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公开(公告)号：CN119040237A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411458935.4
申请日：2024-10-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗逆的大肠杆菌及其构建方法与在丁二酸生产中的应用，以大肠杆菌BER208为宿主成功构建出一种过量表达CsgA基因和异源表达Psl(A‑J)基因簇的重组菌株，通过构建表达质粒pDonor‑CsgA‑Psl(A‑J)高效表达大肠杆菌胞外淀粉样纤维Curli和胞外多糖Psl；在阿拉伯糖的诱导下，实现了重组大肠杆菌生物被膜形成能力的有效提高。本发明构建的重组大肠杆菌对丁二酸发酵过程中高渗透压和低pH的耐受能力明显提高，重组大肠杆菌的丁二酸生产能力显著增强。本发明的方法显著提高了大肠杆菌在丁二酸生产过程中的抗逆性能，有利于大肠杆菌丁二酸发酵的工业化应用。
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公开(公告)号：CN118685337A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410917099.5
申请日：2024-07-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及表达Psl多糖的大肠杆菌工程菌株及其构建方法和应用。以大肠杆菌为宿主菌株，阿拉伯糖启动子araC‑pBAD为启动子，表达来源于铜绿假单胞菌的psl基因簇的片段，最终实现Psl多糖在大肠杆菌中成功异源表达，获得以大肠杆菌为宿主菌的可实现生物被膜多糖合成的工程菌株。
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公开(公告)号：CN114317585B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202111669695.9
申请日：2021-12-31
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/78 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , C12Q1/689 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了液滴微流控辅助的双鼠李糖脂高产菌株筛选方法。分析鼠李糖脂合成的关键基因的转录水平和双鼠李糖脂产量的关系，选择转录水平和双鼠李糖脂产量正相关的关键基因作为荧光筛选标记，以荧光蛋白的信号强度表征该关键基因的转录水平，利用不同鼠李糖脂生产菌株胞内荧光蛋白信号强度的差异进行液滴微流控筛选，挑选出荧光强度高的备选菌株，通过鼠李糖脂发酵产物提取、鉴定和比较，最终从备选菌株中挑选性能优异的高产双鼠李糖脂的菌株。本发明建立的技术筛选精度高、通量大、特异性强、可定向筛选高产双鼠李糖脂的菌株。克服了目前CTAB‑MB平板筛选技术筛选效率低，且无法定向筛选高产双鼠李糖的瓶颈。
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公开(公告)号：CN112522358B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202011415612.9
申请日：2020-12-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物处理技术领域，具体公开了一种评价聚氨酯降解的体系，将降解聚氨酯菌的种子液接入含有聚氨酯的无机盐培养基中培养，降解聚氨酯，再通过质量损失、电镜扫描、红外光谱检测、凝胶色谱检测、浊度和降解产物鉴定中的任意一种或几种组合的方法来评价降解效果；其中，所述的聚氨酯为水性聚氨酯或聚氨酯薄膜。本发明建立了一种评价聚氨酯降解的体系，即对两种聚氨酯底物(PU模拟物Impranil DLN和PU薄膜)，通过微生物降解，基于物理表征的浊度变化、质量损失、表面降解情况等手段和基于化学表征的表面官能团变化、分子量变化、降解产物的鉴定等手段来评估聚氨酯底物的降解情况，从而能完整表征聚氨酯的降解效果。
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公开(公告)号：CN115109079A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210703623.X
申请日：2022-06-21
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07D519/00 , C09K11/06 , C12Q1/04 , C12Q1/18 , C12Q1/44 , G01N21/64 , C12R1/19 , C12R1/385 , C12R1/865
Abstract: 本发明涉及聚氨酯降解酶特异性荧光探针、其制备方法及应用。利用4,4’‑亚甲基双(异氰酸苯酯)与1,4’‑丁二醇合成聚氨酯骨架结构后，将荧光分子与3‑氨基丙酸反应得到带羧基的荧光分子，所述带羧基的荧光分子与合成的所述聚氨酯骨架结构上的羟基发生酯化反应，得到所述聚氨酯降解酶特异性荧光探针。本发明设计的探针对参与聚氨酯降解的酯酶具有高度选择特异性，可以有效避免其他非特异性酶的干扰。探针被菌株分泌的酯酶水解后具有荧光增强效应，利用菌株对荧光探针水解效果不同导致的荧光差异为筛选指标，进行液滴微流控分选，挑选出荧光强度高的菌株。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118726217A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410880860.2
