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公开(公告)号:CN103602682B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201310562507.1
申请日:2013-11-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/66 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种抑制IRS2基因表达的shRNA及应用,属于基因工程技术领域。本发明提供的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1。本发明还提供了一种抑制IRS2基因表达的shRNA干扰载体。根据克隆经对比分析后的猪源IRS2基因保守序列,合成带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点干扰片段,并将干扰片段连接到经过BamH Ⅰ和HindⅢ线性化的质粒载体上,经筛选后获得有效干扰载体。本发明提供的shRNA及其干扰载体,能够有效抑制IRS2基因的表达,影响细胞的糖脂代谢,为2型糖尿病模型猪的构建奠定基础。
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公开(公告)号:CN118360331A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410079320.4
申请日:2024-01-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/0276 , C12N15/89 , C12N15/113 , C12N15/54 , C12N15/55
Abstract: 本发明属于动物模型构建领域,具体涉及PRKDC基因敲除的动物模型的构建方法和应用,在本课题之前的研究中发现采用传统的靶向第一、二等靠前的外显子虽然可以获得PRKDC基因敲除动物,但是无法获得免疫缺陷表型。本发明针对PRKDC基因激酶功能区第#78和#80三个外显子设计两条sgRNAs,大片段的敲除来获得具有免疫缺陷表型的PRKDC基因敲除兔。将sgRNA序列与U6启动子相连,经体外转录等步骤制备显微注射使用的Cas9mRNA和gRNA,将两张RNA混和后,注射到原核期兔受精卵经胚胎移植获得仔兔,通过PCR扩增及Sanger测序鉴定PRKDC基因敲除的家兔模型,本发明构建PRKDC基因敲除的动物模型具有免疫缺陷表型,在模拟人类免疫缺陷疾病以及在肿瘤、人源化研究上具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN108245277A
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201810054633.9
申请日:2018-01-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61D7/04
CPC classification number: A61D7/04
Abstract: 一种大体型猪用气管插管,涉及一种气管插管,属于兽类医疗器械领域。解决了一直使用人用气管插管代替猪用气管插管,没有用于大型猪用气管插管的现状,研发出一种专门用于大型猪的气管插管。该插管包括释药环、气囊、注药细软管、充气细软管、插管管身和插管尾部管头,插管头部的内部固定有释药环,插管头部的外壁套有气囊,插管管身的末端与插管尾部管头固定连接,充气细软管在插管管身的内部一端穿出管壁与气囊相连通,另一端从插管管身的尾端管壁穿出,注药细软管一端与释药环相连通,另一端从插管管身的尾端管壁穿出。本发明适用于手术过程中插入猪气管对猪进行麻醉。本发明具有结构简单、操作方便,成本低,便于规模化生产与市场推广的优点。
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公开(公告)号:CN103468706A
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201310409327.X
申请日:2013-09-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪印迹基因Slc22a18及其应用,属于分子遗传学领域。通过PCR、序列比较发现该猪Slc22a18基因第4外显子79位碱基存在SNP位点,进一步应用该位点鉴定Slc22a18基因的印迹状态。本发明所公开的猪印迹基因Slc22a18,丰富了猪印迹基因的数量,为探索印迹基因在不同物种间的保守性、调控机制以及在猪生长发育过程中的功能作用提供信息,可用于以猪作为动物模型研究人类Slc22a18基因异常疾病。
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公开(公告)号:CN118480135A
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410697366.2
申请日:2024-05-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统及其应用,属于活细胞检测技术领域。本发明为解决现有技术中MCP‑MS2系统存在目标RNA表达与转运不稳定,成像信噪比较低,荧光背景较高的技术问题,提供一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统,所述RNA实时示踪系统包括MS2环状结构和MS2外壳蛋白。本发明提供的RNA实时示踪系统实现了活细胞内源性和外源性RNA成像和双色荧光标记的目的,提升了靶标位点的荧光信号,显著提高了信噪比,降低了荧光背景。本发明提供的RNA实时示踪系统可应用于活细胞RNA实时示踪成像,具体指利用RNA实时示踪系统对RNA的空间定位、蛋白翻译和RNA位移过程进行监控。
