一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110468111B

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN201910724104.X

    申请日:2019-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种展示CyHV‑2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用,ORF25C在杆状病毒表面的展示通过将ORF25C的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现,以重组杆状病毒为载体表达的ORF25C融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明获得的展示CyHV‑2膜蛋白ORF25C的重组杆状病毒无需注射,可以直接通过简单的浸浴方式为异育银鲫提供免疫保护,对CyHV‑2感染的相对保护率优于已报道的疫苗免疫效果,说明本发明构建的重组杆状病毒可以为CyHV‑2感染的防控提供一种免疫效果好而且使用方法简单、易操作的疫苗。

    一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110452926A

    公开(公告)日:2019-11-15

    申请号:CN201910724103.5

    申请日:2019-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用,ORF25在杆状病毒表面的展示通过将ORF25的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现,重组杆状病毒为载体表达的ORF25融合蛋白的氨基酸序列为SEQ IDNO:3。本发明以截短的CyHV-2糖蛋白ORF25为抗原基因,构建重组杆状病毒,成功将ORF25展示在病毒表面。用该重组病毒转导鲫鱼细胞,ORF25在鲫鱼细胞表达并展示在细胞表面。以该重组病毒作为CyHV-2疫苗对异育银鲫进行浸泡免疫,攻毒试验表明该重组杆状病毒免疫可以对CyHV-2感染提供83.3%的相对保护率。

    基于密码子优化的重组鲎C因子及其生产方法

    公开(公告)号:CN118421605A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202310923673.3

    申请日:2023-07-26

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及一种基于密码子优化的重组鲎C因子及其生产方法。所述重组鲎C因子的编码序列为SEQ ID NO:1。所述方法包括:将所述重组鲎C因子的编码序列克隆在杆状病毒表达载体,以获得重组杆状病毒;其中所述杆状病毒表达载体包含靶向宿主胱天蛋白酶1的干扰核糖核酸序列;通过所述重组杆状病毒感染昆虫细胞并进行培养,获取培养液上清;其中所述培养液上清用于内毒素检测。所述方法通过对非信号肽区段的低频密码子进行替换得到重组鲎C因子以提高蛋白表达量,以及通过抗凋亡杆状病毒表达载体进一步提高了重组鲎C因子的表达量,从而得到培养液上清可不经过浓缩和纯化而直接稀释用于内毒素检测。

    一种在Sf和Tn细胞中抗凋亡的杆状病毒表达载体

    公开(公告)号:CN118006601A

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202410000007.7

    申请日:2024-01-01

    Abstract: 本发明公开了一种在草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda,Sf)和粉纹夜蛾(Trichoplusia ni,Tn)细胞中都能抗凋亡的杆状病毒表达载体。根据siRNA引导链与靶RNA识别时能容忍G‑U配对的原理,在Sf‑caspase‑1和Tn‑caspase‑1同源序列中广泛优选能同时在两种细胞系中抑制caspase‑1的shRNA。将所述shRNA编码序列克隆到杆状病毒表达载体上,即得到广谱抗凋亡杆状病毒表达载体。广谱抗凋亡杆状病毒在两种细胞系中都有良好的抗细胞凋亡效果;由于病毒感染后细胞凋亡延迟,外源蛋白表达水平显著提高。外源蛋白产量的提高能够降低工业生产成本。本发明在蛋白制品和疫苗工业领域具有很好的应用前景。

    一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110468111A

    公开(公告)日:2019-11-19

    申请号:CN201910724104.X

    申请日:2019-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用,ORF25C在杆状病毒表面的展示通过将ORF25C的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现,以重组杆状病毒为载体表达的ORF25C融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明获得的展示CyHV-2膜蛋白ORF25C的重组杆状病毒无需注射,可以直接通过简单的浸浴方式为异育银鲫提供免疫保护,对CyHV-2感染的相对保护率优于已报道的疫苗免疫效果,说明本发明构建的重组杆状病毒可以为CyHV-2感染的防控提供一种免疫效果好而且使用方法简单、易操作的疫苗。

    一种VLF-1过表达的杆状病毒表达载体

    公开(公告)号:CN118389600A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410740547.9

    申请日:2024-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种表达因子过表达的杆状病毒表达载体。杆状病毒极晚期表达因子VLF‑1(Very late Factor 1)是病毒极晚期启动子p10和polh高频转录所必需的调控因子。本发明在杆状病毒vlf‑1基因编码区上游插入杆状病毒中等强度启动子,使vlf‑1能够在病毒感染晚期以适当的水平表达。vlf‑1适当过表达显著提高了p10和polh启动子的表达水平。表达产量的提高能降低企业的生产成本。该杆状病毒载体可用于生物制品工业领域。

    一种DNA聚合酶过表达的杆状病毒表达载体及其应用

    公开(公告)号:CN117646033A

    公开(公告)日:2024-03-05

    申请号:CN202311421630.1

    申请日:2023-10-30

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域和基因治疗领域。本发明公开了一种DNA聚合酶过表达杆状病毒表达载体及其应用,比如一种DNA聚合酶过表达重组杆状病毒,以及利用所述载体或病毒生产重组腺相关病毒的方法。所述载体和重组杆状病毒含有异源启动子控制的DNA聚合酶表达框。利用该载体生产重组腺相关病毒时,由于DNA聚合酶在杆状病毒感染后过表达,带有ITRs侧翼的转基因盒复制效率会有很大提高。这样一来,重组腺相关病毒核衣壳的包装效率也相应提高,最终使重组腺相关病毒空壳率显著降低。

    一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110452926B

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN201910724103.5

    申请日:2019-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种展示CyHV‑2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用,ORF25在杆状病毒表面的展示通过将ORF25的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现,重组杆状病毒为载体表达的ORF25融合蛋白的氨基酸序列为SEQ IDNO:3。本发明以截短的CyHV‑2糖蛋白ORF25为抗原基因,构建重组杆状病毒,成功将ORF25展示在病毒表面。用该重组病毒转导鲫鱼细胞,ORF25在鲫鱼细胞表达并展示在细胞表面。以该重组病毒作为CyHV‑2疫苗对异育银鲫进行浸泡免疫,攻毒试验表明该重组杆状病毒免疫可以对CyHV‑2感染提供83.3%的相对保护率。

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