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公开(公告)号:CN101864413A
公开(公告)日:2010-10-20
申请号:CN201010184510.0
申请日:2010-05-27
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 5’-RACE接头序列添加方法及接头序列和5’端未知基因完整编码序列的扩增方法,它涉及一种接头序列添加方法及接头序列和基因完整编码序列的扩增方法。它解决现有接头序列添加方法存在的对mRNA 5’末端信息的完整性没有选择性及模板复杂度高等缺陷。5’-RACE接头序列添加:一、根据目的基因与目的物种设计特异性逆转录引物和接头序列;二、逆转录添加接头序列。接头序列如SEQ ID NO:10所示。5’端未知基因完整编码序列扩增:一、设计引物;二、逆转录并添加接头;三、巢式PCR扩增;四、测序,分析。本发明5’-RACE接头序列添加方法具有对mRNA 5’末端信息的完整性有选择性及基因克隆效率高等优点。