公开(公告)号：CN112941107B

公开(公告)日：2024-01-23

申请号：CN202110365085.3

申请日：2021-04-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张智英 ,  邢佳妮 ,  麻丽霞 ,  闫强 ,  李鹏程 ,  徐坤 ,  程心珍 ,  闫娜娜 ,  孙永森 ,  李倩

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用，通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体，以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测，发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力，并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下，实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3％的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。

公开(公告)号：CN112941107A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110365085.3

申请日：2021-04-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张智英 ,  邢佳妮 ,  麻丽霞 ,  闫强 ,  李鹏程 ,  徐坤 ,  程心珍 ,  闫娜娜 ,  孙永森 ,  李倩

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用，通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体，以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测，发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力，并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下，实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3％的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。

公开(公告)号：CN110305888A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910574438.3

申请日：2019-06-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张智英 ,  程心珍 ,  邢佳妮 ,  闫娜娜 ,  马锦荣

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种检测人工核酸酶诱导Indels突变检测系统的构建与应用。采取的具体技术方案为：提供一种ara-mFabI检测系统，包括3个检测载体，每个载体单独负责一种类型插入片段的定量与定性揭示。3个载体的区别在于：mFabI基因开放阅读框的类型不同；分别由mFabI基因扩增引物的上游引物分别引入9、10、11个碱基以改变mFabI基因的ORF。使用本发明提供的检测系统，能实现核酸酶诱导的各类型Indels突变频率的定量揭示；并能达到与扩增子测序相近的Indels突变频率与类型分布。