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公开(公告)号:CN111808992A
公开(公告)日:2020-10-23
申请号:CN202010681921.4
申请日:2020-07-15
Abstract: 本发明提供辣椒脉斑驳病毒多基因联合检测鉴定方法,属于植物病毒检测领域,其采用了两个引物对CP337-F/CP337-R、CI655-F/CI655-R,建立基于ChiVMV外壳蛋白(CP)与细胞质内含体(CI)两个基因的多基因联合检测体系。该方法不仅具有良好的特异性,而且灵敏度与单一RT-PCR的灵敏度相当,均为10-4数量级,显示出良好的检测灵敏度。本发明建立的多基因联合检测体系能在一个反应中同时检测出ChiVMV的CP及CI基因保守区片段,可以满足口岸进出境和农业生产上辣椒脉斑驳病毒的快速、准确检测需求。
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公开(公告)号:CN107828918B
公开(公告)日:2021-11-16
申请号:CN201711346490.0
申请日:2017-12-15
Applicant: 福州海关技术中心
Abstract: 本发明公开了尼润潜隐病毒和水仙普通潜隐病毒的双重RT‑PCR检测试剂盒及其检测方法。本发明的试剂盒包括NeLV‑正向引物、NeLV‑反向引物、NCLV‑正向引物和NCLV‑反向引物、随机引物、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、PCR Buffer、dNTPs、Mgcl2、Taq DNA聚合酶、阳性及阴性对照品。本发明设计了检测尼润潜隐病毒和水仙普通潜隐病毒的特异性引物,优化了二重RT‑PCR反应体系和反应程序,可实现同时检测尼润潜隐病毒和水仙普通潜隐病毒,不仅操作简便,省去了克隆、测序和序列比对步骤,而且具有特异、准确和灵敏的突出优点,在进出境口岸检疫和农业生产上应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN113215323A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110630915.0
申请日:2021-06-07
Applicant: 福建省农业科学院果树研究所 , 福州海关技术中心
Abstract: 本发明公开了一种实时荧光定量RT‑PCR检测BlShV的方法及其使用的试剂盒。本发明采用二重实时荧光定量RT‑PCR检测BlShV,具体为以BlShV的两个靶标基因为目标,分别设计引物和探针,经反应体系和条件优化后建立同时检测2个靶标基因的快速检测方法。该检测方法与以单个基因为靶标的普通RT‑PCR相比,准确性更高、可靠性更强。本发明为BlShV的检测提供了一种更加准确、更加可靠的方法,适用于农业生产和进出境口岸检疫上对BlShV的检测鉴定和实时监测,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN118995999A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202411021362.9
申请日:2024-07-29
Applicant: 福州海关技术中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测茶树坏死环斑病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法。所述LAMP引物组包括一对外引物(TPNRBV‑F3和TPNRBV‑B3)、一对内引物(TPNRBV‑FIP和TPNRBV‑BIP)和1条环引物(TPNRBV‑LF),各引物序列分别如序列1、序列2、序列3、序列4和序列5所示。所述LAMP试剂盒由LAMP引物组、Bst DNA聚合酶、缓冲液、dNTPs、Mg2+、荧光染料、阳性对照和阴性对照组成。所述LAMP检测方法具有检测时间快、特异性好、灵敏度高、结果判定简便等优点,适用于海关口岸出入境检疫、引种及农业生产上茶树坏死环斑病毒的快速诊断,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119842983A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510075319.9
申请日:2025-01-17
Applicant: 福州海关技术中心
Abstract: 本发明公开了一种玉米矮花叶病毒多基因联合检测试剂盒及其应用。本发明以玉米矮花叶病毒的CP基因、CI基因为靶标,分别设计特异性引物,经反复试验、验证后筛选出用于检测CP基因、CI基因的2对特异性引物组合,并通过退火温度、引物浓度等参数的无数次优化后确定了玉米矮花叶病毒多基因联合检测的最佳反应体系和反应条件,成功建立了一种玉米矮花叶病毒多基因联合检测方法。通过实验证明,该检测方法与以单个基因为靶标的常规RT‑PCR相比,准确性更高、可靠性更强。本发明为MDMV的检测提供了一种更加准确、更加可靠的方法,在进出境口岸检疫和农业生产上应用前景十分广泛。
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公开(公告)号:CN118879934A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202411021359.7
申请日:2024-07-29
Applicant: 福州海关技术中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP技术建立的茶树潜隐病毒1检测方法及其所用引物组合。所述引物组合包括外引物CCV1‑F3和CCV1‑B3、内引物CCV1‑FIP和CCV1‑BIP、环引物CCV1‑LF和CCV1‑LB,各引物核苷酸序列依次为序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。本发明还公开了茶树潜隐病毒1LAMP试剂盒,其包括上述引物组合、Bst DNA聚合酶、缓冲液、dNTPs、Mg2+、荧光染料、阳性对照和阴性对照。本发明公开的茶树潜隐病毒1检测方法具有快速、特异性好、灵敏度高、结果判定简便等优点,适用于海关口岸出入境检疫、引种及农业生产上茶树潜隐病毒1的快速诊断,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN113215323B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202110630915.0
申请日:2021-06-07
Applicant: 福建省农业科学院果树研究所 , 福州海关技术中心
Abstract: 本发明公开了一种实时荧光定量RT‑PCR检测BlShV的方法及其使用的试剂盒。本发明采用二重实时荧光定量RT‑PCR检测BlShV,具体为以BlShV的两个靶标基因为目标,分别设计引物和探针,经反应体系和条件优化后建立同时检测2个靶标基因的快速检测方法。该检测方法与以单个基因为靶标的普通RT‑PCR相比,准确性更高、可靠性更强。本发明为BlShV的检测提供了一种更加准确、更加可靠的方法,适用于农业生产和进出境口岸检疫上对BlShV的检测鉴定和实时监测,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN119020534A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411021354.4
申请日:2024-07-29
Applicant: 福州海关技术中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测多种茶树病毒的多重LAMP引物组、试剂盒及其应用。所述多重LAMP引物组包括用于检测油茶双生病毒的LAMP引物组、用于检测茶树潜隐病毒1的LAMP引物组、用于检测茶树坏死环斑病毒的LAMP引物组。所述试剂盒由多重LAMP引物组、反应缓冲液、dNTP Mix、MgSO4、Bst DNA聚合酶、AMV逆转录酶、荧光染料试剂、阴性对照和阳性对照组成。本发明利用多重LAMP检测技术可同时检测样品是否含有油茶双生病毒、茶树潜隐病毒1和/或茶树坏死环斑病毒,具有操作简便、耗时短、特异性强、灵敏度高、结果直观和检测效率高的优点,适用基层现场检测,具有广泛的应用前景和市场推广价值。
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