公开(公告)号：CN110628814B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN201810652815.6

申请日：2018-06-22

Applicant: 福建医科大学附属第一医院 ,  中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 陈万金 ,  杨辉 ,  李锦晶 ,  林翔 ,  王柠

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  A61K47/54 ,  A61K38/46 ,  A61K48/00 ,  A61P21/00

Abstract: 本发明提供了基于基因编辑技术增加SMN蛋白表达的方法及其在SMA治疗中的应用。增加SMN蛋白表达的方法是利用CRISPR/Cas9技术破坏SMN2的7号内含子上的剪接沉默子ISS‑N1或ISS+100而实现的。本发明提供的增加SMN蛋白表达方法是从DNA层面改造，是一种行之有效、安全高效、经济实用的方法。同时，本发明还提供了增加SMN蛋白新方法在SMA治疗中的系列应用，包括基因编辑的特定sgRNA序列，基因编辑试剂，基因编辑质粒，基因编辑细胞及其制备方法，基因编辑动物制备方法，基因编辑药物。

公开(公告)号：CN110628814A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201810652815.6

申请日：2018-06-22

Applicant: 福建医科大学附属第一医院 ,  中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 陈万金 ,  杨辉 ,  李锦晶 ,  林翔 ,  王柠

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  A61K47/54 ,  A61K38/46 ,  A61K48/00 ,  A61P21/00

Abstract: 本发明提供了基于基因编辑技术增加SMN蛋白表达的方法及其在SMA治疗中的应用。增加SMN蛋白表达的方法是利用CRISPR/Cas9技术破坏SMN2的7号内含子上的剪接沉默子ISS-N1或ISS+100而实现的。本发明提供的增加SMN蛋白表达方法是从DNA层面改造，是一种行之有效、安全高效、经济实用的方法。同时，本发明还提供了增加SMN蛋白新方法在SMA治疗中的系列应用，包括基因编辑的特定sgRNA序列，基因编辑试剂，基因编辑质粒，基因编辑细胞及其制备方法，基因编辑动物制备方法，基因编辑药物。

公开(公告)号：CN106701824A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201710007615.0

申请日：2017-01-05

Applicant: 福建医科大学附属第一医院

Inventor： 陈万金 ,  林翔 ,  王柠 ,  张奇杰

IPC: C12N15/86 ,  C12N5/10 ,  C12N5/0793

CPC classification number: C12N15/86 ,  C12N5/0619 ,  C12N5/0696 ,  C12N2501/734 ,  C12N2506/45 ,  C12N2510/00

Abstract: 本发明属于生物医学领域，涉及一种安全可靠重编程获得人iPS细胞的方法、一种将iPS细胞简便快速高效诱导分化成为脊髓运动神经元的方法，以及一种经济有效的功能性脊髓运动神经元的获取方法及其应用。本发明以玻连蛋白为唯一生长介质，由携带重编程因子的仙台病毒感染人成纤维细胞，培养3周后获得无外源血清干扰的人iPS细胞；之后通过多种小分子化合物组合将人iPS细胞高效诱导分化成为脊髓运动神经元；进一步经星形胶质细胞条件培养基促成熟培养并在神经肌肉接头的形成中应用。本发明高效诱导获得的功能性脊髓运动神经元，可用于疾病表型的模拟和发病机制的探讨，为今后有效治疗药物的筛选提供理论依据；甚至将来可应用于疾病的细胞移植治疗。

公开(公告)号：CN108823298A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810431844.X

申请日：2017-02-09

Applicant: 福建医科大学附属第一医院

Inventor： 林翔 ,  陈万金 ,  王柠 ,  赵淼 ,  苏惠贞 ,  姚香平

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及第220位点发生突变的人类IBGC致病基因PDGFB，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，具体是野生型基因第220位的G突变为T。本发明提供的致病基因形式尚未被报道，可以为该病致病机理的解析和药物开发、致病基因筛查和检测以及治疗方案的制定等提供依据和奠定基础。同时本发明构建了致病基因检测方法：首先利用多重PCR捕获致病基因外显子区域，再对其进行二代测序、通过信息分析找出突变，最后利用Sanger测序对突变进行验证；其中PCR捕获引物组包含扩增引物序列SEQ ID NO.12-23，Sanger测序片段的扩增引物序列如SEQ ID NO.30-31所示。本发明检测方法可以高效全面、快速准确地获取突变信息。

公开(公告)号：CN106701824B

公开(公告)日：2018-03-23

申请号：CN201710007615.0

申请日：2017-01-05

Applicant: 福建医科大学附属第一医院

Inventor： 陈万金 ,  林翔 ,  王柠 ,  张奇杰

IPC: C12N15/86 ,  C12N5/10 ,  C12N5/0793

Abstract: 本发明属于生物医学领域，涉及一种安全可靠重编程获得人iPS细胞的方法、一种将iPS细胞简便快速高效诱导分化成为脊髓运动神经元的方法，以及一种经济有效的功能性脊髓运动神经元的获取方法及其应用。本发明以玻连蛋白为唯一生长介质，由携带重编程因子的仙台病毒感染人成纤维细胞，培养3周后获得无外源血清干扰的人iPS细胞；之后通过多种小分子化合物组合将人iPS细胞高效诱导分化成为脊髓运动神经元；进一步经星形胶质细胞条件培养基促成熟培养并在神经肌肉接头的形成中应用。本发明高效诱导获得的功能性脊髓运动神经元，可用于疾病表型的模拟和发病机制的探讨，为今后有效治疗药物的筛选提供理论依据；甚至将来可应用于疾病的细胞移植治疗。