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公开(公告)号:CN101711277B
公开(公告)日:2018-06-19
申请号:CN200880020957.5
申请日:2008-07-31
IPC: C12N5/07 , C12N5/0735 , A61L27/00 , A61P9/00
CPC classification number: A61K35/34 , A61K35/12 , A61L27/3826 , A61L27/3895 , A61L2430/20 , C12N5/0657 , C12N2500/25 , C12N2500/90 , C12N2500/99 , C12N2501/105 , C12N2501/11 , C12N2501/115 , C12N2501/117 , C12N2501/12 , C12N2501/125 , C12N2501/13 , C12N2501/135 , C12N2501/235 , C12N2501/33 , C12N2501/998 , C12N2506/00 , C12N2506/03 , C12N2506/45
Abstract: 本发明的课题在于,改善纯化至不含有心肌细胞以外的细胞且不含有来源于其他物种的成分的心肌细胞在移植后的存活率。为了解决上述课题,本发明人等就经纯化的心肌细胞是否能够构筑细胞块进行了研究。其结果明确了:通过提供一种制备来源于多能干细胞的心肌细胞的细胞块的方法,可以解决上述课题。该方法的特征在于,将心肌细胞用无血清条件下的培养基进行培养,使该细胞聚集,所述心肌细胞为如下的心肌细胞:使包含由多能干细胞分化、诱导出的心肌细胞的、聚集状态的细胞块分散并单细胞化,从而得到的经纯化的来源于多能干细胞的心肌细胞。
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公开(公告)号:CN102449139B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201080023990.0
申请日:2010-03-29
Abstract: 本发明课题在于,开发一种不改变基因且对胚胎干细胞、诱导多能性干细胞等多能性干细胞、和多能性干细胞来源的心肌细胞以外的分化细胞诱导细胞死亡但不对心肌细胞诱导细胞死亡的方法。本发明通过对多能性干细胞、非心肌细胞的培养条件添加未确认到物质毒性和细胞死亡诱导作用的物质,从而构建了非常有效地对心肌细胞以外的细胞诱导细胞死亡的方法,由此明确了不改变基因也能够解决上述课题。
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公开(公告)号:CN101056973B
公开(公告)日:2011-05-25
申请号:CN200580029000.3
申请日:2005-08-26
Abstract: 本发明的课题是开发从完整心脏构成细胞群或者来自干细胞的分化细胞群中,不伴随基因的改变地选出心肌细胞的方法。本发明人等根据上述心肌细胞的多种性质,建立了使用线粒体特异性标记试剂,不伴随基因组的改变地选出心肌细胞的开创性方法。即、本发明人等提供了:从含有心肌细胞的细胞混合物中,根据细胞的相对的线粒体含量以及/或者根据细胞的相对的线粒体膜电位,不伴随心肌细胞的基因改变地选择心肌细胞的方法;从含有心肌细胞的细胞混合物中、不伴随心肌细胞的基因改变地浓缩心肌细胞的方法;不伴随心肌细胞的基因改变地制备心肌细胞的方法;以及对含有心肌细胞的细胞混合物中的心肌细胞比率进行评价的方法。
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公开(公告)号:CN103409368B
公开(公告)日:2016-05-25
申请号:CN201310348017.1
申请日:2007-01-31
IPC: C12N5/077
CPC classification number: C12N5/0657 , C12N2500/02 , C12N2500/14 , C12N2500/25 , C12N2500/32 , C12N2500/34 , C12N2500/38 , C12N2500/44 , C12N2500/90 , C12N2500/99 , C12N2501/115 , C12N2501/235 , C12N2501/70 , C12N2506/02
Abstract: 本发明以开发下述方法的课题,即,利用了在目前以纯化心肌细胞为目的研究中从未想到过利用的诸多性质、以及新发现的诸多性质,可在不改变遗传基因,不添加特别的蛋白质及生理活性物质的情况下,从含有来源于胚胎及干细胞的心肌细胞的细胞混合物中,高度且高收率的纯化心肌干细胞。本发明者们发现,通过在低血清条件、低糖条件、低营养条件、低钙条件、弱酸性pH条件、添加乳酸条件、添加天门冬氨酸·谷氨酸条件、和/或添加丙酮酸条件的培养液中培养胚胎干细胞来源的心肌细胞,可有效且高收率的选择和纯化心肌细胞。另外,还发现在胚胎干细胞中发现的方法还可应用于胎儿来源的心肌细胞的选择和纯化、或成体干细胞来源的心肌细胞的选择和纯化。
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公开(公告)号:CN103409368A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310348017.1
申请日:2007-01-31
IPC: C12N5/077
CPC classification number: C12N5/0657 , C12N2500/02 , C12N2500/14 , C12N2500/25 , C12N2500/32 , C12N2500/34 , C12N2500/38 , C12N2500/44 , C12N2500/90 , C12N2500/99 , C12N2501/115 , C12N2501/235 , C12N2501/70 , C12N2506/02
Abstract: 本发明以开发下述方法的课题,即,利用了在目前以纯化心肌细胞为目的研究中从未想到过利用的诸多性质、以及新发现的诸多性质,可在不改变遗传基因,不添加特别的蛋白质及生理活性物质的情况下,从含有来源于胚胎及干细胞的心肌细胞的细胞混合物中,高度且高收率的纯化心肌干细胞。本发明者们发现,通过在低血清条件、低糖条件、低营养条件、低钙条件、弱酸性pH条件、添加乳酸条件、添加天门冬氨酸·谷氨酸条件、和/或添加丙酮酸条件的培养液中培养胚胎干细胞来源的心肌细胞,可有效且高收率的选择和纯化心肌细胞。另外,还发现在胚胎干细胞中发现的方法还可应用于胎儿来源的心肌细胞的选择和纯化、或成体干细胞来源的心肌细胞的选择和纯化。
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公开(公告)号:CN102612644A
公开(公告)日:2012-07-25
申请号:CN201080049573.3
申请日:2010-10-29
IPC: G01N21/78 , G01N21/64 , G01N27/416
CPC classification number: G01N21/6428 , G01N33/582 , G01N33/6872 , G01N33/82 , G01N33/92
Abstract: 本发明的课题在于开发一种使电位敏感性荧光染料的电位或离子强度变化敏化的方法。本发明的课题还在于对迄今为止尚不能测定的ES细胞及iPS细胞来源心肌细胞的活动电位变化进行测定。本发明人等对各种物质进行筛选,发现:维生素E具有增强电位敏感性荧光染料的灵敏度的作用,胆固醇具有增强电位敏感性荧光染料的荧光强度的作用。而且,还明确了这两种物质能够组合,能够在通过维生素E增强电位敏感性荧光染料的灵敏度的同时通过胆固醇增强电位敏感性荧光染料的绝对荧光强度。
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公开(公告)号:CN102449139A
公开(公告)日:2012-05-09
申请号:CN201080023990.0
申请日:2010-03-29
Abstract: 本发明课题在于,开发一种不改变基因且对胚胎干细胞、诱导多能性干细胞等多能性干细胞、和多能性干细胞来源的心肌细胞以外的分化细胞诱导细胞死亡但不对心肌细胞诱导细胞死亡的方法。本发明通过对多能性干细胞、非心肌细胞的培养条件添加未确认到物质毒性和细胞死亡诱导作用的物质,从而构建了非常有效地对心肌细胞以外的细胞诱导细胞死亡的方法,由此明确了不改变基因也能够解决上述课题。
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