公开(公告)号：CN108707600A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810553064.2

申请日：2018-05-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘忠华 ,  牟彦双 ,  郭佳 ,  方园 ,  厉雪纯

IPC: C12N15/08

CPC classification number: C12N15/02

Abstract: 一种猪鼠细胞单细胞融合方法，属于细胞工程技术领域。本发明针对目前异种细胞融合效率低的问题，提供了一种单细胞融合方法,以小鼠胚胎干细胞与猪多能性干细胞或猪成纤维细胞作为细胞融合对象，用含质量分数为0.25％的胰酶的消化液将猪、鼠细胞消化成单细胞，经培养后，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有质量分数为50％的聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得猪鼠单细胞的融合细胞。本发明适用于动物育种研究或单克隆抗体的生产。

公开(公告)号：CN108707599A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810552641.6

申请日：2018-05-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘忠华 ,  牟彦双 ,  郭佳 ,  方园 ,  厉雪纯

IPC: C12N15/06

CPC classification number: C12N15/02

Abstract: 一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法,属于细胞工程技术领域。针对细胞融合效率低的问题，本发明提供了一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法，是以小鼠胚胎干细胞(mESC)作为细胞融合对象，用含质量分数0.25％胰酶的消化液将mESC消化成单细胞，利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对，在含有50％聚乙二醇中培养1min，随后将细胞继续培养7天，获得小鼠胚胎干细胞融合细胞。本发明适用于动物育种的研究或单克隆抗体的生产。

公开(公告)号：CN107227307A

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201710483310.7

申请日：2017-06-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟彦双 ,  翁晓刚 ,  刘忠华 ,  吕嘉伟 ,  郭佳

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90

CPC classification number: C12N15/113 ,  C07K14/47 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85 ,  C12N15/907 ,  C12N2810/10

Abstract: 一种特异靶向猪IRS1基因的sgRNA导向序列及其应用，涉及一种sgRNA导向序列及应用。该sgRNA导向序列为CGTAGTACTCGAGGCGCGCG。本发明提供的sgRNA导向序列可通过CRISPR/Cas9系统敲除或编辑IRS1基因，进而消除IRS1的表达，为制备IRS1转基因猪奠定基础。本发明应用于基因工程领域。

公开(公告)号：CN107119053A

公开(公告)日：2017-09-01

申请号：CN201710483307.5

申请日：2017-06-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟彦双 ,  刘忠华 ,  郭佳 ,  马伟超 ,  郭超

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/113 ,  A01K67/0276 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/108 ,  A01K2267/03 ,  C07K14/47 ,  C12N15/8509 ,  C12N15/907

Abstract: 一种特异靶向猪MC4R基因的sgRNA导向序列及应用，涉及一种sgRNA导向序列及应用。该sgRNA导向序列为CGTCTCGCGCTTGGACTCAG。本发明提供的sgRNA导向序列可通过CRISPR/Cas9系统敲除或编辑MC4R基因，进而消除MC4R的表达，为制备MC4R转基因猪奠定基础。本发明应用于基因工程领域。