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公开(公告)号：CN107064394A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710100595.1
申请日：2017-02-23
Applicant: 西安交通大学
IPC: G01N30/60 , G01N30/02 , B01D15/10 , B01J20/283
CPC classification number: G01N30/60 , B01D15/10 , B01J20/283 , G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种双靶标细胞膜色谱柱及其制备方法和应用，属于色谱科学、细胞生物学及受体药理学领域。该方法将两种不同受体类型的细胞分别制备成细胞膜色谱固定相，再将两种细胞膜色谱固定相混合均匀，得到两种受体类型的混合固定相，最后将混合固定相湿法装柱，构成双靶标细胞膜色谱柱。本发明制备的双靶标细胞膜色谱柱在保持原有细胞膜色谱柱活性识别和色谱分离特性的基础上，增加了活性识别的位点，能够识别复杂体系中“单组分单靶标”、“单组分双靶标”及“多组分双靶标”的目标组分，为多元药物的开发提供新的技术手段，并显著提高复杂体系中目标组分的筛选效率。
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公开(公告)号：CN119771379A
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202411973273.4
申请日：2024-12-30
Applicant: 西安交通大学
Abstract: 本发明公开了一种5‑HTR2A细胞膜色谱固相微萃取材料及其制备方法和在非典型抗精神病药物TDM中的应用，属于色谱科学技术领域。通过将苄基鸟嘌呤键合到硅胶上，然后利用硫醚共价键特异性识别带有SNAP‑Tag的高表达5‑HTR2A的细胞膜碎片，并与硅胶发生稳定共价结合，从而使细胞膜固定在硅胶表面，得到SNAP‑Tag桥连的高表达5‑HTR2A细胞膜色谱固相微萃取材料。该细胞膜色谱固相萃取材料是将载体与目标膜受体通过牢固的化学键进行结合，在稳定性方面相比于传统物理吸附细胞膜色谱固定相材料有显著地提升。因此可以利用细胞膜色谱固定相材料作为固相萃取吸附剂，从而提高固相萃取技术的特异性，实现从复杂样品中快速筛选和预浓缩目标成分。
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公开(公告)号：CN110201419B
公开(公告)日：2021-01-19
申请号：CN201910385950.3
申请日：2019-05-09
Applicant: 西安交通大学
IPC: B01D15/10 , B01D15/22 , B01J20/281 , B01J20/30 , C12N11/084 , G01N30/02 , G01N30/60 , G01N30/88
Abstract: 本发明公开了一种以聚乙烯醇微球为载体的细胞膜色谱柱及其制备方法，属于细胞膜色谱柱技术领域。该细胞膜色谱柱是以细胞膜包裹聚乙烯醇微球制成细胞膜固定相，再将细胞膜固定相采用湿法装柱制得。以细胞膜包裹聚乙烯醇微球制成细胞膜固定相，由于聚乙烯醇微球表面具有丰富的羟基和醛基，不仅可以与细胞膜通过疏水作用结合，醛基基团还可以通过与膜上丰富的磷脂氨基基团反应，从而达到让聚乙烯醇微球和细胞膜共价连接的目的，使细胞膜在固定相上的固定更加稳定，从而延长细胞膜色谱柱的寿命。同时在一定程度上改善了硅胶为载体时细胞膜易脱落，pH适用范围窄的问题。
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公开(公告)号：CN119771380A
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202411973274.9
申请日：2024-12-30
Applicant: 西安交通大学
IPC: B01J20/286 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N5/071 , C12N11/14 , G01N30/60 , G01N30/02 , B01D15/08 , B01J20/30
Abstract: 本发明公开了一种基于SNAP‑tag技术的胞内蛋白细胞膜固定相、色谱柱及其制备方法和在血药浓度监测中的应用，属于药物分析领域。首先通过基因工程及GPI基因修饰构建胞内蛋白膜表达并N端融合高表达SNAP‑tag的HEK293T细胞，然后利用SNAP‑tag与苯甲基鸟嘌呤的高特异性识别和稳定共价结合使细胞膜固定在硅胶表面，得到细胞膜色谱柱固定相，最后将混合固定相湿法装柱，得到基于SNAP‑tag的胞内蛋白细胞膜色谱柱。该方法制备的基于SNAP‑tag的胞内蛋白细胞膜色谱柱在不影响目标蛋白活性的同时，能够解决非膜表达蛋白的细胞膜色谱柱的问题。此外，该细胞膜色谱柱还可应用于药物血药浓度的检测，为细胞膜色谱柱的进一步广泛应用提供技术支持。
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公开(公告)号：CN106754731B
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201710100941.6
申请日：2017-02-23
Applicant: 西安交通大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C07K17/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种MrgprX2高表达的重组细胞及MrgprX2高表达膜受体固定相及制备方法和应用，该重组细胞以HEK293细胞为宿主细胞，转染包含MrgprX2全长基因的表达载体，其细胞膜上能够稳定表达MrgprX2受体大分子，而且具有完整的受体生物活性。该MrgprX2高表达膜受体固定相由活化硅胶吸附MrgprX2高表达的重组细胞的细胞膜制成，可应用于特异性筛选识别由MrgprX2引发的类过敏组分。本发明通过实际应用发现盐酸青藤碱可以特异性与MrgprX2相结合，同时细胞水平的过敏实验表明盐酸青藤碱均可以刺激肥大细胞释放组胺和β氨基己糖苷酶，证实MrgprX2高表达膜受体固定相确实可以应用于特异性识别类过敏组分。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110201419A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910385950.3
