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公开(公告)号：CN106755444A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611266452.X
申请日：2016-12-31
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2537/16 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明提供一种大豆基因拷贝数变异分析方法，包括以下步骤：1)基因组DNA的提取和浓度均一化；2)被测基因引物设计；3)以β‑actin为内参基因，用内参基因引物与步骤2)涉及的被测基因引物分别对基因组DNA模板进行荧光定量PCR反应；4)利用RT‑qPCR获得被测基因和内参基因β‑actin的Ct值计算被测基因在不同大豆品种中的相对丰度值，通过被测基因在不同大豆品种中的相对丰度值之间的比值判断被测基因在不同品种大豆中的拷贝数变异关系。本方法基因组DNA用量较高通量测序、微阵列法和原位杂交技术用量少103倍；无需进行测序和杂交探针合成，成本低廉、操作简单、可实现大样本分析。
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公开(公告)号：CN106191074A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610569604.7
申请日：2016-07-19
Applicant: 东北农业大学
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8205 , C12N15/8273 , C12P21/02
Abstract: 本发明涉及大豆eIF5A基因亚型、基因工程菌及应用，大豆eIF5A基因亚型GmeIF5A1、GmeIF5A2、GmeIF5A3，序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。本发明还提供产大豆eIF5A蛋白的基因工程菌，表达上述基因亚型，产大豆eIF5A蛋白，表达载体为pPIC3.5K质粒，上述基因亚型位于pPIC3.5K质粒上的EcoR I和Not I酶切位点之间，形成重组质，宿主为毕赤酵母GS115。上述产大豆eIF5A蛋白的基因工程菌可应用于发酵生产大豆eIF5A蛋白。上述基因亚型可应用于高产大豆eIF5A蛋白、促进细胞增殖或植物抗环境胁迫等。
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公开(公告)号：CN103725655B
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201310737262.1
申请日：2013-12-27
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种新型除草剂抗性蛋白及其编码基因与应用，属于生物技术领域。本发明包括SEQ ID NO.1中的氨基酸序列，还包括编码该蛋白基因的碱基序列以及基因表达载体和具有除草剂抗性作物的构建方法。本发明公开的除草剂抗性蛋白为来源于大肠杆菌的谷氨酸脱氢酶，通过基因工程技术将编码该蛋白的基因导入植物细胞，可得到对草丁膦具有天然抗性的作物。
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公开(公告)号：CN104945493A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510458904.3
申请日：2015-07-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , C12N5/10 , A01H5/00
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/827
Abstract: 本发明公开了一种影响植物生育期的大豆蛋白GmIDD及其编码基因与应用，属于基因工程技术领域。大豆蛋白GmIDD的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。同时，本发明还提供在大豆蛋白GmIDD在促进植物开花，调整植物生育期中的应用方法。本发明所提供的大豆蛋白GmIDD，可用于解决杂交育种中的花期不遇问题，各种作物、蔬菜、水果、花卉的生育期控制问题、光周期敏感性问题和引种问题。
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公开(公告)号：CN103976162A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410142210.4
申请日：2014-04-09
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆食心虫人工饲料及其制备方法和应用，其中制备大豆食心虫人工饲料的方法包括：将67重量份的DEPC水、1.4重量份的琼脂、0.3重量份的山梨酸、0.1重量份的对甲酯、0-6重量份的大豆粉、2.4重量份的鼓粒期豆荚粉、6-12重量份的鼓粒期籽粒粉、6重量份的玉米粉、1.5重量份的胡萝卜粉、5.2重量份的白砂糖、2.3重量份的酪素和0.1重量份的胆固醇进行混合处理；高温灭菌处理；加入0.1重量份的维生素混合物、0.2重量份的维生素C和1.5重量份的亚油酸，即得大豆食心虫人工饲料。利用该方法制备的饲料对大豆食心虫的适用期非常长，初孵幼虫期即可采用，并且饲养存活率非常高，不存在RNA酶。
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公开(公告)号：CN103725655A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310737262.1
申请日：2013-12-27
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种新型除草剂抗性蛋白及其编码基因与应用，属于生物技术领域。本发明包括SEQ ID NO.1中的氨基酸序列，还包括编码该蛋白基因的碱基序列以及基因表达载体和具有除草剂抗性作物的构建方法。本发明公开的除草剂抗性蛋白为来源于大肠杆菌的谷氨酸脱氢酶，通过基因工程技术将编码该蛋白的基因导入植物细胞，可得到对草丁膦具有天然抗性的作物。
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公开(公告)号：CN103320427A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210073913.7
申请日：2012-03-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种辅助鉴定大豆对大豆花叶病毒抗性的方法。本发明保护序列表的序列1所示DNA片段和序列表的序列2所示DNA片段组成的引物对甲。所述引物对甲具有如下(a)或(b)中的应用：(a)辅助鉴定大豆对大豆花叶病毒的抗性；(b)辅助筛选抗大豆花叶病毒的大豆。采用本发明的方法，可以实现对大豆花叶病毒SMV-N1株系和SMV-N3株系抗性种质的分子辅助选择育种，与传统的抗病表型鉴定相比，可以实现早期选育(如子叶期)，选择效率达到98％以上，并大大节省实验时间和实验成本。本发明将在大豆育种中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN102864145A
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201110189842.2
申请日：2011-07-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效诱导表达型启动子及应用。本发明提供DNA片段(GBP1)，来源于大豆(Glycine max(L.)Merrill.)，为如下1)-5)中任一所述的DNA分子：1)序列表的序列1所示的DNA分子；2)序列表的序列1自5’末端第8-1501位核苷酸；3)序列表的序列1中任意一段包含序列1中自5′末端第1305-1501位核苷酸的DNA分子；4)在严格条件下与1)、2)或3)所述DNA序列杂交且具有启动子功能的DNA分子；5)与1)、2)或3)中所述DNA序列具有90％以上同源性，且具有启动子功能的DNA分子。本发明的启动子在农业生产中将会有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101914534B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201010168982.7
申请日：2010-05-05
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子及其应用。本发明提供的启动子为序列1所示的DNA分子或其部分片段。GmPLPA基因启动子在大豆中是首次被克隆。本发明的启动子可应用于在植物发育的特定时期(如幼苗期)或植物的特定组织(如种子)表达靶基因，避免组成型启动子启动靶基因造成的资源浪费，具有特异性强效率高的优点。本发明提供的启动子可应用于定向培育安全性高的转基因植物新品种，对于植物育种和靶基因功能及作用机理的研究，具有很大价值。
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公开(公告)号：CN101871010B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201010205343.3
申请日：2010-06-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种转基因大豆基因向根瘤菌水平漂移的评价方法。把转基因大豆种子用目前正在商业化应用的大豆根瘤菌接种并播种在条件可控的人工气候室内。人工气候室内模拟自然环境条件设置昼夜温度为：28℃/21℃，每天光照12h，土壤含水量70％。待转基因大豆第2片三出复叶完全展开时，取出转基因大豆根系并从根系上取下根瘤，对根瘤表面消毒后进行根瘤菌分离。对从转基因大豆根瘤中分离的根瘤菌进行室内纯培养后提取DNA，对分离的转基因大豆根瘤菌进行16S rDNA鉴定，然后对经过鉴定的转基因大豆根瘤菌进行PCR扩增，检测从转基因大豆根瘤中分离的根瘤菌是否具有转基因大豆的目的基因。
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