公开(公告)号：CN119771380A

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202411973274.9

申请日：2024-12-30

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 韩省力 ,  贺浪冲 ,  刘思晗 ,  王楠 ,  吕艳妮

IPC: B01J20/286 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071 ,  C12N11/14 ,  G01N30/60 ,  G01N30/02 ,  B01D15/08 ,  B01J20/30

Abstract: 本发明公开了一种基于SNAP‑tag技术的胞内蛋白细胞膜固定相、色谱柱及其制备方法和在血药浓度监测中的应用，属于药物分析领域。首先通过基因工程及GPI基因修饰构建胞内蛋白膜表达并N端融合高表达SNAP‑tag的HEK293T细胞，然后利用SNAP‑tag与苯甲基鸟嘌呤的高特异性识别和稳定共价结合使细胞膜固定在硅胶表面，得到细胞膜色谱柱固定相，最后将混合固定相湿法装柱，得到基于SNAP‑tag的胞内蛋白细胞膜色谱柱。该方法制备的基于SNAP‑tag的胞内蛋白细胞膜色谱柱在不影响目标蛋白活性的同时，能够解决非膜表达蛋白的细胞膜色谱柱的问题。此外，该细胞膜色谱柱还可应用于药物血药浓度的检测，为细胞膜色谱柱的进一步广泛应用提供技术支持。