申请日：2019-05-09
Applicant: 西安交通大学
Abstract: 本发明公开了一种以聚乙烯醇微球为载体的细胞膜色谱柱及其制备方法，属于细胞膜色谱柱技术领域。该细胞膜色谱柱是以细胞膜包裹聚乙烯醇微球制成细胞膜固定相，再将细胞膜固定相采用湿法装柱制得。以细胞膜包裹聚乙烯醇微球制成细胞膜固定相，由于聚乙烯醇微球表面具有丰富的羟基和醛基，不仅可以与细胞膜通过疏水作用结合，醛基基团还可以通过与膜上丰富的磷脂氨基基团反应，从而达到让聚乙烯醇微球和细胞膜共价连接的目的，使细胞膜在固定相上的固定更加稳定，从而延长细胞膜色谱柱的寿命。同时在一定程度上改善了硅胶为载体时细胞膜易脱落，pH适用范围窄的问题。
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公开(公告)号：CN110201418B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201910385025.0
申请日：2019-05-09
Applicant: 西安交通大学
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明公开了一种基于固定化SNAP‑tag融合蛋白的细胞膜色谱柱及其制备方法，属于细胞膜色谱柱制备技术领域。该方法首先将苯甲基鸟嘌呤键合到硅胶上，然后利用SNAP‑tag与其底物苯甲基鸟嘌呤的高特异性识别和稳定共价结合使细胞膜固定苯甲基鸟嘌呤修饰的硅胶固定相表面，即得细胞膜色谱固定相，最后将混合固定相湿法装柱，构成基于固定化SNAP‑tag融合蛋白的细胞膜色谱柱。本发明制备的基于固定化SNAP‑tag融合蛋白的细胞膜色谱柱延长细胞膜色谱柱的柱寿命，提高其稳定性。解决了现有的细胞膜色谱柱存在特异性较差的问题，为细胞膜色谱柱的商品化奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110201418A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910385025.0
申请日：2019-05-09
Applicant: 西安交通大学
IPC: B01D15/10 , B01D15/22 , B01J20/281 , B01J20/286 , B01J20/30 , C12N11/14 , G01N30/02 , G01N30/60
Abstract: 本发明公开了一种基于固定化SNAP-tag融合蛋白的细胞膜色谱柱及其制备方法，属于细胞膜色谱柱制备技术领域。该方法首先将苯甲基鸟嘌呤键合到硅胶上，然后利用SNAP-tag与其底物苯甲基鸟嘌呤的高特异性识别和稳定共价结合使细胞膜固定苯甲基鸟嘌呤修饰的硅胶固定相表面，即得细胞膜色谱固定相，最后将混合固定相湿法装柱，构成基于固定化SNAP-tag融合蛋白的细胞膜色谱柱。本发明制备的基于固定化SNAP-tag融合蛋白的细胞膜色谱柱延长细胞膜色谱柱的柱寿命，提高其稳定性。解决了现有的细胞膜色谱柱存在特异性较差的问题，为细胞膜色谱柱的商品化奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106754731A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710100941.6
申请日：2017-02-23
Applicant: 西安交通大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C07K17/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种MrgprX2高表达的重组细胞及MrgprX2高表达膜受体固定相及制备方法和应用，该重组细胞以HEK293细胞为宿主细胞，转染包含MrgprX2全长基因的表达载体，其细胞膜上能够稳定表达MrgprX2受体大分子，而且具有完整的受体生物活性。该MrgprX2高表达膜受体固定相由活化硅胶吸附MrgprX2高表达的重组细胞的细胞膜制成，可应用于特异性筛选识别由MrgprX2引发的类过敏组分。本发明通过实际应用发现盐酸青藤碱可以特异性与MrgprX2相结合，同时细胞水平的过敏实验表明盐酸青藤碱均可以刺激肥大细胞释放组胺和β氨基己糖苷酶，证实MrgprX2高表达膜受体固定相确实可以应用于特异性识别类过敏组分。
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公开(公告)号：CN106568879A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610945681.8
申请日：2016-11-02
Applicant: 西安交通大学
IPC: G01N30/60 , B01J20/282
CPC classification number: G01N30/6052 , B01J20/282
Abstract: 本发明公开了一种用于识别复杂样品中微量目标组分的细胞膜色谱柱及其制备方法及目标组分的识别鉴定方法，其中用于识别复杂样品中微量目标组分的细胞膜色谱柱(简称识别柱)中填充有表达特定受体的细胞膜色谱固定相，可以提高复杂样品中“目标组分”筛选的特异性，对提高筛选效率、阐明作用机理具有重要的意义。该识别鉴定方法通过识别柱对复杂样品中“目标组分”进行特异性识别，并通过富集柱对微量“目标组分”进行在线富集，进一步由高效液相色谱质谱进行分离鉴定。该方法具有高效识别、在线富集复杂样品中微量“目标组分”的特性，能够提升分析效率，提高分析灵敏度，实现对复杂样品中“目标组分”的高效率筛选。
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