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公开(公告)号：CN116426620A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310653944.8
申请日：2023-06-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种检测禽流感三价DNA疫苗中单个质粒含量的引物和探针组合及试剂盒，包括SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示核苷酸序列的引物及SEQ ID No.7~SEQ ID No.9所示核苷酸序列的TaqMan探针。本发明建立的定量测定和区分禽流感（H5+H7）三价DNA疫苗（pH5‑FJ（H5‑Re13）株+pH5‑SX（H5‑Re14）株+pH7‑YN（H7‑Re4）株）中pH5‑FJ（H5‑Re13）株、pH5‑SX（H5‑Re14）株和pH7‑YN（H7‑Re4）株各组份含量的TaqMan荧光定量PCR方法重复性好，准确性高，对于检测禽流感DNA三价苗中各个质粒的含量监控具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN113817687B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202111104857.4
申请日：2021-09-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株、A型流感病毒核蛋白单克隆抗体及其应用，属于猪流感病毒检测技术领域。本发明提供了一种能够分泌A型流感病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2021165。本发明杂交瘤细胞株分泌获得的A型流感病毒单克隆抗体具有特异性好、效价高等优点，可用于鉴定待测病毒是否为A型流感病毒，鉴定待测标本是否感染A流感病毒以及待测血清中是否含有A型流感病毒的抗体。IFA检测结果显示本发明稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株可与H1N1、H1N2、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒发生特异性反应，具有广谱生物学活性。
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公开(公告)号：CN116338193A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210879227.2
申请日：2022-07-25
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体包被的酶标板，其中所述的特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9分泌产生，所述的杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9的保藏编号为CGMCC No.45157。本发明基于抗体捕获提出了一种非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒，本发明的酶标板上首先包被一种可以识别抗原的单克隆抗体，利用单克隆抗体特异性地捕获抗原，再加入血清及酶标二抗。通过单克隆抗体捕获抗原，减少非目标抗原(如大肠杆菌)与ELISA酶标板的吸附作用，从而提高方法的特异性。该方法相比普通间接ELISA的2次级联放大作用变为三次级联放大，即保留了间接ELISA方法的敏感性，又提高了特异性。
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公开(公告)号：CN116286684A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310072685.X
申请日：2023-01-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/31 , C12N15/65 , C12N15/63 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61K39/12 , A61P31/16 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供快速构建马立克氏疱疹病毒感染性克隆的方法及应用，所述方法包括将细菌人工染色体和筛选标记基因表达框架片段连接并在连接后的序列两端设计引入Tn5转座酶识别序列构建人工转座子，将细菌人工染色体和筛选标记基因片段插入到马立克氏疱疹病毒基因组中，然后转染鸡胚成纤维细胞，获得马立克氏疱疹病毒的感染性克隆。本发明可一次性获得数十种细菌人工染色体载体插入到不同基因组位置的马立克氏疱疹病毒感染性克隆，为进一步利用马立克氏疱疹病毒为载体构建重组疫苗做了重要的技术铺垫。
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公开(公告)号：CN116218912A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211592113.6
申请日：2022-12-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/867 , C12N15/40 , C12N5/10 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了稳定表达APPV E2蛋白的哺乳动物细胞系、诊断APPV抗体的ELISA试剂盒。本发明首先构建了稳定表达APPV E2蛋白的哺乳动物悬浮细胞系，成功获得表达水平高、纯度高、抗原性良好的重组APPV E2蛋白，大大降低了生产成本。在此基础上采用所表达的重组APPV E2蛋白建立了诊断猪非典型瘟病毒抗体的间接ELISA试剂盒，其具有高敏感性和特异性，与其它病毒抗体阳性血清无交叉反应，与VNT的符合率为93.7％，可用于APPV抗体的特异性检测；在此基础上，从中国9个省采集猪血清样品利用所建立的试剂盒检测猪群中APPV的血清流行率，结果表明，APPV总血清流行率为73.9％。
