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公开(公告)号：CN118221789A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410318607.8
申请日：2024-03-20
Applicant: 重庆市畜牧科学院
IPC: C07K14/195 , C07K1/22 , C07K1/14 , C12N1/20 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用肝素琼脂糖珠从化脓隐秘杆菌中提取PLO的方法。该方法包括：1)化脓隐秘杆菌预处理：采用培养基复苏化脓隐秘杆菌，挑取单菌落接种于培养基中，振摇培养，得到化脓隐秘杆菌培养物；所述化脓隐秘杆菌培养物经离心、洗涤、悬浮，得到预处理的化脓隐秘杆菌；2)采用细菌膜蛋白提取试剂盒对预处理后的化脓隐秘杆菌进行分离提取，得到化脓隐秘杆菌蛋白质；3)将步骤2)制得的化脓隐秘杆菌蛋白质与肝素琼脂糖珠混合孵育，洗涤和洗脱后得到PLO。该方法成功实现了化脓隐秘杆菌中高纯度PLO的提取，利用肝素琼脂糖珠使PLO得到有效富集，PLO纯度高达98％。
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公开(公告)号：CN112611864B
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202011395742.0
申请日：2020-12-03
Applicant: 重庆市畜牧科学院
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G16B5/00 , G16B50/30
Abstract: 本发明属于病菌筛分领域，具体涉及一种筛分感染化脓隐秘杆菌或感染伪结核棒状杆菌模型的系统及方法。所述系统包括酶标板、加热器、试剂、数据库、酶标仪、数据对比输出模块；所述酶标板包括聚苯乙烯/聚氯乙烯材料标板，包括96孔或48孔；试剂包括抗原包被液、酶标抗体、显色液、病菌感染模型或免疫模型血清；数据库为健康或感染或免疫的动物模型产生不同的抗体量的吸光度，可导入和可删除；所述酶标仪设置波长为450nm。本发明提供的筛分系统的数据库完善，筛分的结果精确，可以快速筛分出感染病菌模型的病菌类型，简单方便。
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公开(公告)号：CN112795670A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110134048.1
申请日：2021-01-27
Applicant: 重庆市畜牧科学院
Abstract: 本发明属于生物病原体检测技术领域，具体涉及一种检测蜂房球菌的特异性PCR扩增引物对、检测方法及应用。该检测方法先提取蜜蜂幼虫DNA，然后使用引物对WxlF2：5′‑ACTGATCCAACAGATCCAAC‑3′，WxlR2:5′‑TCCCTTAAAGTCAGACAAGC‑3′；或WxlF3：5′‑AACAGATCCAACTGGTCAAA‑3′，WxlR3：5′‑CTTAAAGTCAGACAAGCCGA‑3′进行PCR扩增，最后进行电泳观察扩增情况从而判断是否携带蜂房球菌。该检测方法不用分离蜂房球菌单菌落，简单易行，而且PCR扩增时间可控制在1h以内，可满足欧洲幼虫腐臭病的快速检测需求。
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公开(公告)号：CN112611864A
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN202011395742.0
申请日：2020-12-03
Applicant: 重庆市畜牧科学院
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G16B5/00 , G16B50/30
Abstract: 本发明属于病菌筛分领域，具体涉及一种筛分感染化脓隐秘杆菌或感染伪结核棒状杆菌模型的系统及方法。所述系统包括酶标板、加热器、试剂、数据库、酶标仪、数据对比输出模块；所述酶标板包括聚苯乙烯/聚氯乙烯材料标板，包括96孔或48孔；试剂包括抗原包被液、酶标抗体、显色液、病菌感染模型或免疫模型血清；数据库为健康或感染或免疫的动物模型产生不同的抗体量的吸光度，可导入和可删除；所述酶标仪设置波长为450nm。本发明提供的筛分系统的数据库完善，筛分的结果精确，可以快速筛分出感染病菌模型的病菌类型，简单方便。
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公开(公告)号：CN110642927A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201910980728.8
申请日：2019-10-16
Applicant: 重庆市畜牧科学院
Abstract: 本发明属于兽用生物制品领域，公布了化脓隐秘杆菌的一种抗原蛋白及其制备、疫苗应用、抗体检测方法。本发明将高度保守的化脓隐秘杆菌铁ABC转运体底物结合蛋白SBP的基因，克隆至pGEX-4T-1质粒，构建BL21（DE3）重组菌株，使用IPTG诱导表达重组蛋白SBP(GST-SBP)，实现了目的蛋白的可溶性表达，采用Gluthathione-Sepharose 4B层析法亲和纯化重组蛋白。本发明提供的重组SBP(GST-SBP)蛋白具有良好的反应原性和免疫原性，能够与化脓隐秘杆菌免疫或感染的动物（小鼠、山羊）的血清反应，能够刺激动物（小鼠、羊）产生高水平特异抗体，小鼠免疫保护率为90%。本发明为制备预防化脓隐秘杆菌感染的药物提供了新的抗原蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119799933A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202510182912.3
