公开(公告)号：CN111777696B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202010573338.1

申请日：2020-06-22

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陆豪杰 ,  包慧敏 ,  邵钰银

IPC: C08B37/12 ,  G01N1/40

Abstract: 本发明属于蛋白质富集技术领域，涉及一种特异性可逆富集新生蛋白质的方法。用AHA标记细胞，提取全蛋白；取细胞全蛋白和炔基树脂通过click反应连接；用不同的缓冲液洗涤非特异吸附的蛋白质，以除去非特异性吸附的蛋白质；用胰蛋白酶酶切释放目标肽段；收集样品进行质谱分析。与现有技术相比，本发明通过生物标记、选择性共价键合、严格洗脱条件及选择性解离，实现对新合成低丰度蛋白质的高选择性富集，结合nano‑LC‑MS/MS能够实现大规模分析鉴定蛋白质，根据增加的质量标签可以进一步指认新生蛋白质。本方法为新生蛋白质的高效富集和准确指认提供了高效的方法，广泛用于低丰度的新生蛋白质组学的研究领域。

公开(公告)号：CN111777696A

公开(公告)日：2020-10-16

申请号：CN202010573338.1

申请日：2020-06-22

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陆豪杰 ,  包慧敏 ,  邵钰银

IPC: C08B37/12 ,  G01N1/40

Abstract: 本发明属于蛋白质富集技术领域，涉及一种特异性可逆富集新生蛋白质的方法。用AHA标记细胞，提取全蛋白；取细胞全蛋白和炔基树脂通过click反应连接；用不同的缓冲液洗涤非特异吸附的蛋白质，以除去非特异性吸附的蛋白质；用胰蛋白酶酶切释放目标肽段；收集样品进行质谱分析。与现有技术相比，本发明通过生物标记、选择性共价键合、严格洗脱条件及选择性解离，实现对新合成低丰度蛋白质的高选择性富集，结合nano-LC-MS/MS能够实现大规模分析鉴定蛋白质，根据增加的质量标签可以进一步指认新生蛋白质。本方法为新生蛋白质的高效富集和准确指认提供了高效的方法，广泛用于低丰度的新生蛋白质组学的研究领域。