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公开(公告)号：CN113913393B
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202110628521.1
申请日：2021-06-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明提供一种包含改造的SARS‑CoV‑2的刺突蛋白的疫苗组合物，该疫苗组合物将新城疫病毒LaSota弱毒株与新型改造的SARS‑CoV‑2的刺突蛋白(SA/SB)或(S6PA/S6PB)或其免疫原性衍生物结合构建重组新城疫病毒，用于预防新型冠状病毒的感染，尤其是针对哺乳动物的新型冠状病毒的感染。
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公开(公告)号：CN110791479B
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN201910685556.1
申请日：2019-07-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了DEV gB蛋白单抗以及检测DEV抗体的阻断ELISA试剂盒。本发明首先通过原核表达系统制备具有良好反应原性和免疫原性的gB蛋白，将其作为抗原通过细胞融合技术筛选得到一株微生物保藏编号号是CGMCC No.17996的杂交瘤细胞株，其分泌的单抗能与鸭病毒性肠炎病毒天然空间构象病毒蛋白反应且对DEV抗体具有强阻断能力；本发明还提供由该单抗所识别的抗原表位，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示；本发明进一步应用该单抗构建了一种检测DEV抗体的阻断ELISA试剂盒，该阻断ELISA试剂盒具有敏感度高、特异性好、重复性强等优点。
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公开(公告)号：CN115943910A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202310116471.8
申请日：2023-02-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及动物饮水器技术领域，且公开了隔离器禽类动物饮水器，包括饮水器、支撑垫，所述饮水器外侧设置有饮水机构，所述饮水机构包括有饮水盒、吸附海绵、支撑杆、导流板、水管，所述饮水器一侧与饮水盒一端固定连接，所述饮水盒内壁与吸附海绵一侧固定连接，所述饮水盒一侧与支撑杆一端固定连接，所述饮水盒顶部与导流板一端固定连接，所述导流板另一端与饮水器一侧固定连接，所述饮水器顶部与水管底部连通设置，所述水管外壁固定安装有电子调节阀，实现了能够更加方便动物饮水，利用饮水器内部电子调节阀，根据饮水器水位，进行水量补充，有效的杜绝动物浪费水源，保证了隔离器内部动物用水需求，减轻了实验人员工作量。
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公开(公告)号：CN115902217A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202310215284.5
申请日：2023-03-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种牛副结核病间接ELISA检测试剂盒及其应用。本发明属于微生物检测技术领域。本发明成功筛选出具有良好抗原性的包被原，同时应用该抗原建立了牛副结核病间接ELISA检测试剂盒及其检测方法。本发明通过对100份MAP阳性血清的检测，得出本发明方法的敏感性为93.0%。通过对200份MAP阴性血清的检测得出本发明方法的特异性为95.5%，明显高于其他检测方法。总之，本发明建立的牛副结核病间接ELISA检测的方法具有快速准确，敏感性和特异性高的特点。本发明的提出为预防和清除牛副结核病，保护我国畜牧业健康快速的发展提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN110195093B
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN201910318209.5
申请日：2019-04-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于表达绿色荧光蛋白的重组寨卡病毒的药物筛选系统及其应用。本发明的一种药物筛选系统由表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组寨卡病毒(报告型寨卡病毒)以及表达DC‑SIGNR的BHK‑21细胞系组成。本发明的报告型寨卡病毒表达绿色荧光蛋白，荧光号强，且在胞浆内均匀着色，易于观察，易于高通量筛选分析。稳定表达DC‑SIGNR的BHK‑21细胞系提高了对报告型寨卡病毒感染的敏感性，提高了病毒复制效率，减少了病毒复制压力，也提高了重组病毒的稳定性。通过本发明的药物筛选系统可在活细胞状态下对药物作用前后的病毒复制情况进行直接观察与分析，不需要对细胞进行固定与免疫染色，使整个操作流程更简便快捷，且减少了活病毒操作步骤，提高了整个操作流程的安全性。
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