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公开(公告)号：CN113462712B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202110796924.7
申请日：2021-07-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 的双质粒和阿拉伯糖诱导方法，无需任何化学诱本发明公开了一种温控自剪切单质粒同源 导剂，仅通过改变培养温度，即可实现染色体的重组系统及其在基因编辑中的应用。所述的系统 高效编辑。而且避免了多次电穿孔过程，极大降包括用于进行基因编辑的单质粒pKID220，所述 低了操作复杂度并节省了时间和成本。本发明的的pKID220质粒中含有温控元件、Red重组酶基 提出为基因编辑提供了一种更加快速、简便、经因、I‑SceI核酸内切酶基因和含有筛选标记的打 济的技术手段。(56)对比文件徐砺瑜等.产1,3-丙二醇温控重组大肠杆菌JM109(pBV220-yqhD-dhaB)的构建《.应用与环境生物学报》.2008,(第01期),110-114.Egger E等.Fast and antibiotic freegenome integration into Escherichia colichromosome《.Sci Rep》.2020,第10卷(第1期),Kim J等.A versatile and highlyefficient method for scarless genomeediting in Escherichia coli andSalmonella enterica《.BMC Biotechnol》.2014,第14卷Egger E等.Fast and antibiotic freegenome integration into Escherichia colichromosome《.Sci Rep》.2020,第10卷刘蕾.5’-UTR对STM542 flhDC基因表达的影响及敲除工具的改良《.中国学位论文全文数据库》.2017,Cox MM等.Scarless and site-directedmutagenesis in Salmonella enteritidischromosome《.BMC Biotechnol》.2007,第7卷
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公开(公告)号：CN116814632B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311061108.7
申请日：2023-08-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/16 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开一种抑制流感病毒的siRNA及其应用，属于抑制流感病毒技术领域。本发明为了寻找一种替代传统抗病毒药物的siRNA药物。本发明提供一种抑制流感病毒的siRNA，所述siRNA的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述siRNA的反义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。通过对该段特异siRNA序列进行研究，旨在完善该特异siRNA序列的作用原理以及明晰该siRNA序列在抗流感病毒作用方面的应用前景，进一步完善抗流感病毒研究，同时也为流感病毒的防控提供新策略以及新思路。
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公开(公告)号：CN116875743A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202311149473.3
申请日：2023-09-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种一次性检测两种猫肠道病毒的荧光定量PCR试剂盒及其应用。所述的两种猫肠道病毒为猫冠状病毒（Feline coronavirus，FCoV）以及猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)，所述的试剂盒中含有分别用于检测猫冠状病毒以及猫细小病毒的特异性引物和探针组合。本发明建立的方法通用性好，可以检测到GenBank中收录的所有已知序列的FCoV毒株。灵敏度实验结果表明，使用本发明试剂盒检测的最低FCoV标准品质粒拷贝数为94copics/μL和最低FPV标准品质粒拷贝数为69copics/μL。本发明的提出为检测猫冠状病毒以及猫细小病毒提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116814632A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202311061108.7
申请日：2023-08-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/16 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开一种抑制流感病毒的siRNA及其应用，属于抑制流感病毒技术领域。本发明为了寻找一种替代传统抗病毒药物的siRNA药物。本发明提供一种抑制流感病毒的siRNA，所述siRNA的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述siRNA的反义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。通过对该段特异siRNA序列进行研究，旨在完善该特异siRNA序列的作用原理以及明晰该siRNA序列在抗流感病毒作用方面的应用前景，进一步完善抗流感病毒研究，同时也为流感病毒的防控提供新策略以及新思路。
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公开(公告)号：CN116790509A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310770698.4
申请日：2023-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨国生生物科技股份有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C12N15/02 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用，属于生物医药领域。单克隆杂交瘤细胞株命名为312H‑C3，其已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.23018，保藏日期为2021年8月4日。所述杂交瘤细胞株能够稳定分泌特异性识别PRVgB蛋白的单克隆抗体，可用于制备阻断法抗体检测试剂盒，且酶标单抗最佳使用浓度可达1:4000，极大的节省了原材料。基于312H‑C3建立的抗体检测试剂盒操作简易、特异性好、对猪伪狂犬病病毒变异株gB抗体的检测敏感性优于进口试剂盒和国内其他试剂盒，可以更好地评价猪群免疫状况。
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公开(公告)号：CN116785420A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202311047976.X
申请日：2023-08-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 北京荷牧生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种牛病毒性腹泻病毒的mRNA疫苗及其应用，属于核酸疫苗技术领域。为了提高牛病毒性腹泻病毒mRNA疫苗的免疫保护作用。本发明提供一种牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea Virus）的mRNA疫苗，所述mRNA疫苗编码牛病毒性腹泻病毒的E2蛋白或牛病毒性腹泻病毒截短E2蛋白。实现了对牛病毒性腹泻病毒的免疫效果的提升。
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公开(公告)号：CN114891095B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202210382554.7
申请日：2022-04-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/10 , C07K19/00 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测PRRSV抗原的纳米抗体对、试剂盒及其应用，属于生物技术检测技术领域。为了提供一种特异性检测PRRS病毒的抗体对。本发明提供了一种用于检测PRRSV抗原的Nb12抗体和N35抗体，Nb12抗体的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7‑9，N35抗体可变区序列如SEQ ID NO:10‑12。抗体对能特异性识别PRRSV抗原，最低检测1.0×103TCID50/100μL病毒。
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公开(公告)号：CN114958918B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202210728853.1
申请日：2022-06-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12Q1/66 , C12N15/113
Abstract: 本发明提供了一种基于猪NLRP6基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体，属于基因工程技术领域，将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中，得到双荧光素酶报告基因载体；所述NLRP6基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明明确了NLRP6基因启动子在NLRP6基因中的具体位置，将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中，得到双荧光素酶报告基因载体具有转录活性。
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公开(公告)号：CN116478937A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310686418.1
申请日：2023-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑HLJ21‑1690401，该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明，该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性，可引起接种鸡胚90%死亡，接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗，免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平，并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116445493A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202211216666.1
申请日：2022-09-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D，第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子，将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后，构建相应的Tva表达质粒，将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后，其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞，丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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