽;进行纯化,并利用电喷雾质谱法进行鉴定;最后,通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性,筛选具有较理想活性的多肽。本发明的抗菌肽PP-1安全性较好,具有广谱抗菌活性、低毒性和低溶血性;该的抗菌肽由19个氨基酸组成,肽链较短,制备方法简单且技术成熟,合成成本低,适合应用于生产。

    猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104498465A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410855264.5

    申请日:2014-12-25

    CPC classification number: C12N9/6429 A61K38/00 C12Y304/21005

    Abstract: 本发明公开一种猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用,其抗菌肽氨基酸序列如SEQ No.1所示。本发明首先分析猪凝血酶的氨基酸组成特点,发现碳末端富含有疏水性和正电荷的氨基酸残基,从而通过截取碳末端的方式获得不同长度的衍生肽;然后使用多肽合成仪,进行固相合成法合成多肽粗品;最后使用高效液相色谱对多肽粗品进行纯化,并用电喷雾质谱法进行鉴定。通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性,筛选出具有较高活性的多肽PT17。本发明的优点:该多肽衍生自猪凝血酶的碳末端,属于天然衍生物,安全性较好,具有广谱抗菌活性和低毒性;肽链较短,制备方法和技术成熟,合成成本低。

    一种广谱抗菌肽AG3及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118420718A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410536908.8

    申请日:2024-04-30

    Abstract: 本发明提供一种广谱抗菌肽AG3及其制备方法和应用,属于生物技术领域,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的抗菌肽AG3对大肠杆菌、绿脓杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等11种革兰氏阴性革兰氏阳性菌及真菌菌种有明显的抑制作用,平均抗细菌活性达到2μM;杀菌动力也表明其对细菌有着高效的杀菌能力;同时,其溶血活性低,治疗指数高达32;除此之外,在生理浓度盐离子中仍具有良好的抗菌活性,表明其具有较高的盐离子耐受力,相关机制试验证明其通过物理破膜机制实现抗菌功能。

    猪源杂合抗菌肽PP-1及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110283252B

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201910629105.6

    申请日:2019-07-12

    Abstract: 本发明提供一种猪源杂合抗菌肽PP‑1及其制备方法和应用,抗菌肽的序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明以PR‑39为目标,截取其片段与猪源骨髓抗菌肽PMAP‑23或PMAP‑36的片段杂合而获得氨基酸长度19至22的3条抗菌肽序列;然后使用多肽合成仪,进行固相合成法合成多肽;进行纯化,并利用电喷雾质谱法进行鉴定;最后,通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性,筛选具有较理想活性的多肽。本发明的抗菌肽PP‑1安全性较好,具有广谱抗菌活性、低毒性和低溶血性;该的抗菌肽由19个氨基酸组成,肽链较短,制备方法简单且技术成熟,合成成本低,适合应用于生产。

    日本蠼螋抗菌肽DEI及其在鸭饲料中的应用

    公开(公告)号:CN108503702A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810378808.1

    申请日:2018-04-25

    CPC classification number: C07K14/43563 A23K20/147 A23K50/75

    Abstract: 日本蠼螋抗菌肽DEI及其在鸭饲料中的应用,属于生物工程技术领域,其特征在于:获取日本蠼螋的抗菌肽DEI,采用蛋白自动测序仪测定其氨基酸序列,再采用基因工程的手段,设计其cDNA片段,构建克隆质粒pUC57-TM,转化大肠杆菌DH 5α,PCR和测序进一步鉴定,构建重组表达载体pPICZαC-TM,将重组表达载体线性化后,电转入毕赤酵母SMD1168中,筛选获得高拷贝的重组酵母转化子,将重组酵母转化子的单菌落培养,获得日本蠼螋抗菌肽DEI,并将日本蠼螋抗菌肽DEI应用到鸭饲料中,能增加鸭的抵抗力,大大降低了鸭的发病率,提高了其成活率,从而降低了饲养户的饲养成本。

    猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104498465B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201410855264.5

    申请日:2014-12-25

    Abstract: 本发明公开一种猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用,其抗菌肽氨基酸序列如SEQ No.1所示。本发明首先分析猪凝血酶的氨基酸组成特点,发现碳末端富含有疏水性和正电荷的氨基酸残基,从而通过截取碳末端的方式获得不同长度的衍生肽;然后使用多肽合成仪,进行固相合成法合成多肽粗品;最后使用高效液相色谱对多肽粗品进行纯化,并用电喷雾质谱法进行鉴定。通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性,筛选出具有较高活性的多肽PT17。本发明的优点:该多肽衍生自猪凝血酶的碳末端,属于天然衍生物,安全性较好,具有广谱抗菌活性和低毒性;肽链较短,制备方法和技术成熟,合成成本低。

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