公开(公告)号：CN116679058A

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202310492301.X

申请日：2023-05-05

Applicant: 徐州医科大学 ,  扬州大学

Inventor： 乔丹丹 ,  胡安康 ,  钱琨 ,  秦爱建 ,  张林吉 ,  刘婷隽 ,  陈全刚 ,  吴连连

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明公开一种检测鹅细小病毒抗体的Cell‑ELISA试剂盒及方法，包括：细胞微孔板，所述细胞微孔板固定在Cell‑ELISA试剂盒内，细胞微孔板上培养有能稳定表达小鹅瘟病毒VP3基因的293T细胞；及阳性对照、阴性对照、酶标试剂、样品稀释液、显色液、终止液和洗涤液。本发明采用了适用于大规模筛选抗VP3抗原的Cell‑ELISA方法，Cell‑ELISA试剂盒用稳定表达VP3蛋白的细胞代替可溶性抗原固定于96孔细胞培养板，不需裂解细胞便可直接测量微孔板里的蛋白变化。在操作过程中，不涉及传统免疫印迹法的制胶、跑胶、转膜、曝光等步骤，简单，很容易实现多个平行，多次重复，所得数据具有统计分析意义。

公开(公告)号：CN115820638A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211207679.2

申请日：2022-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  钱金涵 ,  朱亭帆 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  羊扬 ,  闫彩虹 ,  叶建强 ,  钱琨 ,  王倩倩 ,  邓建中 ,  王建 ,  郑建高 ,  金松 ,  洪枫 ,  王培永 ,  张文成 ,  卞红春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA，是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知，所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖，而且能够作为一种新的基因治疗手段，应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制，同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备，从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。

公开(公告)号：CN113354717B

公开(公告)日：2022-04-08

申请号：CN202110631147.0

申请日：2021-06-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李拓凡 ,  阚秋琪 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  邵红霞 ,  谢泉

IPC: C07K14/165 ,  C07K19/00 ,  C12N15/50 ,  C12N15/70 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原及其特异性中和抗体和应用，属于病毒免疫检测技术领域。一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，与SARS‑CoV‑2人阳性血清的反应，能够特异性与新冠病毒抗体结合。基于本发明的多肽序列，利用PCR、原核表达及蛋白纯化技术，制备了三重SARS‑CoV‑2广谱多肽串联融合蛋白，模拟SARS‑CoV‑2S蛋白自然状态下三聚体模式，以该融合蛋白作为抗原免疫小鼠，可以产生抗SARS‑CoV‑2特异性中和抗体，所述中和抗体在SARS‑CoV‑2抗感染治疗、疫苗研发和检测试剂盒研制中将具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN113981137A

公开(公告)日：2022-01-28

申请号：CN202110084845.3

申请日：2021-01-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  尹丹 ,  吕卉 ,  鲍春晖 ,  钱琨 ,  邵红霞 ,  叶建强 ,  缪发明 ,  扈荣良

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用。所述荧光定量PCR试剂盒中含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物，荧光定量PCR反应试剂，以及标准品和和对照品。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对非洲猪瘟病毒进行检测，该试剂盒的特异性强，只与非洲猪瘟病毒特异性结合,与其他猪源病毒没有交叉反应；而且检测的灵敏度高，在标准品为1×101～1×108拷贝范围内都有极好的线性关系，可以高效检测非洲猪瘟病毒病猪棉拭子以及无临床症状的病毒携带猪，提高了检测效率。

公开(公告)号：CN111979211B

公开(公告)日：2021-11-30

申请号：CN202010746714.2

申请日：2020-07-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  何倩 ,  沈逵 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C07K16/40 ,  G01N33/573 ,  A61K38/45 ,  A61P31/04 ,  A61P31/12 ,  A61P37/02 ,  A61P35/00 ,  A61P39/06

