公开(公告)号：CN102121007A

公开(公告)日：2011-07-13

申请号：CN201010582597.7

申请日：2010-12-03

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王跃进 ,  徐伟荣 ,  余义和 ,  丁家华 ,  周起

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明涉及中国葡萄属野生种华东葡萄芪合成酶病原菌诱导型启动子序列的应用，在人工接种葡萄白粉菌后，应用半定量RT-PCR法分析中国葡萄属野生种华东葡萄株系白河-35-1芪合成酶基因表达模式，克隆芪合成酶基因的cDNA序列与gDNA序列，设计特异引物，进一步分离获得了芪合成酶基因病原菌诱导型启动子序列1772bp，通过瞬时转化分析确定该启动子具有病原菌诱导表达特性，该启动子与所克隆的芪合成酶基因cDNA与gDNA序列融合，在转化植物中受病原菌诱导表达调控，增强了目标植物对病原菌的抗性，从中国葡萄属野生种这一特异资源中分离克隆芪合成酶基因启动子，对于填补国内空白及进一步应用于植物抗病改良，具有重要的意义。

公开(公告)号：CN102121004A

公开(公告)日：2011-07-13

申请号：CN201010582556.8

申请日：2010-12-03

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王跃进 ,  李慧娥 ,  朱自果 ,  周起 ,  谢小青

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种启动子快速克隆法，以克隆获得两个葡萄病原菌诱导型启动子构建启动子::报告基因融合载体，两个启动子启动报告基因在葡萄叶片中的表达受白粉菌诱导，为葡萄抗病基因工程提供病原菌诱导型启动子的克隆方法并成功应用于葡萄抗病育种中。克隆的两个诱导型启动子均能在病原菌侵染时以精准方式调控转入外源基因，使转入基因仅在受病原菌诱导的条件下被启动表达，在葡萄抗病育种中，仅需把重组载体中启动子所启动的报告基因换成任何抗病基因，即可转化葡萄获得病原菌诱导表达外源抗病基因的转化植株，减少抗病基因工程育种中组成型启动子对转基因葡萄造成的负面影响，最大限度发挥转基因优势。