公开(公告)号：CN104087614A

公开(公告)日：2014-10-08

申请号：CN201410314721.X

申请日：2014-07-03

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 黄国华 ,  李顺姬 ,  成小文 ,  胡珏 ,  刘双清

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 一种降低棉铃虫单包埋衣壳核型多角体病毒G4毒株突变率病毒的构建方法，该方法是以fp25k基因未发生突变的野生型HaSNPV G4毒株的病毒粒子为实验材料；通过构建含fp25k基因的质粒，进行两次定点沉默突变；再通过构建含荧光蛋白的质粒，进行共转染、荧光筛选和空斑纯化后得到突变后的G4病毒。本方法得到的病毒消除了野生型病毒传代时导致高突变率产生的遗传因子，稳定性强。

公开(公告)号：CN103484492A

公开(公告)日：2014-01-01

申请号：CN201310460159.7

申请日：2013-09-30

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 黄国华 ,  李顺姬 ,  刘双清 ,  王星 ,  成小文

IPC: C12N15/66

Abstract: 一种将多个DNA片段同时连接至同一载体上的方法，是依托Glass milk的DNA胶回收方法，将几个待连接的DNA片段PCR产物以及载体片段从凝胶上一同洗脱并回收，然后加入DNA连接酶与连接缓冲液，4℃连接过夜，将连接产物转化到感受态细胞中，实现重组克隆的增殖。本方法的连接过程无需考虑DNA片段浓度匹配问题，操作简单，周期短，价格低廉。