申请日：2024-07-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了利用乙二醇和葡萄糖产苹果酸的工程菌及构建方法和应用，所述工程菌以大肠杆菌为宿主菌，宿主菌中柠檬酸合酶gltA的内源组成型启动子替换为双启动子开关，并内源过表达丙二醇氧化还原酶fucO基因和乙醛脱氢酶aldA基因；所述双启动子开关为lac启动子系统和四环素调控表达系统构成的开关结构。本发明构建了一个代谢切换开关，实现大肠杆菌的中心代谢途径向合成途径的代谢通量重定转变，使得大肠杆菌工程菌可以实现共利用乙二醇与葡萄糖，并积累产生苹果酸。该路线为含乙二醇的废弃碳资源，如聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）尤其是涤棉解聚物的高值转化提供新的路线，也为苹果酸的生物合成提供廉价原料。
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公开(公告)号：CN118652471A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410675800.7
申请日：2024-05-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种多酶级联氧化降解聚乙烯的方法，包括以正辛烷为初始底物，在NADPH和缓冲液的存在下，经烷烃羟化酶P450、醇脱氢酶ADH、BV单加氧酶BVMO以及酯酶共同处理，得到正己醇；通过单因素优化，确定正己醇产量最高条件下的酶反应温度、缓冲液种类和pH、NADPH的投入量、烷烃羟化酶P450投入量、醇脱氢酶ADH投入量、BV单加氧酶BVMO投入量、酯酶投入量、助溶剂种类和添加量，作为综合最优条件；之后将聚乙烯在综合最优条件下进行多酶级联处理。该人工多酶级联体系成功实现将正辛烷和聚乙烯中的碳碳键氧化断裂并降解并生成正己醇等小分子醇。该体系可应用于预处理后聚乙烯薄膜的酶法解聚，以及聚乙烯热裂解油的降解。
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公开(公告)号：CN112481137B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202011412031.X
申请日：2020-12-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株枝孢菌及其在降解聚氨酯塑料中的应用，所述株枝孢菌的分类命名为枝孢菌(Cladosporium sp.)，菌株名为P7，已保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为CCTCC NO：M 2020627，保藏日期为2020年10月23日。本发明所采用的菌株P7可以利用Impranil DLN为唯一碳源生长，在7天内对水性聚氨酯Impranil DLN的降解率达95.8％。此外，该菌株对聚氨酯泡沫有着较高的降解效果，在15d可降解86.6％聚氨酯泡沫。因此，本发明对于塑料废弃物的生物治理上有着极其重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN114317585A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111669695.9
申请日：2021-12-31
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/78 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , C12Q1/689 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了液滴微流控辅助的双鼠李糖脂高产菌株筛选方法。分析鼠李糖脂合成的关键基因的转录水平和双鼠李糖脂产量的关系，选择转录水平和双鼠李糖脂产量正相关的关键基因作为荧光筛选标记，以荧光蛋白的信号强度表征该关键基因的转录水平，利用不同鼠李糖脂生产菌株胞内荧光蛋白信号强度的差异进行液滴微流控筛选，挑选出荧光强度高的备选菌株，通过鼠李糖脂发酵产物提取、鉴定和比较，最终从备选菌株中挑选性能优异的高产双鼠李糖脂的菌株。本发明建立的技术筛选精度高、通量大、特异性强、可定向筛选高产双鼠李糖脂的菌株。克服了目前CTAB‑MB平板筛选技术筛选效率低，且无法定向筛选高产双鼠李糖的瓶颈。
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公开(公告)号：CN112553108A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011442856.6
申请日：2020-12-08
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/20 , A62D3/02 , A62D101/26 , A62D101/28 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于生物处理技术领域，具体公开了一株短芽孢杆菌及其在降解聚氨酯中应用。所述的株短芽孢杆菌，其分类命名为短芽孢杆菌(Brevibacillus sp.)，菌株名为P10，已保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为CCTCC NO：M 2020626，保藏日期为2020年10月23日。本发明所提供的降解菌株不仅能够降解PU模拟物Impranil DLN，而且表现出良好的聚氨酯真实塑料薄膜降解能力。这是很多已知的能够降解Impranil DLN菌株所不具备。另外，菌株P10所涉及到实验耗材价格低廉，实验技术绿色高效，将为聚氨酯生物降解生物技术工艺的发展带来更高的效益。
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