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公开(公告)号：CN113122527B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202110447738.2
申请日：2021-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种酶活提高及最适pH改变的天冬氨酸酶突变体，属于基因工程技术领域；所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在来源于Bacillus sp.YM55‑1天冬氨酸酶的基础上，将第12位亮氨酸突变为天冬氨酸，将第166位酪氨酸突变为谷氨酸，将第169位谷氨酰胺突变为谷氨酸，将第314位精氨酸突变为甲硫氨酸，从而提升了该酶的pH适应性，同时增强了该酶合成β‑氨基丁酸的能力，有利于工业化生产β‑氨基丁酸。
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公开(公告)号：CN110791494A
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201911191601.4
申请日：2019-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种天冬氨酸酶突变体、包含天冬氨酸酶突变体的重组表达载体和重组菌及应用，属于基因工程技术领域；所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在天冬氨酸酶(氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示)的基础上，将第427位谷氨酸突变成了谷氨酰胺。本发明通过将天冬氨酸酶的第427位氨基酸残基突变成谷氨酰胺，改变了活性位点附近的极性环境，更有利于底物反应时的氨供给，从而提高酶活，加强了该酶合成β-氨基酸的能力，为其工业化生产提供了一种实际有效策略。
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公开(公告)号：CN113122527A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202110447738.2
申请日：2021-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种酶活提高及最适pH改变的天冬氨酸酶突变体，属于基因工程技术领域；所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在来源于Bacillus sp.YM55‑1天冬氨酸酶的基础上，将第12位亮氨酸突变为天冬氨酸，将第166位酪氨酸突变为谷氨酸，将第169位谷氨酰胺突变为谷氨酸，将第314位精氨酸突变为甲硫氨酸，从而提升了该酶的pH适应性，同时增强了该酶合成β‑氨基丁酸的能力，有利于工业化生产β‑氨基丁酸。
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公开(公告)号：CN111849848B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ‑氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21‑pET28a(+)‑YafC‑Gad，并用于生物转化生产γ‑氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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公开(公告)号：CN108559735A
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201810443305.8
申请日：2018-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供一种亮氨酸脱氢酶突变体的构建及其应用，属于基因工程领域。本发明提供了SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.8三个亮氨酸脱氢酶突变体，以及上述突变体或产生突变体的基因工程菌在氨化还原α-酮酸制备光学纯手性L-α-氨基酸中的应用。本发明在于：所述亮氨酸脱氢酶突变体或含有突变体基因工程菌氨化还原制备L-α-氨基酸具有高催化活性及稳定性，能够合成高光学纯度L-α-氨基酸(ee>99％)，如突变体酶催化L-苯甘氨酸的转化速率提高了2.62倍，为其工业化生产提供了一种实际有效策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110607290B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201911046656.6
申请日：2019-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的苯丙氨酸脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体对苯丙酮酸的底物特异性较野生型有了明显的改善，同时，对L‑正缬氨酸、L‑亮氨酸、L‑缬氨酸、L‑苯甘氨酸的特异性较野生型有了明显的降低，因此，将本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体用于血液等样品中苯丙氨酸含量的检测时，可排除其他氨基酸的干扰，提高检测灵敏度，在制备苯丙氨酸检测试剂盒以及苯丙酮尿症检测试剂盒方面具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN109182237B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201811042938.4
申请日：2018-09-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酸胁迫抗性提高的乳酸菌工程菌及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明以编码金属离子ABC转运ATP结合蛋白ZitQ(metal ABC transporter ATP‑binding protein)的基因为目的基因，以乳酸菌为表达宿主，成功构建了一种可广泛应用于制备食品、药品、饲料以及化学品的乳酸菌工程菌；此乳酸菌工程菌的酸胁迫抗性得到了显著提高，较野生菌株最高提高了9.4倍。
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公开(公告)号：CN111849848A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ-氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21-pET28a(+)-YafC-Gad，并用于生物转化生产γ-氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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公开(公告)号：CN110607290A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201911046656.6
申请日：2019-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的苯丙氨酸脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体对苯丙酮酸的底物特异性较野生型有了明显的改善，同时，对L-正缬氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸、L-苯甘氨酸的特异性较野生型有了明显的降低，因此，将本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体用于血液等样品中苯丙氨酸含量的检测时，可排除其他氨基酸的干扰，提高检测灵敏度，在制备苯丙氨酸检测试剂盒以及苯丙酮尿症检测试剂盒方面具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN109182237A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811042938.4
申请日：2018-09-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C07K14/195
Abstract: 本发明公开了一种酸胁迫抗性提高的乳酸菌工程菌及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明以编码金属离子ABC转运ATP结合蛋白ZitQ(metal ABC transporter ATP-binding protein)的基因为目的基因，以乳酸菌为表达宿主，成功构建了一种可广泛应用于制备食品、药品、饲料以及化学品的乳酸菌工程菌；此乳酸菌工程菌的酸胁迫抗性得到了显著提高，较野生菌株最高提高了9.4倍。
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