申请日：2025-02-19
Applicant: 重庆市畜牧科学院
Abstract: 本发明涉及致病菌检测技术领域，具体涉及一种用于检测溶血性曼氏杆菌的通用引物及其检测系统。通用引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示的正向引物，以及核苷酸序列如SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示的反向引物。本技术方案可以解决现有技术缺少特异性强、敏感性高、通用性更好的溶血性曼氏杆菌特异性PCR方法的技术问题，成功克服了传统Rpt2基因通用引物存在的局限性，开发出了一套性能优越的新引物组合。这项成果不仅提升了溶血性曼氏杆菌检测的技术水平，也为相关领域的研究和应用带来了新的可能性。
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公开(公告)号：CN118835003A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202411237702.1
申请日：2024-09-03
Applicant: 重庆市畜牧科学院 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物病原检测技术领域，具体涉及一种用于现场检测ASFV的组合物、RAA试剂盒及方法。本发明首次基于RAA测流层析免疫试纸条技术，提供了一种不需提取基因组，不需要特殊的设备和专业的检测人员就可以直接从环境样本、体液样本或组织样本中检测ASFV病毒的引物探针组合、RAA试剂盒和方法。该试剂盒由裂解液、冻干的反应体系、带有Biotin抗体和FAM抗体的试纸条组成，其中，冻干的反应体系包含适用于现场检测非洲猪瘟病毒的引物和探针。该方法具有操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、准确度高等特点，适用于在养殖场、屠宰场、菜市场和生猪流通的各个环节中非洲猪瘟病毒的现场检测。
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公开(公告)号：CN117037911A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310940224.X
申请日：2023-07-28
Applicant: 重庆市畜牧科学院
Abstract: 本发明公开了一种化脓隐秘杆菌分子分型方法、装置及介质，该方法包括：获取化脓隐秘杆菌的包含plo全基因的PCR产物、plo全基因序列和/或PLO蛋白质全序列；对所述PCR产物进行序列测定；基于化脓隐秘杆菌plo全基因序列，将测定的序列进行拼接以获得plo全基因序列；或采用核苷酸序列翻译软件翻译所拼接的plo全基因以获得PLO蛋白质全序列。根据获取的plo全基因序列和/或PLO蛋白质全序列构建分子进化树。本发明采用构建分子进化树的方式对化脓隐秘杆菌进行分子分型，所展示的分型能反映菌株‑宿主种属关联，可用于菌株宿主溯源。
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公开(公告)号：CN110967482B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201811165892.5
申请日：2018-09-30
Applicant: 重庆市畜牧科学院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种检测山羊化脓隐秘杆菌间接ELISA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含包被有山羊化脓隐秘杆菌重组溶血素rPLO的酶标板；所述rPLO的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明利用山羊化脓隐秘杆菌溶血素重组蛋白rPLO建立一种可准确检测山羊感染化脓隐秘杆菌的间接ELISA试剂盒。本试剂盒特异性强、灵敏度高、重复性好。
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公开(公告)号：CN115785233A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202210878977.8
申请日：2022-07-25
Applicant: 重庆市畜牧科学院
IPC: C07K14/24 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/543 , G01N33/569 , A61K39/02 , A61K39/39 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于分子生物领域，具体涉及一种奇异变形杆菌的抗原组合物及其应用。本发明通过对被抗血清识别的奇异变形杆菌分离株膜蛋白进行质谱分析和免疫保护评价，鉴定出了具有良好免疫保护性的外膜蛋白(Outer membrane protein，Omp)F、丝氨酸水解酶(Serinehydrolase，SH)，这对于研发奇异变形杆菌多亚单位疫苗具有积极意义。
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