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公开(公告)号：CN112326963A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011236849.0
申请日：2020-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , C07K14/11 , C07K1/22 , C12N15/44 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483)，并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达，通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性，可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。
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公开(公告)号：CN109402070B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201811308245.5
申请日：2018-11-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种重组H7N9亚型禽流感病毒株、标记疫苗及其制备方法，属于动物疫苗技术领域。重组H7N9亚型禽流感病毒株，以H7N9亚型禽流感病毒JD/17病毒株为母本病毒株，用H3亚型的氨基酸序列替换所述JD/17病毒株的HA蛋白中氨基酸序列；所述H7N9亚型禽流感病毒JD/17病毒株的保藏编号为CCTCC NO.V201862。通过测定HA效价、EID50、TCID50，结果显示拯救的病毒株保持了母本病毒株相似的生物学特性，具有较高的HA效价和EID50，经灭活乳化后制备的标记疫苗免疫鸡群产生的抗体水平较高，且该抗体能与鸡自然感染H7N9亚型禽流感病毒后产生的抗体相区别。
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公开(公告)号：CN111154728A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010029846.3
申请日：2020-01-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K16/10 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于免疫领域，涉及一种用于H7N9亚型禽流感病毒HA多肽竞争抑制ELISA抗体检测的单克隆抗体及方法。本发明公开了H7-12多肽抗体单克隆抗体杂交瘤细胞株3G10(CCTCC No：C2019150)及其在H7N9亚型禽流感病毒HA多肽的竞争抑制ELISA抗体检测中的应用。本发明利用筛选到的单抗3G10作为竞争抗体建立一种竞争抑制ELISA方法，用来检测H7N9病毒感染血清抗体；因为H7N9灭活标记疫苗所产生的抗体中没有针对H7-12的抗体，所以该方法又能作为标记疫苗配套的检测方法，用于区分临床上H7N9亚型AIV野毒感染血清和标记疫苗免疫血清，为H7N9亚型AIV的净化提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN106498092B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201610960388.9
申请日：2016-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生命科学与生物技术领域，涉及一种联合检测H5亚型禽流感病毒与新城疫强毒的一步法实时荧光定量PCR的试剂盒。该试剂盒包括引物、探针、及PCR试剂，所述引物及探针包括：(1)序列如SEQ ID NO：1‑3所示的检测H5亚型禽流感病毒的引物及探针：(2)序列如SEQ ID NO：4‑6所示的检测新城疫强毒的引物及探针。本发明所太守的试剂盒适用于H5亚型禽流感病毒和新城疫强毒的定量检测和流行病学实时监测。
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公开(公告)号：CN109666767A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201910104444.2
申请日：2019-02-01
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种检测并区分H7亚型禽流感病毒强弱毒的一步法实时荧光定量PCR引物、探针及试剂盒。所述引物是检测H7亚型禽流感病毒强弱毒的通用引物H7-FP和H7-RP，所述探针是检测H7N9亚型禽流感病毒强毒的探针H7-HPProbe:和检测H7N9亚型禽流感病毒弱毒的探针H7-LPProbe。本发明还公开了包括上述引物和探针的试剂盒。本发明可以特异性地检测H7亚型禽流感病毒并区分其强毒和弱毒，对其他亚型禽流感病毒或其他禽类病毒均无明显扩增曲线。单个反应系统可以同时检测出最低50拷贝每反应体系的H7亚型禽流感病毒弱毒的基因片段或50拷贝每反应体系的H7亚型禽流感病毒弱毒的基因片段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109207441A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201810912587.1
申请日：2018-08-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/11 , C12N15/866 , C12N15/34 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于疫苗制造技术领域。本发明公开了一种重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白。本发明还公开了用于构建重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的引物。本发明又公开了用于重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的构建方法，包括以下步骤：1、构建包含PCV3全基因组的pSK-sPCV3；2、转移载体的构建；3、穿梭质粒的构建；4、重组杆状病毒的获得；将阳性穿梭质粒Bacmid-Cap转染Sf9细胞，获得表达猪圆环病毒3型Cap基因的重组杆状病毒rBac-Cap。本发明表达的Cap蛋白具有良好的生物学活性，免疫小鼠发现具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN106834242A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710122176.8
申请日：2017-03-02
Applicant: 扬州大学
Abstract: 嵌合型猪圆环病毒活疫苗C1‑233株及其构建方法，属于疫苗研究生产技术领域，包括PCV1、PCV2毒株的筛选、表达猪圆环病毒2b型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株的构建、重组病毒核酸、氨基酸序列的组成特征与生物学特性。最终获得可用于工业化生产的表达猪圆环病毒2b型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株（C1‑233株）。
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公开(公告)号：CN106834241A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710120656.0
申请日：2017-03-02
Applicant: 扬州大学
Abstract: 嵌合型猪圆环病毒活疫苗C1‑402株及其构建方法，属于疫苗研究生产技术领域，包括PCV1、PCV2毒株的筛选、表达猪圆环病毒2d型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株的构建、重组病毒核酸、氨基酸序列的组成特征与生物学特性。最终获得可用于工业化生产的表达猪圆环病毒2d型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株（C1‑402株）。
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公开(公告)号：CN103525774A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310466147.5
申请日：2013-10-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 表达传染性喉气管炎病毒gB蛋白的重组新城疫病毒（NDV）疫苗株rAI4-gB及其构建方法，所述新城疫疫苗株rAI4-gB，它的保藏号CGMCC No：8053。其构建方法是利用已建立的基因VII型NDV致弱毒AI4株的反向遗传操作平台，将SEQ ID NO.7所示的序列插入AI4株基因组全长转录载体pNDV/AI4中，得到含有传染性喉气管炎病毒gB基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/AI4-gB。经转染获得的重组病毒rAI4-gB在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，连续传代仍能稳定表达gB蛋白，适合于疫苗的大规模生产，可用于制造疫苗。
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公开(公告)号：CN102776156B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201210240399.1
申请日：2012-07-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4及其构建方法。所述基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4，它的保藏号CGMCCNo：6149。本发明涉及应用反向遗传技术，利用含有鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi基因组全长的转录载体pTVT/071204，对其F基因进行致弱突变后获得转录载体ApTVT/071204，再将新城疫病毒rNDV/I4的NP、P和L基因片段替换ApTVT/071204上的对应部分，得到重组质粒ApTVT/ⅥbI4，该质粒与辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞后成功拯救出重组病毒ⅥbI4。该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，适合于疫苗的大规模生产，可用于制造疫苗。
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