条件性敲除lncRNA DLX6-os1转基因小鼠的培育方法

    公开(公告)号:CN110117616A

    公开(公告)日:2019-08-13

    申请号:CN201910444912.0

    申请日:2019-05-27

    Abstract: 本发明涉及条件性敲除lncRNA DLX6-os1转基因小鼠的培育方法,有效解决作为动物模型,适用于不同组织器官中研究该lncRNA的作用问题,构建Dlx6-os1条件敲除载体,Dlx6-os1基因,转录物:Dlx6-os1-201 ENSMUST00000159568.5,位于小鼠6号染色体上的三个外显子,以三个外显子作为条件敲除区域;将C57BL/6小鼠基因文库中RP24-276P7 and RP24-260F14的BAC克隆作为模板,进行PCR;在目的载体中,Neo位点旁插入自删除锚定位点,基因敲除区域旁插入loxP位点,DTA阴性选择;与Cre酶介导的基因重组,得基因敲除质粒载体;将基因敲除质粒载体导入ES细胞中,与多种不同器官带有Cre酶的转基因小鼠杂交,得到在不同器官中降低DLX6-os1表达水平的阳性小鼠。本发明适用于在不同组织器官中研究该lncRNA的作用,开拓了对糖尿病诊断治疗的新途径。

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