公开(公告)号：CN113308470A

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN202110572641.4

申请日：2021-05-25

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 刘希 ,  廉洁 ,  汪园园 ,  邓元 ,  李晓锋 ,  张冠军

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  A61K31/7105 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用，属于生物医药技术领域。通过构建重组慢病毒质粒ARID1A sgRNA‑lentiCRISPR v2、将CRISPR/Cas9慢病毒系统通过293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒、将慢病毒颗粒感染目的细胞株、有限稀释法传代筛选，可获得稳定的ARID1A基因敲除的细胞株。Western blot蛋白表达检测显示，基因敲除的细胞株ARID1A蛋白表达完全缺失。另外，ARID1A基因敲除的细胞株增殖能力明显增强。结果表明，利用CRISPR/Cas9慢病毒系统成功敲除ARID1A基因后，可促使胃上皮细胞的恶性转化。