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公开(公告)号:CN111499744B
公开(公告)日:2021-08-10
申请号:CN202010341697.4
申请日:2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种乳铁蛋白纳米抗体及制备方法,并提供一种利用乳铁蛋白纳米抗体纯化乳铁蛋白的方法。该乳铁蛋白纳米抗体为VHH抗体,具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列,将所述乳铁蛋白纳米抗体与填料偶联得到可以用于乳铁蛋白纯化的填料,所述偶联乳铁蛋白单链抗体的填料,能成功结合乳铁蛋白,且载量较高,可以用于乳铁蛋白的分离纯化以及工业化生产。
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公开(公告)号:CN111499745A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010341773.1
申请日:2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C07K16/18 , C07K16/06 , G01N33/539
Abstract: 本发明提供了一种CRP单价及双价纳米抗体,所述纳米抗体具有较高的ELISA效价,可以用于CPR的实验室和临床检测,且经试验表明,CRP双价纳米抗体的亲和活性比单价纳米抗体增加了10倍,取得了预料不到的技术效果。所述CRP单价及双价纳米抗体容易利用微生物进行生产,并具有很高的产率,有利于工业化生产。
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公开(公告)号:CN106754981B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201710049003.8
申请日:2017-01-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法,一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法,对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化,定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上,构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2,并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌,通过IPTG在37℃下诱导,获得可溶性重组VP2重组蛋白;将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒,并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性,可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN106754981A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201710049003.8
申请日:2017-01-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法,一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法,对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化,定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上,构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2,并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌,通过IPTG在37℃下诱导,获得可溶性重组VP2重组蛋白;将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒,并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性,可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN118086523A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410264515.6
申请日:2024-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心) , 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的成套引物探针组及其应用。本发明设计并筛选了可用于实时荧光RPA检测细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的成套引物探针组,建立了一种基于荧光RPA技术的双重快速检测细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的方法。通过实验证明:本发明方法可以同时检测细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫两种病原,操作简便、快速,能够在20分钟内进行常温下的单分子核酸检测,大大提高了检测效率,节约了检测时间及检测成本,且特异性强、灵敏度高(灵敏度可达10copies/μL DNA样本)、实验重复性好,适用于现场高通量样品快速检测,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。
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公开(公告)号:CN111499744A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010341697.4
申请日:2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种乳铁蛋白纳米抗体及制备方法,并提供一种利用乳铁蛋白纳米抗体纯化乳铁蛋白的方法。该乳铁蛋白纳米抗体为VHH抗体,具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列,将所述乳铁蛋白纳米抗体与填料偶联得到可以用于乳铁蛋白纯化的填料,所述偶联乳铁蛋白单链抗体的填料,能成功结合乳铁蛋白,且载量较高,可以用于乳铁蛋白的分离纯化以及工业化生产。
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公开(公告)号:CN111499745B
公开(公告)日:2021-08-10
申请号:CN202010341773.1
申请日:2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C07K16/18 , C07K16/06 , G01N33/539
Abstract: 本发明提供了一种CRP单价及双价纳米抗体,所述纳米抗体具有较高的ELISA效价,可以用于CPR的实验室和临床检测,且经试验表明,CRP双价纳米抗体的亲和活性比单价纳米抗体增加了10倍,取得了预料不到的技术效果。所述CRP单价及双价纳米抗体容易利用微生物进行生产,并具有很高的产率,有利于工业化生产。
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公开(公告)号:CN112010949B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN202010764917.4
申请日:2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供一种重组PCV2病毒样颗粒疫苗制备方法,所述的制备方法是通过对猪圆环病毒2型Cap蛋白进行优化,并利用重组无内毒素大肠杆菌高密度发酵,获得高表达量的猪圆环病毒2型病毒样颗粒。本发明的猪圆环病毒2型Cap蛋白,其相比原始序列增加了一对二硫键,并对相应的序列片段进行优化,试验结果表明,通过所述序列的优化增加了病毒样颗粒疫苗的免疫原性,试验结果表明,通过高密度发酵与高效表达实现了Cap蛋白的高效表达,10倍浓缩表达菌可获得1:64‑1:128的琼扩效价;相比未优化的序列和其他佐剂的疫苗。
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公开(公告)号:CN112010949A
公开(公告)日:2020-12-01
申请号:CN202010764917.4
申请日:2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供一种重组PCV2病毒样颗粒疫苗制备方法,所述的制备方法是通过对猪圆环病毒2型Cap蛋白进行优化,并利用重组无内毒素大肠杆菌高密度发酵,获得高表达量的猪圆环病毒2型病毒样颗粒。本发明的猪圆环病毒2型Cap蛋白,其相比原始序列增加了一对二硫键,并对相应的序列片段进行优化,试验结果表明,通过所述序列的优化增加了病毒样颗粒疫苗的免疫原性,试验结果表明,通过高密度发酵与高效表达实现了Cap蛋白的高效表达,10倍浓缩表达菌可获得1:64-1:128的琼扩效价;相比未优化的序列和其他佐剂的疫苗。
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公开(公告)号:CN113956351A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202111323477.X
申请日:2021-11-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种抗猪圆环病毒2型Cap蛋白纳米抗体、双价中和纳米抗体及其应用。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体由两个相同氨基酸序列的单价纳米抗体组成,单价纳米抗体的可变区具有3个特定序列的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体既具有优异的特异性抗原结合能力,又具有稳定的PCV2病毒中和活性;在猪圆环病毒相关疾病防治、尤其是在PCV2感染后作为治疗药物中的应用具有广泛价值。
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