公开(公告)号：CN108359636B

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN201810123408.6

申请日：2018-02-07

Applicant: 苏州大学

Inventor： 胡士军 ,  苗淑梅 ,  雷伟 ,  赵振奥 ,  沈振亚 ,  唐明正

IPC: C12N5/077

Abstract: 一种提高多能干细胞定向分化为心肌细胞的诱导方法：在第0～1天对传代培养至4～5代的多能干细胞进行诱导分化，使用的培养基中含有2～15μM的GSK‑3抑制剂；在第2～3天使用含有0.2～5μM视黄酸的培养基继续诱导分化；在第4～5天使用含有2～10μM的Wnt抑制剂的培养基诱导分化；以后利用培养基对细胞进行诱导分化，在第9～10天能观察到心肌细胞的跳动；其中，在第1～6天，使用第一诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基、B27‑insulin；在第7天以后，使用第二诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基以及B27；或者在整个诱导分化培养过程中，使用CDM3诱导分化培养基或无血清的诱导分化培养基，其中CDM3诱导分化培养基包括RPMI‑1640基础培养基、血清白蛋白、抗坏血酸和双抗。

公开(公告)号：CN109797132B

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN201910197934.1

申请日：2019-03-15

Applicant: 苏州大学

Inventor： 胡士军 ,  雷伟 ,  杨壮壮 ,  赵振奥

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种促进人多能干细胞定向分化为内皮细胞的方法，本发明的方法包括：第0～1天，使用添加4～8μM的GSK3I的CDM3分化培养基对细胞密度达到95％以上的人多能干细胞进行诱导分化；第2天，使用添加40～60ng/ml bFGF的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第3～5天，使用添加40～60ng/ml VEGF和20～30ng/ml BMP4的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第6天对上一步诱导培养后的细胞进行消化，然后采用内皮细胞培养基继续培养3～4天。本发明分化内皮细胞的方法更加的经济有效，分化过程更加方便快捷；分化过程中不使用血清，排除多种因素的干扰，并且分化结果更可靠；且添加RA可以促进内皮分化的效率，一次分化可以得到更多的内皮细胞。

公开(公告)号：CN108359636A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201810123408.6

申请日：2018-02-07

Applicant: 苏州大学

Inventor： 胡士军 ,  苗淑梅 ,  雷伟 ,  赵振奥 ,  沈振亚 ,  唐明正

IPC: C12N5/077

Abstract: 一种提高多能干细胞定向分化为心肌细胞的诱导方法：在第0～1天对传代培养至4～5代的多能干细胞进行诱导分化，使用的培养基中含有2～15μM的GSK-3抑制剂；在第2～3天使用含有0.2～5μM视黄酸的培养基继续诱导分化；在第4～5天使用含有2～10μM的Wnt抑制剂的培养基诱导分化；以后利用培养基对细胞进行诱导分化，在第9～10天能观察到心肌细胞的跳动；其中，在第1～6天，使用第一诱导分化培养基，其包括RPMI-1640基础培养基、B27-insulin；在第7天以后，使用第二诱导分化培养基，其包括RPMI-1640基础培养基以及B27；或者在整个诱导分化培养过程中，使用CDM3诱导分化培养基或无血清的诱导分化培养基，其中CDM3诱导分化培养基包括RPMI-1640基础培养基、血清白蛋白、抗坏血酸和双抗。

公开(公告)号：CN108060125B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201810122820.6

申请日：2018-02-07

Applicant: 苏州大学

Inventor： 赵振奥 ,  胡士军 ,  苗淑梅 ,  雷伟 ,  沈振亚 ,  陈一欢

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明涉及促进多能干细胞分化为心肌细胞成熟的方法：在第0～1天对传代培养至4～5代的多能干细胞进行诱导分化，使用的培养基中含有2～15μM的GSK‑3抑制剂；在第2～3天使用培养基继续诱导分化；在第4～5天使用含有2～10μM的Wnt抑制剂的培养基诱导分化；在第14～20天使用含有0.2～5μM视黄酸的培养基继续诱导分化，以后利用培养基对细胞进行诱导分化培养；其中，在第1～6天，使用第一诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基、B27‑insulin；在第7天以后，使用第二诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基以及B27；或者在整个诱导分化培养过程中，使用CDM3诱导分化培养基或无血清的诱导分化培养基，其中CDM3诱导分化培养基包括RPMI‑1640基础培养基、血清白蛋白、抗坏血酸和双抗。

公开(公告)号：CN109797132A

公开(公告)日：2019-05-24

申请号：CN201910197934.1

申请日：2019-03-15

Applicant: 苏州大学

Inventor： 胡士军 ,  雷伟 ,  杨壮壮 ,  赵振奥

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种促进人多能干细胞定向分化为内皮细胞的方法，本发明的方法包括：第0～1天，使用添加4～8μM的GSK3I的CDM3分化培养基对细胞密度达到95％以上的人多能干细胞进行诱导分化；第2天，使用添加40～60ng/ml bFGF的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第3～5天，使用添加40～60ng/ml VEGF和20～30ng/ml BMP4的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第6天对上一步诱导培养后的细胞进行消化，然后采用内皮细胞培养基继续培养3～4天。本发明分化内皮细胞的方法更加的经济有效，分化过程更加方便快捷；分化过程中不使用血清，排除多种因素的干扰，并且分化结果更可靠；且添加RA可以促进内皮分化的效率，一次分化可以得到更多的内皮细胞。

公开(公告)号：CN108060125A

公开(公告)日：2018-05-22

申请号：CN201810122820.6

申请日：2018-02-07

Applicant: 苏州大学

Inventor： 赵振奥 ,  胡士军 ,  苗淑梅 ,  雷伟 ,  沈振亚 ,  陈一欢

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明涉及促进多能干细胞分化为心肌细胞成熟的方法：在第0～1天对传代培养至4～5代的多能干细胞进行诱导分化，使用的培养基中含有2～15μM的GSK‑3抑制剂；在第2～3天使用培养基继续诱导分化；在第4～5天使用含有2～10μM的Wnt抑制剂的培养基诱导分化；在第14～20天使用含有0.2～5μM视黄酸的培养基继续诱导分化，以后利用培养基对细胞进行诱导分化培养；其中，在第1～6天，使用第一诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基、B27‑insulin；在第7天以后，使用第二诱导分化培养基，其包括RPMI‑1640基础培养基以及B27；或者在整个诱导分化培养过程中，使用CDM3诱导分化培养基或无血清的诱导分化培养基，其中CDM3诱导分化培养基包括RPMI‑1640基础培养基、血清白蛋白、抗坏血酸和双抗。