一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN114231664A

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202111446874.6

    申请日:2021-11-30

    Abstract: 本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法,包括RGNNV引物组,所述引物组包括正向引物和反向引物,正向引物序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物序列如SEQ ID NO.2所示;还包括在正向引物前段加上T7启动子序列,所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示,得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法,包括以下步骤:S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录;S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立;S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中;S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。

    一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN114231664B

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202111446874.6

    申请日:2021-11-30

    Abstract: 本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法,包括RGNNV引物组,所述引物组包括正向引物和反向引物,正向引物序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物序列如SEQ ID NO.2所示;还包括在正向引物前段加上T7启动子序列,所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示,得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法,包括以下步骤:S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录;S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立;S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中;S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。

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