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公开(公告)号：CN114621965B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210138785.3
申请日：2022-02-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体及应用。该3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得，并公开基于突变体的C1,C2位脱氢催化合成甾体药物及甾体药物中间体的应用。本发明通过全基因合成获得来源于Mycobacterium smegmatis mc2155的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶基因，采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株，通过分子改造技术实现酶活力的提高。以3‑甾酮化合物原料，采用全细胞或酶蛋白催化的方法，催化合成甾体药物或药物中间体。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物，环境友好，是一种绿色生物催化合成途径。
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公开(公告)号：CN115873813A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202211544390.X
申请日：2022-12-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物制药和生物化工技术领域，具体为酶催化级联合成宝丹酮的方法。本发明以廉价易得的雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮为底物，通过3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶和17β‑羟基脱氢酶催化的级联反应合成宝丹酮。本发明涉及3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体及其编码基因，突变体的获得，含有3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶基因和17β‑羟基脱氢酶基因的重组表达载体及重组表达转化体，3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶及其突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.2，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，17β‑羟基脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明简化了甾体药物的合成步骤，显著提高催化选择性和产率，并且底物浓度高、反应条件温和，成本低廉，绿色环保。
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公开(公告)号：CN118324837A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202311809796.0
申请日：2023-12-26
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于化学合成技术领域，具体为一种16β‑甲基‑17α‑羟基糖皮质激素及类似物的制备方法。本发明由原料化合物16‑甲基‑16‑烯‑20‑酮一步合成目标产物16β‑甲基‑17α‑羟基糖皮质激素及其类似物：16‑甲基‑16‑烯‑20‑酮在氧气或者空气的存在下，以锰催化剂、铁催化剂或钴催化剂为催化剂，以硅氢为氢化试剂，在有机溶剂中进行水合反应；再通过亚磷酸三乙酯或亚磷酸三甲酯作为还原剂进行还原，得到16β‑甲基‑17α‑羟基糖皮质激素及其类似物。本发明将原来三或四步反应缩短至一步；反应产率和选择性高，能以极高的dr值构建β甲基；反应在室温下进行，条件温和，操作简便，设备要求低，适于工业化生产。
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公开(公告)号：CN114621965A
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202210138785.3
申请日：2022-02-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体及应用。该3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得，并公开基于突变体的C1,C2位脱氢催化合成甾体药物及甾体药物中间体的应用。本发明通过全基因合成获得来源于Mycobacterium smegmatis mc2155的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶基因，采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株，通过分子改造技术实现酶活力的提高。以3‑甾酮化合物原料，采用全细胞或酶蛋白催化的方法，催化合成甾体药物或药物中间体。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物，环境友好，是一种绿色生物催化合成途径。
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