公开(公告)号：CN110711202B

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN201911023562.7

申请日：2019-10-25

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  蒋一凡 ,  邹亚文 ,  余婉婷 ,  张佳鑫 ,  何庆

IPC: A61K31/7088 ,  A61K31/713 ,  A61P31/20 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用。本发明的PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用，通过间接免疫荧光试验检测PCV2在PK‑15细胞中的增殖变化，检测PCV2感染PK‑15细胞后PHB2 mRNA的动态变化，和鉴定在PHB2基因或蛋白的抑制剂转染PK‑15细胞中PCV2 Cap蛋白表达。结果表明，PHB2在正常及PCV2感染的PK‑15细胞中均有效表达。PCV2可显著影响PK‑15细胞中PHB2转录，而且PHB2对PCV2病毒复制具有调节作用，下调PHB2的表达，即PHB2基因敲除或蛋白表达下调，能明显抑制PCV2复制，对阐明PCV2致病机理和研究新的抗病毒药物具有重要意义。

公开(公告)号：CN110669142A

公开(公告)日：2020-01-10

申请号：CN201910942130.X

申请日：2019-09-30

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  蒋一凡 ,  王东亮 ,  湛洋 ,  李周勉 ,  袁晓民

IPC: C07K19/00 ,  C12N7/01 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，是通过对PCV2 Cap蛋白进行了RGD多肽序列短肽修饰，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上，并在体外组装成表面融合RGD的PCV2病毒样颗粒。与野生型PCV2病毒样颗粒相比，融合RGD的PCV2病毒样颗粒免疫小鼠产生的PCV2特异性IgM和IgG抗体水平显著升高，能诱导产生高滴度的PCV2抗体，融合RGD的PCV2病毒样颗粒增强体液免疫应答。融合RGD的PCV2病毒样颗粒可应用于增强型VLPs和鉴别诊断的分子标签VLPs疫苗研制，为PCV2疫苗的研发提供了新思路。

公开(公告)号：CN110711202A

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201911023562.7

申请日：2019-10-25

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  蒋一凡 ,  邹亚文 ,  余婉婷 ,  张佳鑫 ,  何庆

IPC: A61K31/7088 ,  A61K31/713 ,  A61P31/20 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用。本发明的PHB2基因或蛋白的抑制剂在制备抗猪圆环病毒2型药物中的应用，通过间接免疫荧光试验检测PCV2在PK-15细胞中的增殖变化，检测PCV2感染PK-15细胞后PHB2 mRNA的动态变化，和鉴定在PHB2基因或蛋白的抑制剂转染PK-15细胞中PCV2 Cap蛋白表达。结果表明，PHB2在正常及PCV2感染的PK-15细胞中均有效表达。PCV2可显著影响PK-15细胞中PHB2转录，而且PHB2对PCV2病毒复制具有调节作用，下调PHB2的表达，即PHB2基因敲除或蛋白表达下调，能明显抑制PCV2复制，对阐明PCV2致病机理和研究新的抗病毒药物具有重要意义。

公开(公告)号：CN110669142B

公开(公告)日：2021-10-12

申请号：CN201910942130.X

申请日：2019-09-30

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  蒋一凡 ,  王东亮 ,  湛洋 ,  李周勉 ,  袁晓民

IPC: C07K19/00 ,  C12N7/01 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，是通过对PCV2 Cap蛋白进行了RGD多肽序列短肽修饰，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上，并在体外组装成表面融合RGD的PCV2病毒样颗粒。与野生型PCV2病毒样颗粒相比，融合RGD的PCV2病毒样颗粒免疫小鼠产生的PCV2特异性IgM和IgG抗体水平显著升高，能诱导产生高滴度的PCV2抗体，融合RGD的PCV2病毒样颗粒增强体液免疫应答。融合RGD的PCV2病毒样颗粒可应用于增强型VLPs和鉴别诊断的分子标签VLPs疫苗研制，为PCV2疫苗的研发提供了新思路。

公开(公告)号：CN109265521B

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN201811067175.9

申请日：2018-09-13

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  张素姣 ,  王东亮 ,  杨毅 ,  湛洋 ,  余婉婷 ,  蒋一凡 ,  王爱兵

IPC: C07K14/01 ,  C07K19/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  A61K39/12 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明，Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装，表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础，同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。

公开(公告)号：CN109265521A

公开(公告)日：2019-01-25

申请号：CN201811067175.9

申请日：2018-09-13

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  张素姣 ,  王东亮 ,  杨毅 ,  湛洋 ,  余婉婷 ,  蒋一凡 ,  王爱兵

IPC: C07K14/01 ,  C07K19/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  A61K39/12 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明，Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装，表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础，同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。