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公开(公告)号：CN116376954A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310216263.5
申请日：2023-03-08
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于肠道生物毒素检测的人工细胞传感器构建方法，该方法包括如下步骤：1)枯草芽孢杆菌底盘构建；2)生物探针的合成与转化模块的构建；3)人工细胞传感器构建；4)细胞传感器的性能验证及优化。本发明通过利用合成生物学技术拟构建基于肠道环境中生物毒素如具核梭杆菌FadA粘附素、产肠毒素脆弱类杆菌(ETBF)毒素BFT、白介素响应的枯草芽孢杆菌人工细胞传感器，并最终实现对早期结直肠癌的灵敏、快速检测及预警。有别于其他类型的生物传感器，本细胞传感器的主要特点是以构建的枯草芽孢杆菌细胞作为感知肠道生物毒素的敏感材料。利用活体细胞高灵敏地感知传感器细胞外环境的变化，并且通过各类细胞生理参数响应直接反映出来。
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公开(公告)号：CN113308518B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202110615426.8
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6827
Abstract: 本发明属于核酸分析方法技术领域，公开了一种DNA甲基化的超敏检测方法及其应用，该检测方法包括依次进行的滚环扩增、内切酶切割二次滚环扩增及CRISPR‑Cas12a检测三个步骤，能实现DNA甲基化信号三重放大及检测，解决现有DNA甲基化检测技术中存在的周期长、灵敏度低、成本高等问题。本发明适用于制备试剂盒检测癌症等疾病基因甲基化水平，对提升滚环扩增的性能，使其在生物传感、诊断、药物筛选和纳米技术等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN113308518A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110615426.8
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6827
Abstract: 本发明属于核酸分析方法技术领域，公开了一种DNA甲基化的超敏检测方法及其应用，该检测方法包括依次进行的滚环扩增、内切酶切割二次滚环扩增及CRISPR‑Cas12a检测三个步骤，能实现DNA甲基化信号三重放大及检测，解决现有DNA甲基化检测技术中存在的周期长、灵敏度低、成本高等问题。本发明适用于制备试剂盒检测癌症等疾病基因甲基化水平，对提升滚环扩增的性能，使其在生物传感、诊断、药物筛选和纳米技术等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN113308517B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202110614183.6
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种多重耐药微生物的检测方法，该检测方法先用核酸适配体磁珠捕获多重耐药微生物，并释放出与适配体互补的阻断序列，将蛋白质信号转化为核酸信号，再通过指数扩增反应扩增阻断序列，对扩增后的阻断序列进行测定。本发明在指数扩增反应体系中加入分子增强剂来抑制非特异性扩增反应，在测定过程中加入纳米级过渡金属二卤族化合物作为结果读取载体，进一步降低背景信号的强度。本发明操作简便、高效,可实现无背景、快速、超敏检测的目的，能解决传统检测技术检测周期长、灵敏度低、检测结果存在背景信号、受人为主观因素影响导致结果判读不准确、等温扩增反应存在严重的非特异性扩增等关键技术问题。本发明适用于检测微生物的耐药性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113358617A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110614317.4
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于医疗检测技术领域，公开了一种胞外囊泡富集检测方法，该方法经DNA四面体合成、磁珠结合及提取外泌体后进行外泌体富集检测，该方法利用外泌体表面特异性蛋白，基于DNA折纸的适配体和免疫亲和磁珠的空间识别双重识别捕获的方法，进一步结合DNA荧光探针，从而实现外泌体的快速分离捕获，可用于定量检测外泌体。本发明适用于用作试剂盒实现外泌体富集分离与检测，对使其在疾病诊断、病理研究及新药开发等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN119023952A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411212031.3
申请日：2024-08-30
Applicant: 重庆大学
IPC: G01N33/544 , G01N21/64 , G01N13/00
Abstract: 本发明涉及医学检测领域，具体涉及一种提高丙烯酸酯基底表面生物分子偶联效率的方法。对丙烯酸酯基底进行等离子体处理；然后依次使用桥接缓冲液、活化缓冲液浸泡丙烯酸酯基底，获得的处理后的丙烯酸酯基底用于偶联抗体；所述桥接缓冲液中的活性物质为含有丁二酸酐的硅氧烷；所述活化缓冲液中的活性物质包括EDC、NHS、DCC、DMAP和HATU中的至少一种。本技术方案可以高效地将偶联抗体至丙烯酸酯基底，进一步解决现有技术缺少经济、环保、简便的将生物分子等生物分子偶联到丙烯酸酯基底表面的方法的技术问题，以满足利用光盘等含有丙烯酸酯基底的材料作为生物反应基底进行定性或定量分析的应用需求，具有极大的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN113358617B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202110614317.4
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于医疗检测技术领域，公开了一种胞外囊泡富集检测方法，该方法经DNA四面体合成、磁珠结合及提取外泌体后进行外泌体富集检测，该方法利用外泌体表面特异性蛋白，基于DNA折纸的适配体和免疫亲和磁珠的空间识别双重识别捕获的方法，进一步结合DNA荧光探针，从而实现外泌体的快速分离捕获，可用于定量检测外泌体。本发明适用于用作试剂盒实现外泌体富集分离与检测，对使其在疾病诊断、病理研究及新药开发等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN113308517A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110614183.6
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种多重耐药微生物的检测方法，该检测方法先用核酸适配体磁珠捕获多重耐药微生物，并释放出与适配体互补的阻断序列，将蛋白质信号转化为核酸信号，再通过指数扩增反应扩增阻断序列，对扩增后的阻断序列进行测定。本发明在指数扩增反应体系中加入分子增强剂来抑制非特异性扩增反应，在测定过程中加入纳米级过渡金属二卤族化合物作为结果读取载体，进一步降低背景信号的强度。本发明操作简便、高效,可实现无背景、快速、超敏检测的目的，能解决传统检测技术检测周期长、灵敏度低、检测结果存在背景信号、受人为主观因素影响导致结果判读不准确、等温扩增反应存在严重的非特异性扩增等关键技术问题。本发明适用于检测微生物的耐药性。
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公开(公告)号：CN111575403A
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN202010307516.6
申请日：2020-04-17
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种检测RNA病毒核酸的高通量数字PCR试剂盒及检测方法，属于病毒核酸检测技术领域。所述高通量数字PCR试剂盒为含有用于检测RNA病毒核酸多位点的引物和探针的高通量数字PCR检测试剂。本发明的检测RNA病毒核酸高通量数字PCR试剂盒中含有多位点的引物和探针组合，显著提高了RNA病毒检测的准确性，防止病毒局部突变导致的漏检。本发明的RNA病毒核酸的检测方法，采用一步法扩增技术，降低了污染的可能性。且通过将多个样本提取的RNA样本混合后作为PCR反应模板，可在单孔内同时完成多个样本的检测，极大地提高了检测通量，降低了大规模人群筛查的检测成本，在大批量样本筛查中具有极大的推广应用价值。
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