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公开(公告)号：CN101956003A
公开(公告)日：2011-01-26
申请号：CN201010251752.7
申请日：2010-08-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 猪基因组中外源基因整合位点的检测方法，本发明涉及外源基因整合位点的检测方法。本发明解决了现有外源基因整合位点的检测方法操作复杂，误差较大的问题。方法：一、分别针对TgInS1、TgInS2和TgInS3外源基因插入基因组中的位点进行PCR扩增；二、电泳检测，即实现了猪基因组中外源基因整合位点的检测。本发明的方法操作简单，且与现有的外源基因整合位点的检测方法相比较，人为误差小，检测结果准确。
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公开(公告)号：CN108244095B
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201710802837.1
申请日：2017-09-08
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种猪冻精解冻稀释液及其配制方法，本发明属于猪冻精解冻技术领域。本发明要解决的技术问题是猪冷冻精液在解冻稀释过程中极易发生精子的氧化损伤。本发明的组分：D‑葡萄糖、果糖、氯化钾、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠，柠檬酸三钠、聚乙烯醇、庆大霉素、黄芪多糖和白藜芦醇。方法：一、将D‑葡萄糖、果糖、氯化钾、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠，柠檬酸三钠、聚乙烯醇，用双蒸水配制成水溶液；二、置于26℃水浴锅中平衡至充分溶解并且pH值稳定；三、除菌滤器过滤；四、使用前30分钟加入庆大霉素、黄芪多糖和白藜芦醇。本发明有效地产生抗氧化作用，降低了冻精解冻稀释过程剧烈稳定变化对精子的氧化损伤。
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公开(公告)号：CN108707600A
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201810553064.2
申请日：2018-05-31
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/08
CPC classification number: C12N15/02
Abstract: 一种猪鼠细胞单细胞融合方法，属于细胞工程技术领域。本发明针对目前异种细胞融合效率低的问题，提供了一种单细胞融合方法,以小鼠胚胎干细胞与猪多能性干细胞或猪成纤维细胞作为细胞融合对象，用含质量分数为0.25％的胰酶的消化液将猪、鼠细胞消化成单细胞，经培养后，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有质量分数为50％的聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得猪鼠单细胞的融合细胞。本发明适用于动物育种研究或单克隆抗体的生产。
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公开(公告)号：CN118995709A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411165770.1
申请日：2024-08-23
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开一种提高基因编辑效率的重组型pegRNA及其应用，属于生物技术领域。本发明的目的是为了提高基因的编辑效率，提供一种基因编辑的工具。一种提高基因编辑效率的重组型pegRNA，以pegRNA序列为出发序列，将53位至56位碱基替换为锁状序列。为基因的编辑提供更有效的工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108707599A
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201810552641.6
申请日：2018-05-31
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/06
CPC classification number: C12N15/02
Abstract: 一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法,属于细胞工程技术领域。针对细胞融合效率低的问题，本发明提供了一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法，是以小鼠胚胎干细胞(mESC)作为细胞融合对象，用含质量分数0.25％胰酶的消化液将mESC消化成单细胞，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有50％聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得小鼠胚胎干细胞融合细胞。本发明适用于动物育种的研究或单克隆抗体的生产。
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公开(公告)号：CN107227307A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710483310.7
申请日：2017-06-23
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90
CPC classification number: C12N15/113 , C07K14/47 , C12N9/22 , C12N15/85 , C12N15/907 , C12N2810/10
Abstract: 一种特异靶向猪IRS1基因的sgRNA导向序列及其应用，涉及一种sgRNA导向序列及应用。该sgRNA导向序列为CGTAGTACTCGAGGCGCGCG。本发明提供的sgRNA导向序列可通过CRISPR/Cas9系统敲除或编辑IRS1基因，进而消除IRS1的表达，为制备IRS1转基因猪奠定基础。本发明应用于基因工程领域。
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公开(公告)号：CN118480135A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410697366.2
申请日：2024-05-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统及其应用，属于活细胞检测技术领域。本发明为解决现有技术中MCP‑MS2系统存在目标RNA表达与转运不稳定，成像信噪比较低，荧光背景较高的技术问题，提供一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统，所述RNA实时示踪系统包括MS2环状结构和MS2外壳蛋白。本发明提供的RNA实时示踪系统实现了活细胞内源性和外源性RNA成像和双色荧光标记的目的，提升了靶标位点的荧光信号，显著提高了信噪比，降低了荧光背景。本发明提供的RNA实时示踪系统可应用于活细胞RNA实时示踪成像，具体指利用RNA实时示踪系统对RNA的空间定位、蛋白翻译和RNA位移过程进行监控。
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公开(公告)号：CN117418319A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311275904.0
申请日：2023-09-28
Applicant: 东北农业大学
IPC: C40B40/02 , C40B50/06 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种猪全转录因子激活文库构建方法及其筛选调控OCT4基因的转录因子的方法，属于分子生物学领域。本发明解决了目前基因组规模的功能获得筛选方法在很大程度上局限于cDNA文库过表达系统的使用，而合成和使用聚合cDNA文库的成本高且复杂的问题。本发明为了筛选猪中调控OCT4表达的转录因子，构建了猪全转录因子CRISPR激活文库，具体技术方案如下：首先筛选猪的转录因子，针对转录因子设计合成sgRNA后构建慢病毒sgRNA文库，同时构建既表达OCT4启动子驱动的EGFP，又表达dCas9‑SAM系统元件的细胞系，最后利用构建好的sgRNA文库感染该细胞系，再通过sgRNA富集来筛选调控OCT4表达的转录因子。本研究所述的方法可为猪这一物种筛选和研究转录因子功能及调控网络提供有力的工具。
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公开(公告)号：CN117050935A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310913897.6
申请日：2023-07-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种诱导猪多能性细胞的诱导剂以其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。为了提供一种利用表达内源性重编程因子获得多能性细胞的方法。本申请公开一种诱导猪多能性细胞的诱导剂，所述诱导剂为以Cas12a‑Activ载体作为基础载体骨架，将24个基因的sgRNA串联合成一个片段，然后连接到基础载体骨架中获得Cas12a‑Activ‑24重组载体或以Cas12a‑Activ载体作为基础载体骨架，将10个基因的sgRNA串联合成一个片段，然后连接到基础载体骨架中获得Cas12a‑Activ‑10重组载体。CRISPR内源激活的重编程方法拓宽了猪成纤维细胞重编程的可用工具。
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