一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用

    公开(公告)号:CN118895287B

    公开(公告)日:2025-03-21

    申请号:CN202410934117.0

    申请日:2024-07-12

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用。本发明首次从84K杨树中克隆出果胶甲酯酶基因PagPME2,并且利用分子生物学和生物化学技术,证明PagPME2基因确实具备果胶甲酯酶的催化特性,是一个具有果胶甲酯酶功能的新基因。本发明提供的果胶甲酯酶基因PagPME2编码的果胶甲酯酶酶活力高达24.69U,能够催化果胶的主要成分半乳糖醛酸的去甲酯化反应,降低果胶多糖的甲酯化程度,从而改变果胶分子的物理性质和化学性质,为后续深入探究果胶甲酯酶的理化性质及其在食品、医药、纺织、生物质转化、植物生长发育等领域的重要作用提供应用价值。

    一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用

    公开(公告)号:CN118895287A

    公开(公告)日:2024-11-05

    申请号:CN202410934117.0

    申请日:2024-07-12

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用。本发明首次从84K杨树中克隆出果胶甲酯酶基因PagPME2,并且利用分子生物学和生物化学技术,证明PagPME2基因确实具备果胶甲酯酶的催化特性,是一个具有果胶甲酯酶功能的新基因。本发明提供的果胶甲酯酶基因PagPME2编码的果胶甲酯酶酶活力高达24.69U,能够催化果胶的主要成分半乳糖醛酸的去甲酯化反应,降低果胶多糖的甲酯化程度,从而改变果胶分子的物理性质和化学性质,为后续深入探究果胶甲酯酶的理化性质及其在食品、医药、纺织、生物质转化、植物生长发育等领域的重要作用提供应用价值。

    一种简单快速的透明方法

    公开(公告)号:CN109632431A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201910111417.8

    申请日:2019-02-12

    CPC classification number: G01N1/28

    Abstract: 本发明公开了一种新鲜植物叶片透明的方法,该方法包括以下步骤:1)用直径为1cm的打孔器将新鲜植物叶片打成圆片状;2)将圆片状植物叶片FAA固定液固定;3)使用PBS缓冲液洗涤植物叶片3‑4次;4)使用体积/体积(V/V)百分比浓度为75%的乙醇脱水处理;5)使用体积/体积(V/V)百分比浓度为85%的乙醇溶液脱水处理;6)使用体积/体积(V/V)百分比浓度为95%的乙醇溶液脱水处理;7)使用无水乙醇溶液脱水处理12h;8)使用pH为7.2的PBS缓冲液洗涤植物叶片2次;9)将圆片状植物叶片完全浸入到透明液中,避光处理1‑2天。本发明操作简单,快速易行,效果明显,将在新鲜植物的透明化研究中发挥重要作用,具有较大的实际应用价值。

    一种GFP多克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN105273082A

    公开(公告)日:2016-01-27

    申请号:CN201510607983.X

    申请日:2015-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种GFP蛋白多克隆抗体的制备方法,首先用DNAstar软件对GFP蛋白进行抗原预测分析,选择亲水性强,抗原性指数高的两段区域作为抗原区,然后通过设计引物,用含有GFP核苷酸序列的pCAMBIA1300质粒做模板,进行扩增;把抗原基因片段连接到pET28a载体上,重组质粒转化入BL21中,筛选阳性克隆并PCR鉴定;选用日本大耳白兔,在注射抗原的同时,加入免疫佐剂刺激机体产生较强的免疫反应,对多克隆抗体兔进行双肩皮下两点和双后腿肌肉两点常规免疫;纯化IgG抗体。本发明所制备的抗体具有效价高,灵敏性好,可重复等优点,可以有效弥补现有GFP抗体的缺点和不足;可以有效降低抗体的非特异性。

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