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公开(公告)号:CN103468705A
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201310409326.5
申请日:2013-09-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪印迹基因Slc22a3,属于分子遗传学领域。本发明通过克隆获得Slc22a3基因,并通过比较36头亲本猪耳组织测序结果发现Slc22a3的第10外显子第20个碱基存在SNP突变,进一步应用该位点鉴定Slc22a3基因的印迹状态。本发明所公开的猪印迹基因Slc22a3,丰富了猪印迹基因的数量,为探索印迹基因在不同物种间的保守性、调控机制以及在猪生长发育过程中的功能作用提供信息,可用于以猪作为动物模型研究人类Slc22a3基因异常疾病。
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公开(公告)号:CN117925804A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410048332.0
申请日:2024-01-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/6879 , C12Q1/6888 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 一种基于两步巢式PCR技术鉴定猪胚胎单细胞性别的方法,属于生物工程技术领域。本发明为解决现有技术中的胚胎细胞性别鉴定技术存在操作繁琐、操作时间长、技术要求较高,准确性、稳定性和灵敏性较低的技术问题,提供了一种基于两步巢式PCR技术鉴定猪胚胎单细胞性别的方法,通过对巢式PCR鉴定体系进行优化,将常规PCR酶替换为KOD酶,发现其扩增效果较好;提供的鉴定方法可以实现10个以上细胞样本的性别鉴定,确定AMEL引物对扩增效率较高,灵敏度更强;本发明提供的巢式PCR技术极大地提高了PCR的灵敏性,获得的电泳条带清晰无非特异性扩增,具有操作简单、鉴定周期短的优点,适合产业应用。
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公开(公告)号:CN119912587A
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202510268629.2
申请日:2025-03-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/113 , C12N15/10
Abstract: 一种识别PAM序列的MCM5‑Cas9变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明为解决现有技术中Cas9介导的HDR途径中长片段敲入能力较差,准确性和可靠性较低的技术问题,利用人源MCM5序列(SEQ ID No.1),以及Linker序列(SEQ ID No.3‑5)和spCas9序列(SEQ ID No.2)构建一种识别PAM序列的MCM5‑Cas9变体;以及提供含有MCM5‑Cas9变体的HDR介导基因编辑系统,该系统具有较高的长片段敲入效率、准确性和可靠性;可应用于对敲入片段需求较大的场景,为解决长片段基因整合效率低的难题提供了全新的解决方案,在基因编辑领域具有显著的创新性和实用性。
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公开(公告)号:CN118620829A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410817563.3
申请日:2024-06-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种猪胚胎体外培养基及其提高胚胎发育潜能的方法,属于动物生物技术领域。本发明解决了目前体外培养猪胚胎发育到囊胚的效率低、囊胚细胞数少,且只能培养至中期囊胚阶段的问题。所述猪胚胎体外培养基命名为N2B27+RAG培养基,所述猪胚胎体外培养基的成分包括DMEM/F‑12、Neurobasal培养基、N‑2添加剂、B‑27添加剂、Activin A、ROCK信号通路抑制剂、L‑谷氨酰胺和抗生素。所述猪胚胎体外培养基能够有效促进猪囊胚高质量发育,显著延长猪体外胚胎培养时间,适用于猪胚胎体外培养技术领域。
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公开(公告)号:CN107099533A
公开(公告)日:2017-08-29
申请号:CN201710483275.9
申请日:2017-06-23
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90
CPC classification number: C12N15/113 , C07K14/4743 , C12N9/22 , C12N15/85 , C12N15/907 , C12N2310/10 , C12N2810/10
Abstract: 一种特异靶向猪IGFBP3基因的sgRNA导向序列及应用,涉及一种sgRNA导向序列及应用。该sgRNA导向序列为CGTCTCGCGCTTGGACTCAG。本发明提供的sgRNA导向序列可通过CRISPR/Cas9系统敲除或编辑IGFBP3基因,进而消除IGFBP3的表达,为制备IGFBP3转基因猪奠定基础。本发明应用于基因工程领域。
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