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公开(公告)号:CN114773483B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202210058058.6
申请日:2022-01-19
Applicant: 湖南农业大学 , 湖南普简生物科技有限公司
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒抗原重组串联表位蛋白,由非洲猪瘟病毒CD2v蛋白与MGF360‑505R蛋白的B细胞表位以柔性肽串联后形成,该串联表位蛋白的表达量与包涵体含量更高,且具有一定的可溶性,与血清抗体具有反应性,能够用于抗体ELISA的检测。还公开了该非洲猪瘟病毒抗原重组串联表位蛋白的构建方法、在抗体ELISA检测中的应用及抗体ELISA检测试剂盒。本发明的应用和抗体ELISA检测试剂盒,特异性良好,重复性与稳定性好,灵敏度高,能准确识别ASFV野生型和CD2v基因缺失型毒株免疫后产生的血清样本,对ASF检测具有一定的参考价值,基于保守表位的血清学检测方法有望提供更广泛的诊断范围。
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公开(公告)号:CN119569890A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202311137200.7
申请日:2023-09-05
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K19/00 , C07K14/315 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , B82Y5/00 , B82Y40/00
Abstract: 本发明提供了一种基于非洲猪瘟病毒的C type lectin蛋白纳米颗粒、融合蛋白、及制备和应用;本发明基于插入了Spytag标签的Ferritin纳米颗粒作为外源抗原展示载体,与非洲猪瘟病毒C type lectin胞外域和Spycatcher融合后获得的重组蛋白进行共价连接,并通过凝胶层析等手段对连接后的纳米颗粒成功进行纯化。在动物免疫评价实验中,发现C type lectin胞外域与Ferritin纳米颗粒连接后,机体内C type lectin特异性抗体的水平明显获得提高,且有利于增加机体T细胞免疫反应。
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公开(公告)号:CN110711202B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN201911023562.7
申请日:2019-10-25
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A61K31/7088 , A61K31/713 , A61P31/20 , C12N15/12 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用。本发明的PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用,通过间接免疫荧光试验检测PCV2在PK‑15细胞中的增殖变化,检测PCV2感染PK‑15细胞后PHB2 mRNA的动态变化,和鉴定在PHB2基因或蛋白的抑制剂转染PK‑15细胞中PCV2 Cap蛋白表达。结果表明,PHB2在正常及PCV2感染的PK‑15细胞中均有效表达。PCV2可显著影响PK‑15细胞中PHB2转录,而且PHB2对PCV2病毒复制具有调节作用,下调PHB2的表达,即PHB2基因敲除或蛋白表达下调,能明显抑制PCV2复制,对阐明PCV2致病机理和研究新的抗病毒药物具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114773483A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210058058.6
申请日:2022-01-19
Applicant: 湖南农业大学 , 湖南普简生物科技有限公司
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒抗原重组串联表位蛋白,由非洲猪瘟病毒CD2v蛋白与MGF360‑505R蛋白的B细胞表位以柔性肽串联后形成,该串联表位蛋白的表达量与包涵体含量更高,且具有一定的可溶性,与血清抗体具有反应性,能够用于抗体ELISA的检测。还公开了该非洲猪瘟病毒抗原重组串联表位蛋白的构建方法、在抗体ELISA检测中的应用及抗体ELISA检测试剂盒。本发明的应用和抗体ELISA检测试剂盒,特异性良好,重复性与稳定性好,灵敏度高,能准确识别ASFV野生型和CD2v基因缺失型毒株免疫后产生的血清样本,对ASF检测具有一定的参考价值,基于保守表位的血清学检测方法有望提供更广泛的诊断范围。
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公开(公告)号:CN110887963B
公开(公告)日:2022-12-30
申请号:CN201911162737.2
申请日:2019-11-25
Applicant: 江苏南农高科技股份有限公司 , 美国普赛(PROCELL)生物高科技有限责任公司 , 湖南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明涉及一种PCV2病毒样颗粒夹心定量ELISA检测法及其应用。利用猪圆环病毒2型PCV2d VLPs免疫小鼠,筛选杂交瘤细胞,制备的抗体可以特异性识别PCV2(PCV2b、PCV2d均可识别),可用于WB、IFA等PCV2相关检测;利用该抗体包被ELISA检测时发现不与Cap蛋白发生反应,能够用于区分VLPs和Cap。基于该单克隆抗体经过一系列反应条件的优化建立了夹心ELISA,可用于PCV2 VLPs的特异性定量以及定性,检测最低浓度可达到62.5ng/ml,灵敏度高,相关系数R2为0.992,定量准确性好,适用于PCV2b与PCV2d VLPs的定量,可应用于PCV2不同基因型VLPs的定量、组装效率鉴定以及PCV2病毒侵染鉴定。
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公开(公告)号:CN110887963A
公开(公告)日:2020-03-17
申请号:CN201911162737.2
申请日:2019-11-25
Applicant: 江苏南农高科技股份有限公司 , 美国普赛(PROCELL)生物高科技有限责任公司 , 湖南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明涉及一种PCV2病毒样颗粒夹心定量ELISA检测法及其应用。利用猪圆环病毒2型PCV2d VLPs免疫小鼠,筛选杂交瘤细胞,制备的抗体可以特异性识别PCV2(PCV2b、PCV2d均可识别),可用于WB、IFA等PCV2相关检测;利用该抗体包被ELISA检测时发现不与Cap蛋白发生反应,能够用于区分VLPs和Cap。基于该单克隆抗体经过一系列反应条件的优化建立了夹心ELISA,可用于PCV2 VLPs的特异性定量以及定性,检测最低浓度可达到62.5ng/ml,灵敏度高,相关系数R2为0.992,定量准确性好,适用于PCV2b与PCV2d VLPs的定量,可应用于PCV2不同基因型VLPs的定量、组装效率鉴定以及PCV2病毒侵染鉴定。
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公开(公告)号:CN110711202A
公开(公告)日:2020-01-21
申请号:CN201911023562.7
申请日:2019-10-25
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A61K31/7088 , A61K31/713 , A61P31/20 , C12N15/12 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用。本发明的PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用,通过间接免疫荧光试验检测PCV2在PK-15细胞中的增殖变化,检测PCV2感染PK-15细胞后PHB2 mRNA的动态变化,和鉴定在PHB2基因或蛋白的抑制剂转染PK-15细胞中PCV2 Cap蛋白表达。结果表明,PHB2在正常及PCV2感染的PK-15细胞中均有效表达。PCV2可显著影响PK-15细胞中PHB2转录,而且PHB2对PCV2病毒复制具有调节作用,下调PHB2的表达,即PHB2基因敲除或蛋白表达下调,能明显抑制PCV2复制,对阐明PCV2致病机理和研究新的抗病毒药物具有重要意义。
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公开(公告)号:CN106676199A
公开(公告)日:2017-05-17
申请号:CN201710027687.1
申请日:2017-01-16
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2531/125
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬圆环病毒的引物和高效CL‑RCA‑PCR检测试剂盒及方法,所述引物为DogCV‑D‑F:GTGCTTCACCATCAATAATCCTACT和DogCV‑D‑R:AGACTGAGCCGCCGATAGAG;所述试剂盒中包含上述引物。本发明中犬腹泻物样本仅采用DogCV引物PCR方法进行检测。该引物、CL‐RCA‐PCR试剂盒及检测方法的准确性高、特异性强、灵敏性高。
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