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公开(公告)号：CN103013824A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210561470.6
申请日：2012-12-21
Applicant: 复旦大学
IPC: C12M1/40
Abstract: 本发明属微流控芯片技术领域，具体为一种基于硅凝胶氧化石墨烯复合膜的蛋白酶解微流控芯片及其制备方法。石墨粉通过化学氧化和超声分散得氧化石墨烯水溶液，与正硅烷乙酯水解制得的硅溶胶混合后，注入表面经硅凝胶化处理的有机玻璃微流控芯片通道内，一定时间后移出修饰溶液并干燥得修饰有硅凝胶氧化石墨烯复合膜的微流控芯片。然后，在通道内注入1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的混合溶液，使通道表面氧化石墨烯上的羧基活化，接着注入胰蛋白酶等蛋白酶溶液，使蛋白酶通过共价键进行固定，得蛋白酶解微流控芯片。本发明制备的微流控芯片蛋白酶解反应器具有酶解时间短、样品用量少和价格低廉等优点。
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公开(公告)号：CN111777696B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202010573338.1
申请日：2020-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质富集技术领域，涉及一种特异性可逆富集新生蛋白质的方法。用AHA标记细胞，提取全蛋白；取细胞全蛋白和炔基树脂通过click反应连接；用不同的缓冲液洗涤非特异吸附的蛋白质，以除去非特异性吸附的蛋白质；用胰蛋白酶酶切释放目标肽段；收集样品进行质谱分析。与现有技术相比，本发明通过生物标记、选择性共价键合、严格洗脱条件及选择性解离，实现对新合成低丰度蛋白质的高选择性富集，结合nano‑LC‑MS/MS能够实现大规模分析鉴定蛋白质，根据增加的质量标签可以进一步指认新生蛋白质。本方法为新生蛋白质的高效富集和准确指认提供了高效的方法，广泛用于低丰度的新生蛋白质组学的研究领域。
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公开(公告)号：CN103013824B
公开(公告)日：2014-10-29
申请号：CN201210561470.6
申请日：2012-12-21
Applicant: 复旦大学
IPC: C12M1/40
Abstract: 本发明属微流控芯片技术领域，具体为一种基于硅凝胶氧化石墨烯复合膜的蛋白酶解微流控芯片及其制备方法。石墨粉通过化学氧化和超声分散得氧化石墨烯水溶液，与正硅烷乙酯水解制得的硅溶胶混合后，注入表面经硅凝胶化处理的有机玻璃微流控芯片通道内，一定时间后移出修饰溶液并干燥得修饰有硅凝胶氧化石墨烯复合膜的微流控芯片。然后，在通道内注入1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的混合溶液，使通道表面氧化石墨烯上的羧基活化，接着注入胰蛋白酶等蛋白酶溶液，使蛋白酶通过共价键进行固定，得蛋白酶解微流控芯片。本发明制备的微流控芯片蛋白酶解反应器具有酶解时间短、样品用量少和价格低廉等优点。
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公开(公告)号：CN100340856C
公开(公告)日：2007-10-03
申请号：CN200410016100.X
申请日：2004-02-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明是一种质谱分析用的纳升喷雾装置。它由一个三通、喷雾头、注射针头和钼丝组成，喷雾头与三通的一端口密封连接，钼丝焊接固定于针头的尖端，针头由三通的一端口插入，穿过三通的另一端，钼丝前端伸入喷雾头的尖端部；三通的第三端口为气体通路。其中钼丝提供电接触，由气体通路提供辅助气体，帮助喷雾。本装置制作方便，操作简单，喷雾稳定性好，具有广阔应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118425532A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410630781.6
申请日：2024-05-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种快速富集N‑乙酰葡萄糖胺修饰的肽段的方法，用GalNAz标记细胞后提取蛋白并酶解成肽段；肽段溶液与炔基树脂通过click反应连接，用不同的缓冲液洗涤炔基树脂上非特异吸附肽段；用胰蛋白酶切割释放肽段，收集样品进行LC‑MS/MS分析。炔基树脂是由含有一条作为linker的炔基肽段GGTENLYFQG(L‑aPra)与醛基树脂通过还原烷基化反应连接得到的，linker部分在胰蛋白酶酶切后产生裂解标签Tc‑tag共价键连接在糖肽的GlcNAc部分上，可用于质谱鉴定和肽段指认。本发明整个富集流程得到极大简化，且带上的标签质谱兼容，产生特定质量的氧鎓离子能帮助鉴定和指认O‑GlcNAc糖肽。此外，对于O‑GlcNAc这种低丰度修饰而言，该方法大大减少了富集过程中的样品损失，降低了需要的样品起始量。
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公开(公告)号：CN114371297A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202111631965.7
申请日：2021-12-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种固相富集结合串联酶切标签的富集新生蛋白质的方法，用AHA标记细胞后提取全蛋白；取细胞裂解液和炔基树脂通过click反应连接，用不同的缓冲液洗涤炔基树脂上非特异吸附的蛋白；用胰蛋白酶和TEV酶顺次酶切释放肽段，收集样品进行LC‑MS/MS分析；所述炔基树脂为将炔基肽段GGTENLYFQG(aPra)与醛基树脂通过还原烷基化反应连接得到的炔基树脂，所述炔基肽段中，ENLYFQG序列是TEV酶识别的序列，Q和G之间是酶切的位点，酶切后G(aPra)作为可裂解标签Tc‑tag共价键连接在AHA肽段上，用于质谱鉴定和肽段指认。本发明方法实现了新生蛋白质的高效富集，质量标签质谱兼容且帮助鉴定和指认新生蛋白质。此外，整个富集流程得到极大简化，降低了样本需要量。
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公开(公告)号：CN1558230A
公开(公告)日：2004-12-29
申请号：CN200410016100.X
申请日：2004-02-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明是一种质谱分析用的纳升喷雾装置。它由一个三通、喷雾头、注射针头和钼丝组成，喷雾头与三通的一端口密封连接，钼丝焊接固定于针头的尖端，针头由三通的一端口插入，穿过三通的另一端，钼丝前端伸入喷雾头的尖端部；三通的第三端口为气体通路。其中钼丝提供电接触，由气体通路提供辅助气体，帮助喷雾。本装置制作方便，操作简单，喷雾稳定性好，具有广阔应用前景。
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公开(公告)号：CN111777696A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010573338.1
申请日：2020-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质富集技术领域，涉及一种特异性可逆富集新生蛋白质的方法。用AHA标记细胞，提取全蛋白；取细胞全蛋白和炔基树脂通过click反应连接；用不同的缓冲液洗涤非特异吸附的蛋白质，以除去非特异性吸附的蛋白质；用胰蛋白酶酶切释放目标肽段；收集样品进行质谱分析。与现有技术相比，本发明通过生物标记、选择性共价键合、严格洗脱条件及选择性解离，实现对新合成低丰度蛋白质的高选择性富集，结合nano-LC-MS/MS能够实现大规模分析鉴定蛋白质，根据增加的质量标签可以进一步指认新生蛋白质。本方法为新生蛋白质的高效富集和准确指认提供了高效的方法，广泛用于低丰度的新生蛋白质组学的研究领域。
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