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公开(公告)号：CN102220366B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201110105392.4
申请日：2011-04-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过超量表达comA基因提高枯草杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌ATCC9943为出发菌株，以整合载体pDK为骨架构建一个基因超量表达载体pDK-ComA，利用同源重组原理，通过双交换过程将comA基因整合到枯草芽孢杆菌ATCC9943基因组的方法构建了一个高产抗菌肽菌株FMB27。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产surfactin和fengycin的能力大大提高。
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公开(公告)号：CN103409457A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310197112.6
申请日：2013-05-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型枯草杆菌表达系统及产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌。一种新型枯草杆菌表达系统，包括基因工程菌株BS-T710与表达载体pBT-23a。一株产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB，是将来基因gadB插入至所述的表达载体pBT-23a，获得重组表达载体pBT-23a-gad，利用化学转化法，将pBT-23a-gad转化入所述的基因工程菌株BS-T710，获得所述的产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB。该系统可用于高效表达外源基因，并且只需使用一种诱导物。重组工程菌BS‐T710‐gadB细胞，能够将MSG高效地转化为γ‐GABA。
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公开(公告)号：CN103351471A
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201310295626.5
申请日：2013-07-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种乳清蛋白膜及其制备方法。该乳清蛋白膜是通过在纯水中加入乳清蛋白、甘油制得成膜液，成膜液于45-50℃水浴加热0.5-2h，冷却至室温后，加入重组脂肪氧合酶及亚油酸，超声脱气后,倒入铺有塑封膜的玻璃培养皿中，室温（20-25℃）反应2-3h，50-55℃干燥36-48h揭膜。本发明以乳清蛋白为基料，以甘油为增塑剂，通过添加重组鱼腥藻脂肪氧合酶作为交联剂所制备的乳清蛋白膜，绿色可食用，拉伸强度、透光性、吸水度、可塑性均表现出良好的性质。
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公开(公告)号：CN102021164B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201010535809.6
申请日：2010-11-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种无抗生素抗性标记的枯草芽孢杆菌构建方法及筛选靶基因失活的枯草芽孢杆菌的方法。本方法首先以枯草芽孢杆菌168为出发菌株，构建两个同源交换片段，利用同源重组原理，通过两次双交换过程构建了一个可调控的赖氨酸营养缺陷型菌株BS-PS。以大肠杆菌克隆载体pMD19-T为骨架构建了通用型整合突变载体PLC，以枯草芽孢杆菌中性蛋白酶nprE为失活靶基因，采用插入失活策略，以PLC为基础，构建了插入失活nprE的整合载体PLC-InprE，转化入BS-PS，通过一次单交换，以及一次自发单交换过程，以控制赖氨酸的合成为筛选标记结合PCR验证结果，对蛋白酶插入失活的突变菌株进行筛选。
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公开(公告)号：CN102757909B
公开(公告)日：2013-05-29
申请号：CN201210204548.9
申请日：2012-06-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于本发明属于生物技术领域，涉及一种产芽孢漆酶的死亡谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）菌株fmb-103。产芽孢漆酶的死亡谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）fmb-103，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2012年06月08日，保藏号为CGMCC No.6198。所述的保藏号为CGMCC No.6198的死亡谷芽孢杆菌fmb-103能够产芽孢漆酶可在降解三苯甲烷类染料中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102220367A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110105395.8
申请日：2011-04-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过超量达yerP基因提高枯草杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌ATCC9943为出发菌株，以大肠杆菌克隆载体pHCMC04为骨架构建一个基因超量表达载体pHCMC-YerP，通过电转化将其转入到枯草杆菌ATCC9943中使yerP基因超量表达，构建了一个高产抗菌肽菌株FMB45。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产surfactin和fengycin的能力大大提高。
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公开(公告)号：CN102174558A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110071211.0
申请日：2011-03-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过敲除abrB基因提高枯草杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌ATCC9943为出发菌株，以大肠杆菌克隆载体pGEM-T为骨架构建一个基因敲除载体pAbrB-Cm，利用同源重组原理，通过双交换过程敲除枯草芽孢杆菌ATCC9943基因组abrB基因的方法构建了一个高产抗菌肽菌株FMB29。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产surfactin和fengycin的能力大大提高，并通过质谱鉴定了改良菌体FMB29发酵产物中surfactin和fengycin的存在。
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公开(公告)号：CN101643740B
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN200910184504.2
申请日：2009-08-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及鱼腥藻PCC7120脂肪氧合酶基因，属于食品工业生物技术领域。该基因来源于鱼腥藻(Anabaena sp.PCC 7120)，通过PCR从基因组DNA中扩增获得，插入表达载体后转化大肠杆菌，诱导表达，表达出的重组酶催化不饱和脂肪酸的氧化，生成共轭双键的脂肪酸氢过氧化衍生物。氢过氧化物作为不稳定的初级酶促产物可进一步发生一系列氧化次级反应，在面粉品质改良中在以下两个方面具有重要应用价值：(1)氧化具有还原性的半胱氨酸，形成二硫键，应用于面粉品质改良，提高面筋强度，替代具有致癌作用的溴酸钾；(2)氧化色素类物质，应用于面粉的漂白，替代过氧化苯甲酰。
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公开(公告)号：CN102021164A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN201010535809.6
申请日：2010-11-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种无抗生素抗性标记的枯草芽孢杆菌构建方法及筛选靶基因失活的枯草芽孢杆菌的方法。本方法首先以枯草芽孢杆菌168为出发菌株，构建两个同源交换片段，利用同源重组原理，通过两次双交换过程构建了一个可调控的赖氨酸营养缺陷型菌株BS-PS。以大肠杆菌克隆载体pMD19-T为骨架构建了通用型整合突变载体PLC，以枯草芽孢杆菌中性蛋白酶nprE为失活靶基因，采用插入失活策略，以PLC为基础，构建了插入失活nprE的整合载体PLC-InprE，转化入BS-PS，通过一次单交换，以及一次自发单交换过程，以控制赖氨酸的合成为筛选标记结合PCR验证结果，对蛋白酶插入失活的突变菌株进行筛选。
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公开(公告)号：CN101985625A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010535839.7
申请日：2010-11-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种陆生伊萨酵母乙醛脱氢酶基因及其表达载体。该基因序列为SEQ ID NO.16，其开放阅读框序列为SEQ IDNO.17，其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO.18。将其插入表达载体后转化大肠杆菌，IPTG诱导表达。表达出的重组酶可催化乙醛氧化生成乙酸。本发明提供了一种新型、高活性的乙醛脱氢酶基因，利用本发明基因，实现在大肠杆菌中的重组表达，克服了发酵陆生伊萨酵母(Issatchenkia terricola XJ-2)生产乙醛脱氢酶产量低的缺点，可提供大量的乙醛脱氢酶进行解酒制品的研究；并且为构建安全的乙醛脱氢酶基因工程菌奠定了基础。
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