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公开(公告)号:CN105181963A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510458766.9
申请日:2015-07-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2333/34
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法,检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体,判断山羊是否感染伪结核。本发明确定了阴阳性临界值,具有很高的特异性和重复性,能够快速有效的检测出山羊血清中的伪结核抗体,可用于山羊伪结核诊断、流行病学调查。
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公开(公告)号:CN104725508A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510174843.8
申请日:2015-04-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/18
Abstract: 本发明涉及特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法。市场上常出现羊乳中掺加牛乳的现象,以次充好,影响羊乳质量。本发明以脱脂牛乳为抗原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合,筛选出具有稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,所获单克隆抗体能够特异性识别牛乳中的非乳清抗原,且与羊乳不存在交叉反应。本发明识别牛乳的最低限度为0.2%,可用于开发检测试纸条,检测试剂盒等,为开发羊乳中掺加牛乳检测试剂盒等检测产品奠定基础。
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公开(公告)号:CN104694484B
公开(公告)日:2018-04-06
申请号:CN201510077329.2
申请日:2015-02-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种羊口疮病毒的快速分离方法,具体涉及利用牛睾丸细胞从患病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒的方法。其利用牛睾丸细胞,从羊口疮发病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒,为羊口疮病毒的分离提供了方便快捷的方法,为生产和科研提供便利。本发明一种羊口疮病毒的快速分离方法的步骤为:1)羊口疮病毒病料的采集与检测;2)病料的处理;3)羊口疮病毒的分离。
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公开(公告)号:CN104745539A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510152702.6
申请日:2015-04-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法。传统的羊口疮病毒都是从结痂和患病羊的口唇皮屑中分离的,分离周期长,需要盲传5代后才会有病变,同时,病料来源范围小,限制的羊口疮病毒的研究工作。本发明使用特有的Virus holder 溶液对唾液、乳汁、内脏等样品进行离心过滤处理后,接种于牛睾丸原代细胞中培养后弃去毒液;加细胞维持液培养后收毒;反复冻融收集细胞培养物,从第3代接种牛睾丸细胞后的72h可观察到细胞病变。本发明使用特有的Virus holder溶液处理样品,能够从病毒含量极低的样品中分离羊口疮病毒,取材范围大,病毒分离周期短,稳定性高,能够很好的保持病毒的完整性和活性。
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公开(公告)号:CN104745539B
公开(公告)日:2018-02-06
申请号:CN201510152702.6
申请日:2015-04-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法。传统的羊口疮病毒都是从结痂和患病羊的口唇皮屑中分离的,分离周期长,需要盲传5代后才会有病变,同时,病料来源范围小,限制的羊口疮病毒的研究工作。本发明使用特有的Virus holder溶液对唾液、乳汁、内脏等样品进行离心过滤处理后,接种于牛睾丸原代细胞中培养后弃去毒液;加细胞维持液培养后收毒;反复冻融收集细胞培养物,从第3代接种牛睾丸细胞后的72h可观察到细胞病变。本发明使用特有的Virus holder溶液处理样品,能够从病毒含量极低的样品中分离羊口疮病毒,取材范围大,病毒分离周期短,稳定性高,能够很好的保持病毒的完整性和活性。
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公开(公告)号:CN105181963B
公开(公告)日:2017-08-01
申请号:CN201510458766.9
申请日:2015-07-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法,检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体,判断山羊是否感染伪结核。本发明确定了阴阳性临界值,具有很高的特异性和重复性,能够快速有效的检测出山羊血清中的伪结核抗体,可用于山羊伪结核诊断、流行病学调查。
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公开(公告)号:CN105044345A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510489772.0
申请日:2015-08-11
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明针利用实验室现有两株杂交瘤细胞D4和G9,分别制备并纯化小鼠腹水,建立双抗夹心ELISA检测方法,并组装成试剂盒。该试剂盒能够特异性检测羊口疮病毒,最低检测限度为0.625ng/ml,且不与羊痘病毒存在交叉反应,为羊口疮疫病防控,流行病学调查等提供有力工具。一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法为:用两株识别羊口疮病毒不同表位的单克隆抗体D4和G9,建立双抗夹心ELISA检测方法,并组装成检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN104694484A
公开(公告)日:2015-06-10
申请号:CN201510077329.2
申请日:2015-02-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种羊口疮病毒的快速分离方法,具体涉及利用牛睾丸细胞从患病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒的方法。其利用牛睾丸细胞,从羊口疮发病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒,为羊口疮病毒的分离提供了方便快捷的方法,为生产和科研提供便利。本发明一种羊口疮病毒的快速分离方法的步骤为:1)羊口疮病毒病料的采集与检测;2)病料的处理;3)羊口疮病毒的分离。
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