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公开(公告)号:CN111518790A
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN202010299008.8
申请日:2018-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖水解酶,属于基因工程和酶工程领域。本发明对来源于Xanthomonas axonopodispv.glycines、Janthinobacterium agaricidamnosum NBRC 102515、Caulobacter crescentus NA1000 CB15的蔗糖水解酶进行改造,分别对其第271位或第279位或第281位的丝氨酸残基进行定点突变,获得的单突变体酶的转苷活性较野生型蔗糖水解酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究,亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。
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公开(公告)号:CN111411097A
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN202010365353.7
申请日:2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体S90G,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变,得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体S90G的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.21倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义,并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。
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公开(公告)号:CN108103046B
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201810145937.6
申请日:2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一系列麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体,应用于制备海藻糖,具有比较好的效果。本发明还将麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体在E.coli BL21(DE3)中进行了表达、发酵优化酶,可显著提高酶的产量。
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公开(公告)号:CN110656096A
公开(公告)日:2020-01-07
申请号:CN201911119322.7
申请日:2019-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低水解副反应程度的环糊精葡萄糖基转移酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明是通过将编码突变体A133V的基因转入大肠杆菌BL21(DE3)异源表达,获得重组菌BL21(DE3)/pET20b(+)-A133V,利用该重组菌发酵产酶突变体A133V,其转苷活性与水解活性比例为野生酶的2.5-2.6倍,大大提升了转苷活性与水解活性的比例,对于工业化生产具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN110628741A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910853169.4
申请日:2017-09-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一系列酶活提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体。突变体F284V、G432D、F583L、Q585R、I611T、S615G、F284V/T439A、G432D/G586D麦芽寡糖基海藻糖合成酶的酶活分别为野生酶的2.1倍、1.2倍、1.1倍、1.4倍、1.17倍、3.1倍、2.4倍、1.6倍、2.4倍。
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公开(公告)号:CN106520634B
公开(公告)日:2019-06-21
申请号:CN201611166592.X
申请日:2016-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种根瘤菌及其在海藻糖制备中的应用,属于生物工程和酶工程领域。本发明得到了一株表达麦芽寡糖基海藻糖合成酶及麦芽寡糖基海藻糖水解酶的根瘤菌,该菌所产麦芽寡糖基海藻糖合成酶及麦芽寡糖基海藻糖水解酶最适温度分别为45℃和50℃,在55℃下水浴30h残留酶活菌依然高于50%,两者的最适pH都为7.0,在pH5.0‑9.0具有良好的稳定性。用该菌生产的麦芽寡糖基海藻糖合成酶及水解酶制备海藻糖,具有反应温度范围广、低能耗、物料成本低的优势。
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公开(公告)号:CN109486786A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201811494800.8
申请日:2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变,得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体V6D、S90G、T168A、T171A、T383A、G608A和V6D/S90G/T168A/T171A/T383A/G608A的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.89倍、1.21倍、1.21倍、1.22倍、1.32倍、2.03倍、3.16倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义,并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。
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公开(公告)号:CN109402081A
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201811426701.6
申请日:2018-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种淀粉蔗糖酶,属于基因工程和酶工程领域。本发明分别对来源于Deinococcus geothermalis的淀粉蔗糖酶第285位丙氨酸残基进行定点突变,对来源于Alteromonas macleodii的淀粉蔗糖酶第287位丙氨酸残基进行定点突变,对来源于Neisseria polysaccharea的淀粉蔗糖酶第295位丙氨酸残基进行定点突变。获得的单突变体酶的水解活性较野生型淀粉蔗糖酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究,亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。
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公开(公告)号:CN108102997A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201810155533.5
申请日:2018-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于普鲁兰酶高效表达和高密度培养的枯草芽孢杆菌,属于生物工程技术领域。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑系统,依次敲除枯草芽孢杆菌WS5的nprB、bpr、mpr、vpr、epr和wprA这6个基因,分别得到WSH6、WSH7、WSH8、WSH9、WSH10和WSH11这6种枯草芽孢杆菌菌株。制备枯草芽孢杆菌WS5和上述六种菌感受态,转化普鲁兰酶表达质粒,得到七种普鲁兰酶重组菌,经过摇瓶筛选和3‑L罐上罐筛选。筛选得出宿主菌株为WSH9时产普鲁兰酶酶活最高,3‑L罐发酵78h,普鲁兰酶酶活可达2449.6U/mL,是目前报道的普鲁兰酶胞外最高水平。
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