Abstract: 本发明涉及一种能诱导鸡cGAS蛋白抗体的多肽，该多肽氨基酸序列为：PRATRGRGTAARRG，本发明制备的抗体能够与转染cGAS的293T细胞反应，还可以与天然家禽细胞中的cGAS蛋白发生特异性反应，该抗体不仅可以用于间接免疫荧光检测cGAS蛋白，还可以用于免疫蛋白印迹实验中cGAS蛋白的检测。该发明经济快速，方便，适用于相关研究中快速制备抗体工具。

公开(公告)号：CN113201561A

公开(公告)日：2021-08-03

申请号：CN202110497755.7

申请日：2021-05-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李露媛 ,  李拓凡 ,  万志敏 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  谢泉 ,  相汝苹

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及到一种精确敲除鸡NHE1基因W38位氨基酸的细胞系构建方法，本发明的原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向鸡NHE1基因W38位氨基酸的sgRNA，之后转染带有sgRNA和Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因位点的精确敲除，通过药物筛选及亚克隆的方法获得单克隆细胞株，从而获得鸡源NHE1基因W38位敲除的细胞系。

公开(公告)号：CN113061586A

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN202110332476.5

申请日：2021-03-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  路浩 ,  谢泉 ,  连明君 ,  王伟康 ,  李拓凡 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/861 ,  C12N15/113 ,  C12N15/34 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，发明的原理和最核心的关键技术是利用sgRNA，替换EGFP后进行病毒纯化，获得可以稳定扩增血清8型禽腺病的纤突蛋白的重组禽腺病毒。利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入的血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F，成功获得了表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白的重组FAdV‑4，在体外实验结果显示，FAdV4‑F1‑F‑F2重组病毒与FAdV‑4野毒的复制能力几乎相同，可作为防控FAdV‑4和FAdV‑8的灭活重组多价苗。

公开(公告)号：CN112760320A

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN202011394290.4

申请日：2020-12-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  朱亭帆 ,  钱金涵 ,  沈子君 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  叶建强 ,  刘金彪 ,  王倩倩 ,  王建 ,  王姣 ,  柴文娴 ,  周小兵 ,  邓建中 ,  郑建高

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于基因工程和生物制品研究领域，具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA，所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸：1)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比，本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制，不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发，而且可用于抗病猪品系培育。

公开(公告)号：CN109295010B

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN201811178904.8

申请日：2018-10-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  任丹 ,  李拓凡 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  高巍 ,  张鑫宇

IPC: C12N7/00 ,  C12N7/02 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种利用鸡肝细胞进行坦布苏病毒高效扩增的方法，包括以下步骤：（1）细胞培养：将鸡肝细胞用含体积浓度为10%胎牛血清的DMEM‑F12培养基进行培养，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以质量浓度为0.25%的胰酶进行消化、传代至细胞培养板中；（2）鸡肝细胞高效扩增坦布苏病毒：将鸡肝细胞接种至细胞培养板内培养，在汇合度为60%到70%时，将坦布苏病毒AHRD2018株接种鸡肝细胞，MOI为0.01，以2ml含体积浓度为2%胎牛血清的培养基培养4天，定时收集200μl上清冻存于‑80℃冰箱备用，同时每孔补200μl含体积浓度为2%胎牛血清的培养基。本发明利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，利用病毒复制速率显著高于DF‑1细胞和BHK‑21细胞的鸡肝细胞来扩增坦布苏病毒。

公开(公告)号：CN107603957B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201710935163.2

申请日：2017-10-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李拓凡 ,  孙舒 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢菁 ,  吕璐

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，本发明采用鸡肝细胞可高效扩增J亚群禽白血病病毒，利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，缩短J亚群禽白血病病毒分离检测时间，实现提早检测到病原，提高J亚群禽白血病病毒检测方法的敏感度。在J亚群禽白血病病毒感染MOI为0.001时，ELISA检测感染维持培养3天的鸡肝细胞的效果与感染维持培养7天的DF‑1细胞相当。本发明建立发高效扩增方法的将加快J亚群禽白血病病毒的净化进程，节约时间、成本，本发明在J亚群禽白血病病毒净化检测中具有很好的应用价值。