对大肠杆菌059的O-抗原特异的核苷酸

    公开(公告)号:CN1453358A

    公开(公告)日:2003-11-05

    申请号:CN03129935.0

    申请日:2003-05-27

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 杨静华 冯露

    Abstract: 本发明提供一种对大肠杆菌059(Escherichia coli059)的O-抗原特异的核苷酸,它是大肠杆菌059中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列,如SEQ ID NO:1所示的分离的核苷酸,全长10450个碱基;或者具有一个或多个插入、缺失或取代的碱基,同时保持所述分离的核苷酸功能的SEQ ID NO:1的核苷酸;还包括源于大肠杆菌059的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因的寡核苷酸。本发明通过PCR证实寡核苷酸对大肠杆菌059的O-抗原都有高度的特异性。本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的大肠杆菌059的方法。

    对大肠杆菌O172型的O-抗原特异的核苷酸

    公开(公告)号:CN1442424A

    公开(公告)日:2003-09-17

    申请号:CN03109589.5

    申请日:2003-04-15

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 郭宏杰 冯露

    Abstract: 本发明提供一种对大肠杆菌O172型(Escherichiacoli O172)的O-抗原特异的核苷酸,它是大肠杆菌O172型中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列,如SEQ ID NO:1所示的分离的核苷酸,全长12850个碱基;或者具有一个或多个插入、缺失或取代的碱基,同时保持所述分离的核苷酸功能的SEQ ID NO:1的核苷酸;还包括源于大肠杆菌O172型的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因的寡核苷酸;本发明通过PCR证实寡核苷酸对大肠杆菌O172型的O-抗原都有高度的特异性;本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的大肠杆菌O172型的方法。

    鲍氏志贺氏菌7型的O-抗原特异的核苷酸

    公开(公告)号:CN1429832A

    公开(公告)日:2003-07-16

    申请号:CN03100536.5

    申请日:2003-01-20

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 陶江 冯露

    Abstract: 本发明提供一种鲍氏志贺氏菌7型的O-抗原特异的核苷酸,其是鲍氏志贺氏菌7型(Shigella boydii 7)中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列,还包括O-抗原基因簇的结构以及源于鲍氏志贺氏菌7型的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因(包括wzx基因或与wzx有相似功能的基因、wzy基因或与wzy相似功能的基因)的寡核苷酸,并且包括获得细菌O-抗原基因簇的方法,本发明通过PCR证实它们对鲍氏志贺氏菌7型的O-抗原都有高度的特异性,本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的鲍氏志贺氏菌7型的方法。

    一种合成3-岩藻乳糖的重组大肠杆菌构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN112501095B

    公开(公告)日:2023-05-26

    申请号:CN202011420762.9

    申请日:2020-12-08

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种生产3‑岩藻乳糖的基因工程菌及其构建方法与应用,所述基因工程菌为经过特定基因改造的大肠杆菌;使用该菌利用葡萄糖发酵生产3‑岩藻乳糖能够克服化学合成法反应条件苛刻、能耗大等不足;能够克服酶催化法存在的工艺复杂、生产成本高等不足。发酵48h后,3‑岩藻乳糖产量达到了5‑7g/L,具有非常大的应用前景,为生物法生成3‑岩藻乳糖糖提供了新的思路。

    合成致新生儿脑膜炎大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的大肠杆菌工程菌及用途

    公开(公告)号:CN108774628B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN201810705416.1

    申请日:2018-07-02

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 黄笛 江小龙

    Abstract: 本发明公开了一种合成致新生儿脑膜炎大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的大肠杆菌工程菌及用途。涉及构建合成致新生婴儿脑膜炎大肠杆菌O1血清型糖蛋白结合疫苗细胞工厂的方法。它是利用酿酒酵母高效的同源重组效率,基于DNA Assembler的方法,构建O1抗原合成基因簇质粒。在大肠杆菌JM109中转化O1抗原合成基因簇穿梭质粒,通过脂多糖提取,凝胶电泳和银染鉴定质粒;在FLP‑FRT辅助下删除JM109中的waaL和wecA,排除原始不完整O抗原的干扰。改造pET28a(+)质粒,经诱导,合成糖蛋白结合疫苗,借助于AKTA Primeplus蛋白纯化工作站纯化糖蛋白并通过western‑blotting鉴定该糖蛋白。本发明构建的重组大肠杆菌为生物法合成糖蛋白结合疫苗提供了新的思路。

    一种对蜂房哈夫尼亚菌PCM1188血清型O抗原分子分型的检测方法

    公开(公告)号:CN111763753A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010594153.9

    申请日:2020-06-28

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及对蜂房哈夫尼亚菌(Hafinia alvei,Ha)PCM1188血清型的O抗原使用基于MGB探针的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系进行分析。本发明以蜂房哈夫尼亚菌O抗原基因簇内的特异基因,即wzy为靶基因,建立了对蜂房哈夫尼亚菌的O抗原分型的引物及MGB探针,为土壤、水、污水和食物中蜂房哈夫尼亚菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针检测土壤、水、污水和食物中的蜂房哈夫尼亚菌,并且对其进行O抗原分型,具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。

    对蜂房哈夫尼亚菌G5897,G5898,G5900特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN105112406B

    公开(公告)日:2018-12-04

    申请号:CN201510473542.5

    申请日:2015-08-04

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及对蜂房哈夫尼亚菌G5897,G5898,G5900特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸包括1)SEQ ID NO:1‑6所示的核苷酸中的一种。这些核苷酸可用于制备检测蜂房哈夫尼亚菌的PCR试剂盒和基因芯片。本发明是蜂房哈夫尼亚菌G5897,G5898,G5900特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片,该技术操作方法简便,检测周期短,检测成本较低,准确性高,灵敏度高,易于产业化生产。

    对亲水气单胞菌O7,O8,O9和O10特异的核苷酸及应用

    公开(公告)号:CN105255871B

    公开(公告)日:2018-10-26

    申请号:CN201510730617.3

    申请日:2015-11-02

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种对亲水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)O抗原特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸包括1)SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的至少一种;2)与SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸互补的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测亲水气单胞菌用PCR试剂盒和基因芯片。本发明的对亲水气单胞菌O抗原特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片的实用性强,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于产业化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

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