一种含有质粒的大肠杆菌的发酵方法和生产质粒的方法

    公开(公告)号:CN119899785A

    公开(公告)日:2025-04-29

    申请号:CN202311409857.4

    申请日:2023-10-27

    Abstract: 本发明公开一种含有质粒的大肠杆菌的发酵方法和生产质粒的方法。所述发酵方法包括下述二级发酵步骤:一级罐发酵,采用恒温发酵30‑34℃发酵,维持OD为20‑40;二级罐发酵,将一级罐中的发酵液转移到二级罐中,温度恒温在37℃至42℃发酵,且采用补料发酵的方式进行培养。本发明采用两级发酵的方式,可以连续发酵至少50h以上,二级罐可以连续生产至少4个循环。在一个发酵周期内,单位时间质粒产量至少提高300%以上,提升效果明显。且大大缩短质粒高效生产的周期,且连续循环还可继续进行,在整个发酵周期内,种子培养和前期及后处理的占比时间会大大缩短,可以节省大量发酵时间成本,可以达到以相同时间来高产质粒的目的。

    用于提取细菌中质粒DNA的气泡发生装置

    公开(公告)号:CN114381355A

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202111174968.2

    申请日:2021-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种用于提取细菌中的质粒DNA的气泡发生装置,包括箱体,所述箱体的一端设有进料口,所述箱体的另一端设有液体收集口;所述箱体内设有至少一个气泡发生组件和固液相分离器,所述气泡发生组件用于充分混合混合液,并将其中的渣体和反应液分层,所述混合液为用于提取细菌中的质粒DNA中和步骤的混合液;所述混合液由进料口进入箱体,沿水平方向依次流经气泡发生组件和固液相分离器,所述渣体通过固液相分离器引导排出,所述反应液由液体收集口流出。从而能够从细菌中大规模连续地提取质粒DNA,满足了核酸疫苗研发和后期产品大规模生产的需要。

    一种从细菌中提取质粒DNA的方法

    公开(公告)号:CN114181931A

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN202111174752.6

    申请日:2021-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种从细菌中提取质粒DNA的方法,包括以下步骤:1)将发酵后的含有质粒DNA的大肠杆菌菌液加入裂解液裂解,得到裂解后的大肠杆菌菌液;2)将裂解后的大肠杆菌菌液与中和液混合得到混合液,再将所述混合液通入气泡发生装置中,并在沿所述气泡发生装置的水平延伸方向流过的过程中,通过第一气泡发生组件混匀反应25~120s,并将所述混合液中的渣体和反应液分层,排渣后,得到反应液;3)将所述反应液进行分离过滤、纯化,得到质粒DNA溶液,即得。从而能够从细菌中大规模连续地提取质粒DNA,满足了核酸疫苗研发和后期产品大规模生产的需要。

    用于提取细菌中质粒DNA的气泡发生装置

    公开(公告)号:CN213895791U

    公开(公告)日:2021-08-06

    申请号:CN202022333756.1

    申请日:2020-10-19

    Abstract: 本实用新型公开了一种用于提取细菌中的质粒DNA的气泡发生装置,包括箱体,所述箱体的一端设有进料口,所述箱体的另一端设有液体收集口;所述箱体内设有至少一个气泡发生组件和固液相分离器,所述气泡发生组件用于充分混合混合液,并将其中的渣体和反应液分层,所述混合液为用于提取细菌中的质粒DNA中和步骤的混合液;所述混合液由进料口进入箱体,沿水平方向依次流经气泡发生组件和固液相分离器,所述渣体通过固液相分离器引导排出,所述反应液由液体收集口流出。从而能够从细菌中大规模连续地提取质粒DNA,满足了核酸疫苗研发和后期产品大规模生产的需要。

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