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公开(公告)号：CN110669142A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910942130.X
申请日：2019-09-30
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，是通过对PCV2 Cap蛋白进行了RGD多肽序列短肽修饰，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上，并在体外组装成表面融合RGD的PCV2病毒样颗粒。与野生型PCV2病毒样颗粒相比，融合RGD的PCV2病毒样颗粒免疫小鼠产生的PCV2特异性IgM和IgG抗体水平显著升高，能诱导产生高滴度的PCV2抗体，融合RGD的PCV2病毒样颗粒增强体液免疫应答。融合RGD的PCV2病毒样颗粒可应用于增强型VLPs和鉴别诊断的分子标签VLPs疫苗研制，为PCV2疫苗的研发提供了新思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110887963B
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN201911162737.2
申请日：2019-11-25
Applicant: 江苏南农高科技股份有限公司 , 美国普赛(PROCELL)生物高科技有限责任公司 , 湖南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明涉及一种PCV2病毒样颗粒夹心定量ELISA检测法及其应用。利用猪圆环病毒2型PCV2d VLPs免疫小鼠，筛选杂交瘤细胞，制备的抗体可以特异性识别PCV2(PCV2b、PCV2d均可识别)，可用于WB、IFA等PCV2相关检测；利用该抗体包被ELISA检测时发现不与Cap蛋白发生反应，能够用于区分VLPs和Cap。基于该单克隆抗体经过一系列反应条件的优化建立了夹心ELISA，可用于PCV2 VLPs的特异性定量以及定性，检测最低浓度可达到62.5ng/ml，灵敏度高，相关系数R2为0.992，定量准确性好，适用于PCV2b与PCV2d VLPs的定量，可应用于PCV2不同基因型VLPs的定量、组装效率鉴定以及PCV2病毒侵染鉴定。
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公开(公告)号：CN109265521A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811067175.9
申请日：2018-09-13
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明，Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装，表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础，同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。
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公开(公告)号：CN110669142B
公开(公告)日：2021-10-12
申请号：CN201910942130.X
申请日：2019-09-30
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，是通过对PCV2 Cap蛋白进行了RGD多肽序列短肽修饰，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上，并在体外组装成表面融合RGD的PCV2病毒样颗粒。与野生型PCV2病毒样颗粒相比，融合RGD的PCV2病毒样颗粒免疫小鼠产生的PCV2特异性IgM和IgG抗体水平显著升高，能诱导产生高滴度的PCV2抗体，融合RGD的PCV2病毒样颗粒增强体液免疫应答。融合RGD的PCV2病毒样颗粒可应用于增强型VLPs和鉴别诊断的分子标签VLPs疫苗研制，为PCV2疫苗的研发提供了新思路。
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公开(公告)号：CN110887963A
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201911162737.2
申请日：2019-11-25
Applicant: 江苏南农高科技股份有限公司 , 美国普赛(PROCELL)生物高科技有限责任公司 , 湖南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明涉及一种PCV2病毒样颗粒夹心定量ELISA检测法及其应用。利用猪圆环病毒2型PCV2d VLPs免疫小鼠，筛选杂交瘤细胞，制备的抗体可以特异性识别PCV2(PCV2b、PCV2d均可识别)，可用于WB、IFA等PCV2相关检测；利用该抗体包被ELISA检测时发现不与Cap蛋白发生反应，能够用于区分VLPs和Cap。基于该单克隆抗体经过一系列反应条件的优化建立了夹心ELISA，可用于PCV2 VLPs的特异性定量以及定性，检测最低浓度可达到62.5ng/ml，灵敏度高，相关系数R2为0.992，定量准确性好，适用于PCV2b与PCV2d VLPs的定量，可应用于PCV2不同基因型VLPs的定量、组装效率鉴定以及PCV2病毒侵染鉴定。
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公开(公告)号：CN109265521B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201811067175.9
申请日：2018-09-13
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明，Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装，表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础，同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。
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