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公开(公告)号:CN103869084A
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201410132953.3
申请日:2014-04-03
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/6866 , G01N33/577
Abstract: 抗牛γ干扰素双抗体夹心ELISA试剂盒及其制备方法,属于生物技术检测领域,从杂交瘤细胞株BovinIFNgamma-3E1分泌获得抗牛γ干扰素单克隆抗体3E1,从杂交瘤细胞株BovinIFNgamma-6E5分泌获得抗牛γ干扰素单克隆抗体6E5,将抗牛γ干扰素单克隆抗体3E1包被在酶标板上,在抗牛γ干扰素单克隆抗体6E5上标记酶。以此制备具有包被抗牛γ干扰素单克隆抗体3E1的酶标板和酶标记抗牛γ干扰素单克隆抗体6E5的检测牛γ干扰素的双抗体夹心ELISA试剂盒,具有操作简便,不需要精密仪器,普通实验室即可进行的特点。
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公开(公告)号:CN103773891A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201410067290.1
申请日:2014-02-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst?DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM?dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM?MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR?GreenⅠ)。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。
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公开(公告)号:CN100510082C
公开(公告)日:2009-07-08
申请号:CN200710024386.X
申请日:2007-06-18
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/33
Abstract: 一种淋巴组织特异性基因表达调控序列及其构建方法,本发明涉及基因表达调控和基因工程领域,提供了用于淋巴细胞中特异性高表达的基因调控DNA序列。具有马立克氏病病毒编码的vIL8基因淋巴组织特异性基因表达正调控的启动子-470-+10的DNA序列。人们可用该基因序列构建相应的表达载体,驱动目的基因在靶器官组织中的特异性表达,用这些调控DNA序列在特定组织,调控一些抑制肿瘤的基因,包括有调理作用或诱导凋亡、抑制细胞生长信号传导,从而达到抑制、消灭肿瘤的目的,用这些调控DNA序列进行免疫增强和调节的药物研究与开发。
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公开(公告)号:CN101452000A
公开(公告)日:2009-06-10
申请号:CN200810242893.5
申请日:2008-12-30
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明提供了一种快速检测牛γ干扰素的试纸条及其制备方法。所说的试纸条由标记好对照线和检测线的NC膜、免疫金垫、样品垫、吸水滤纸和PVC底板构成。其中所说的对照线的成分是抗鼠IgG,检测线的成分是抗牛r-IFN单克隆抗体;所说的免疫金垫是载有胶体金标记的单克隆抗体的玻璃棉。上述试纸条包括胶体金标记抗体、喷金、制作硝酸纤维素膜和组装的步骤。本发明的试纸条用于检测样本中的牛γ干扰素,从而可以用于牛结核病等疫病检测和诊断。该方法简便、快速,可以用肉眼直接观察,5-10分钟即出结果,适用于基层各级兽医部门和出入境牛结核的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN1295330C
公开(公告)日:2007-01-17
申请号:CN200510038289.7
申请日:2005-01-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 抗病毒活性重组鸡γ-干扰素的制取方法及用途,涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN-γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中,获得重组转移质粒pFASTBACl-ChIFN-γ;取DH10Bac感受态细胞,加入1ng pFASTBACl-ChIFN-γ,转座后,用SOC培养基稀释培养物,涂布Luria平板,培养后,挑取白色菌落,Luria平板进行纯化,阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ,提取阳性质粒DNA;取上述阳性质粒DNA转染Sf9细胞,制得高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。
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公开(公告)号:CN1403155A
公开(公告)日:2003-03-19
申请号:CN02138397.9
申请日:2002-10-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K38/21 , C12N15/81 , C07K14/555 , A61P15/08
Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域。应用一步法逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对奶牛γ-干扰素(BovIFN-γ)基因的cDNA序列进行扩增,从奶牛脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将BovIFN-γ基因克隆到大肠杆菌表达载体PGEX-6P-1谷光甘肽-S-转移酶的下游,经IPTG诱导后,表达融合蛋白;或将BovIFN-γ基因克隆到酵母高效表达载体,通过转化酵母细胞,获得阳性克隆,并大量表达基因产物;通过亲和层析纯化,大量制备表达产物,通过细胞病变抑制试验证实,表达产物有极好的抑制VSV病毒的活性。或将BovIFN-γ基因插入到pcDNA3,通过大量制备质粒DNA,以质粒DNA直接注射奶牛乳腔,使其BovIFN-γ基因在乳腺中大量表达,从而达到预防或治疗奶牛隐性乳房炎的目的。
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公开(公告)号:CN119101660A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202410802456.3
申请日:2024-06-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/075 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种识别高致病性血清4型禽腺病毒Hexon蛋白第188位氨基酸的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用,该细胞株2C5的保藏编号为CGMCC NO.45829,并分泌一种特异性识别高致病性血清4型禽腺病毒六邻体Hexon蛋白单克隆抗体2C5,其识别的抗原表位的氨基酸序列为Hexon蛋白GPGRNP,其中Hexon蛋白中R188氨基酸是其识别的关键氨基酸。本发明制备的单抗2C5具有高致病性FAdV‑4的特异性,能够特异性识别高致病性FAdV‑4,而与非致病性FAdV‑4和其他血清型的FAdV没有交叉反应,可作为诊断试剂应用于区分高致病性FAdV‑4和非致病性FAdV‑4。
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公开(公告)号:CN118185885A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410361207.5
申请日:2024-03-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术构建的表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其构建方法,H3N8禽流感病毒HA蛋白,其序列如SEQ ID NO.1所示;重组血清4型禽腺病毒,其中使用H3N8禽流感病毒HA基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因,替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸。本发明利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入H3N8禽流感病毒HA基因,成功获得了表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒,此重组病毒可作为免疫防控H3N8以及血清4型腺病毒的二联疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN117187196A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202310898939.3
申请日:2023-07-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/45 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/64 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达新城疫病毒F基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用,重组病毒株的名称为rCVI988‑F,保藏编号为:CGMCC No.45557;构建方法包括:构建带有绿色荧光基因的CVI988BAC eGFP载体;在CVI988BAC eGFP载体US2基因内部插入Kan‑loxp‑pMLV‑F表达盒,得到含有Kan‑loxp‑pMLV‑F表达盒的重组质粒;将重组质粒转染到CEF细胞中,拯救病毒后,利用cre‑loxp重组系统敲除卡那霉素和BAC序列基因,挑斑纯化,得到重组马立克氏病病毒株。本发明提供的重组病毒株具有良好的遗传稳定性、可以用于制备预防新城疫和鸡马立克氏病的生物制品。
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公开(公告)号:CN116948991A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310898267.6
申请日:2023-07-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/90 , C12N15/40 , C12N15/45 , C12N15/113 , A61K39/295 , A61K39/17 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种共表达鸡新城疫病毒(NDV)F基因和鸡传染性法氏囊新型变异株(nVarIBDV)VP2基因的重组火鸡疱疹病毒、疫苗及其应用。在先前构建的rHVT‑Fopt的基础上,联合使用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术和Cre/Lox重组酶系统,将nVarIBDV/SN1905‑2株的VP2基因表达盒插入rHVT‑Fopt重组病毒的US2区,构建了一种HVT载体多联疫苗rHVT‑Fopt‑VP2,它能够同时表达基因VII型NDV的F蛋白和IBDV新型变异株的VP2蛋白。本发明获得的重组病毒rHVT‑Fopt‑VP2株,在体外可以稳定表达NDV F基因和nVarIBDV VP2基因,具有同时防控鸡新城疫和鸡传染性法氏囊病的潜力。
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