公开(公告)号：CN101250549B

公开(公告)日：2011-08-10

申请号：CN200810030963.0

申请日：2008-04-01

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 邓子牛 ,  谢玉明 ,  熊兴耀 ,  张家银 ,  杨莉 ,  胡新喜 ,  袁飞荣 ,  罗赛男 ,  戴素明

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  A01H1/00 ,  A01H5/00 ,  A01G1/06

Abstract: 一种柑橘成年态节间茎段遗传转化方法，其包括如下步骤：(1)成年态材料消毒，在温室中选取半木质化的新梢，在采枝梢前一周，每隔一天用5wt％的次氯酸钠溶液擦拭枝梢一遍，共擦拭3～4次，然后再将次氯酸钠溶液擦拭过的枝梢剪下，在无菌条件下切割成4～5cm的茎段，用10wt％的次氯酸钠溶液加2～3滴吐温浸泡20～35min，无菌水冲洗3～4次，切割成1～1.5cm的节间茎段备用；(2)转化；(3)抗性芽再生；(5)温室二次嫁接；(6)抗性芽和抗性植株鉴定，采用公知的PCR分析法进行鉴定。本发明柑橘成年态材料消毒效果好，污染率低；不定芽诱导率达48％；抗性芽嫁接成活率达80％以上；再生转化植株没有嵌合现象。特别适合于冰糖橙、脐橙、椪柑等柑橘主栽品种的成年态节间茎段遗传转化。