公开(公告)号：CN105941148B

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201610316552.2

申请日：2016-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  王梦茹 ,  周元飞 ,  刘国锋 ,  陶懿伟 ,  赵子刚 ,  李水仙

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了种矮牵牛叶肉原生质体分离及培养方法,所述原生质体分离方法包括以下步骤:称量矮牵牛幼嫩叶片进行处理后用酶解液酶解;向酶解后的溶液中加入CPW洗液,经过滤、离心,吸去上清液;再次加入CPW洗液洗涤,离心,收集沉淀,即得纯化后的原生质体。所述原生质体培养方法包括:将制备的原生质体加入原生质体培养液中,24℃黑暗环境固液培养法培养30d后,将培养形成的微型愈伤组织转移至增殖培养基;培养21d后,转移至分化培养基;培养即可。用本发明的分离及培养方法可获得高活性、高产量的原生质体,对其培养可诱导出愈伤组织,最终分化出芽,为矮牵牛进步体细胞融合等研究提供实验材料,可为矮牵牛种质资源创新奠定基础。

公开(公告)号：CN105941148A

公开(公告)日：2016-09-21

申请号：CN201610316552.2

申请日：2016-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  王梦茹 ,  周元飞 ,  刘国锋 ,  陶懿伟 ,  赵子刚 ,  李水仙

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/005

Abstract: 本发明公开了一种矮牵牛叶肉原生质体分离及培养方法，所述原生质体分离方法包括以下步骤：称量矮牵牛幼嫩叶片进行处理后用酶解液酶解；向酶解后的溶液中加入CPW洗液，经过滤、离心，吸去上清液；再次加入CPW洗液洗涤，离心，收集沉淀，即得纯化后的原生质体。所述原生质体培养方法包括：将制备的原生质体加入原生质体培养液中，24℃黑暗环境固液培养法培养30d后，将培养形成的微型愈伤组织转移至增殖培养基；培养21d后，转移至分化培养基；培养即可。用本发明的分离及培养方法可获得高活性、高产量的原生质体，对其培养可诱导出愈伤组织，最终分化出芽，为矮牵牛进一步体细胞融合等研究提供实验材料，可为矮牵牛种质资源创新奠定基础。

公开(公告)号：CN105062949A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510363007.4

申请日：2015-06-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  刘国锋 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  赵子刚 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  秦泽冠 ,  周嘉桢

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种小花矮牵牛原生质体的制备方法；该方法包括以下步骤：在黑暗条件下，将幼嫩叶片置于3～5℃清水中预处理20～25h；用酶解液酶解预处理后的叶片；加入和酶解液等体积的CPW洗液，摇匀，300目细胞筛过滤，转速1100r/min离心2min，吸去上清液；向沉淀中加入CPW洗液洗涤原生质体，转速1100r/min离心2min，收集沉淀加入悬浮液悬浮，即得到产量为(5.0±0.3)×106个/g，活性达到85％的原生质体，9h后80％的原生质体可维持活性。用本发明的分离方法获得了高活性、高产量及状态良好的原生质体，可满足原生质体的培养及植株再生的条件，为植物原生质体融合培育新品种提供实验材料。

公开(公告)号：CN105062949B

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201510363007.4

申请日：2015-06-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  刘国锋 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  赵子刚 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  秦泽冠 ,  周嘉桢

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种小花矮牵牛原生质体的制备方法；该方法包括以下步骤：在黑暗条件下，将幼嫩叶片置于3～5℃清水中预处理20～25h；用酶解液酶解预处理后的叶片；加入和酶解液等体积的CPW洗液，摇匀，300目细胞筛过滤，转速1100r/min离心2min，吸去上清液；向沉淀中加入CPW洗液洗涤原生质体，转速1100r/min离心2min，收集沉淀加入悬浮液悬浮，即得到产量为(5.0±0.3)×106个/g，活性达到85％的原生质体，9h后80％的原生质体可维持活性。用本发明的分离方法获得了高活性、高产量及状态良好的原生质体，可满足原生质体的培养及植株再生的条件，为植物原生质体融合培育新品种提供实验材料。

公开(公告)号：CN104920220A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201510347453.6

申请日：2015-06-19

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  赵子刚 ,  丁国平 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  舒雅娟 ,  穆廷云 ,  王鹏 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  迪力达尔.依明 ,  徐佳琳

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法；以月季半木质化茎段为外植体，接种到含有MS培养基、6-BA、NAA、蔗糖和琼脂的诱导培养基中培养，继代培养两到三次，然后切取新芽转入含有MS培养基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和琼脂的培养基中进行连续增殖培养；将再生苗浸泡生根液后扦插于复合基质上，实现瓶外生根。本发明在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以6-BA为植物生长调节剂，它具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用，增殖系数高，植株强壮，可不经壮苗直接进用瓶外生根程序；同时采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。