一种克隆原病毒插入位点的方法

    公开(公告)号:CN102816755A

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201210323558.4

    申请日:2012-09-05

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种克隆原病毒插入位点的方法,包括以下步骤:1)培养细胞系;2)提取基因组DNA;3)进行以腺苷为末端的引物延伸反应,包括:酶切、延伸、纯化、连接、首轮PCR及第二轮PCR和PCR产物克隆;4)在基础的鼠基因组数据库中通过BLAST寻找比对分析得到基因组DNA序列的侧翼原病毒插入物序列。本发明是一种高效率的、更便宜、快速的用于精确定位外源遗传元件在另一个遗传物质中插入位点的工具;即使是微量的样品DNA,也可以从中分离、分析其病毒插入位点。该方法将不仅应用于定位白血病细胞中的病毒插入位点、寻找白血病相关基因,而且也将在定位其它DNA片段的插入位点时发挥重要作用。

    一种克隆原病毒插入位点的方法

    公开(公告)号:CN102816755B

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201210323558.4

    申请日:2012-09-05

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种克隆原病毒插入位点的方法,包括以下步骤:1)培养细胞系;2)提取基因组DNA;3)进行以腺苷为末端的引物延伸反应,包括:酶切、延伸、纯化、连接、首轮PCR及第二轮PCR和PCR产物克隆;4)在基础的鼠基因组数据库中通过BLAST寻找比对分析得到基因组DNA序列的侧翼原病毒插入物序列。本发明是一种高效率的、更便宜、快速的用于精确定位外源遗传元件在另一个遗传物质中插入位点的工具;即使是微量的样品DNA,也可以从中分离、分析其病毒插入位点。该方法将不仅应用于定位白血病细胞中的病毒插入位点、寻找白血病相关基因,而且也将在定位其它DNA片段的插入位点时发挥重要作用。

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