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公开(公告)号：CN109303916A
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201811178131.3
申请日：2018-10-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: A61K38/17 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12N15/74 , C12N15/12
CPC classification number: A61K38/1729 , A61K39/0275 , A61K2039/523 , A61K2039/53 , A61P31/04 , C07K14/4723 , C12N15/74
Abstract: 本发明公开了焦亡相关蛋白GSDMD在制备菌蜕疫苗中的应用。本发明构建了含有焦亡相关蛋白GSDMD编码基因的溶菌质粒，将其转入肠炎沙门氏菌中，在阿拉伯糖诱导下使细菌裂解，成功获得了沙门氏菌新型菌蜕疫苗。实验证明，GSDMD介导的溶菌具有极长的持续期，裂解率达到99.9985％以上。采用本发明制备得到的新型菌蜕免疫小鼠后，可以刺激机体产生强烈的体液免疫和细胞免疫，诱导了保护性免疫应答并且能够保护实验动物抵抗沙门氏菌感染，说明本发明制备得到的沙门氏菌菌蜕疫苗具有良好的免疫保护效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108410785A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810139232.3
申请日：2018-02-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
CPC classification number: C12N15/70 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12N2750/10022 , C12N2750/10034
Abstract: 本发明涉及一种制备细菌菌影以及基因工程亚单位疫苗的方法，包括将INP信号序列和外源基因以及裂解盒基因E-lysis克隆到同一个表达载体，转化细菌，其中INP的信号序列为SEQ ID NO：1表示的序列，裂解盒基因E-lysis的序列为SEQ ID NO：2表示的序列，以及表达外源基因的重组细菌菌影在制备疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN109303916B
公开(公告)日：2021-11-30
申请号：CN201811178131.3
申请日：2018-10-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: A61K38/17 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12N15/74 , C12N15/12
Abstract: 本发明公开了焦亡相关蛋白GSDMD在制备菌蜕疫苗中的应用。本发明构建了含有焦亡相关蛋白GSDMD编码基因的溶菌质粒，将其转入肠炎沙门氏菌中，在阿拉伯糖诱导下使细菌裂解，成功获得了沙门氏菌新型菌蜕疫苗。实验证明，GSDMD介导的溶菌具有极长的持续期，裂解率达到99.9985％以上。采用本发明制备得到的新型菌蜕免疫小鼠后，可以刺激机体产生强烈的体液免疫和细胞免疫，诱导了保护性免疫应答并且能够保护实验动物抵抗沙门氏菌感染，说明本发明制备得到的沙门氏菌菌蜕疫苗具有良好的免疫保护效果。
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公开(公告)号：CN113462712B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202110796924.7
申请日：2021-07-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 的双质粒和阿拉伯糖诱导方法，无需任何化学诱本发明公开了一种温控自剪切单质粒同源 导剂，仅通过改变培养温度，即可实现染色体的重组系统及其在基因编辑中的应用。所述的系统 高效编辑。而且避免了多次电穿孔过程，极大降包括用于进行基因编辑的单质粒pKID220，所述 低了操作复杂度并节省了时间和成本。本发明的的pKID220质粒中含有温控元件、Red重组酶基 提出为基因编辑提供了一种更加快速、简便、经因、I‑SceI核酸内切酶基因和含有筛选标记的打 济的技术手段。(56)对比文件徐砺瑜等.产1,3-丙二醇温控重组大肠杆菌JM109(pBV220-yqhD-dhaB)的构建《.应用与环境生物学报》.2008,(第01期),110-114.Egger E等.Fast and antibiotic freegenome integration into Escherichia colichromosome《.Sci Rep》.2020,第10卷(第1期),Kim J等.A versatile and highlyefficient method for scarless genomeediting in Escherichia coli andSalmonella enterica《.BMC Biotechnol》.2014,第14卷Egger E等.Fast and antibiotic freegenome integration into Escherichia colichromosome《.Sci Rep》.2020,第10卷刘蕾.5’-UTR对STM542 flhDC基因表达的影响及敲除工具的改良《.中国学位论文全文数据库》.2017,Cox MM等.Scarless and site-directedmutagenesis in Salmonella enteritidischromosome《.BMC Biotechnol》.2007,第7卷
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公开(公告)号：CN108410785B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN201810139232.3
申请日：2018-02-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术开发公司
Abstract: 本发明涉及一种制备细菌菌影以及基因工程亚单位疫苗的方法，包括将INP信号序列和外源基因以及裂解盒基因E‑lysis克隆到同一个表达载体，转化细菌，其中INP的信号序列为SEQ ID NO：1表示的序列，裂解盒基因E‑lysis的序列为SEQ ID NO：2表示的序列，以及表达外源基因的重组细菌菌影在制备疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN113462712A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110796924.7
申请日：2021-07-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种温控自剪切单质粒同源重组系统及其在基因编辑中的应用。所述的系统包括用于进行基因编辑的单质粒pKID220，所述的pKID220质粒中含有温控元件、Red重组酶基因、I‑SceI核酸内切酶基因和含有筛选标记的打靶片段区，其中，所述的筛选标记的两侧均带有I‑SceI识别位点和FRT位点。实验证明，本发明的同源重组系统的重组效率优于传统λ‑Red系统的双质粒和阿拉伯糖诱导方法，无需任何化学诱导剂，仅通过改变培养温度，即可实现染色体的高效编辑。而且避免了多次电穿孔过程，极大降低了操作复杂度并节省了时间和成本。本发明的提出为基因编辑提供了一种更加快速、简便、经济的技术手段。
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