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公开(公告)号：CN105985935A
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201510048275.7
申请日：2015-01-30
Applicant: 清华大学 , 清华大学无锡应用技术研究院
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤脱氢酶截断体及其应用。本发明公开蛋白，包括黄嘌呤脱氢酶截断体小亚基、黄嘌呤脱氢酶截断体中亚基和黄嘌呤脱氢酶截断体大亚基。本发明提供黄嘌呤脱氢酶截断体，其比野生型对底物(黄嘌呤)的亲和力提高19％，转化数提高115％，催化效率提高166％，耐温性提高11℃，有利于与其他酶类联用进一步开发新的应用领域，尤其适合于样品检测，包括黄嘌呤和次黄嘌呤的检测，与PNP酶联用检测无机磷酸，与PNP、XOD和POD酶联用检测腺苷脱氨酶，和5`-核苷酸酶的检测，同时适合于工业化应用，有利于提高酶催化效率、降低成本，更加有利于工业应用过程。
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公开(公告)号：CN105985935B
公开(公告)日：2019-06-11
申请号：CN201510048275.7
申请日：2015-01-30
Applicant: 清华大学 , 清华大学无锡应用技术研究院
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤脱氢酶截断体及其应用。本发明公开蛋白，包括黄嘌呤脱氢酶截断体小亚基、黄嘌呤脱氢酶截断体中亚基和黄嘌呤脱氢酶截断体大亚基。本发明提供黄嘌呤脱氢酶截断体，其比野生型对底物(黄嘌呤)的亲和力提高19％，转化数提高115％，催化效率提高166％，耐温性提高11℃，有利于与其他酶类联用进一步开发新的应用领域，尤其适合于样品检测，包括黄嘌呤和次黄嘌呤的检测，与PNP酶联用检测无机磷酸，与PNP、XOD和POD酶联用检测腺苷脱氨酶，和5`‑核苷酸酶的检测，同时适合于工业化应用，有利于提高酶催化效率、降低成本，更加有利于工业应用过程。
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公开(公告)号：CN106318918B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201510406718.5
申请日：2015-07-10
Applicant: 无锡源清天木生物科技有限公司 , 清华大学无锡应用技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用。本发明公开蛋白，包括黄嘌呤脱氢酶大亚基和黄嘌呤脱氢酶小亚基。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶，为首次报道的经过实验证实的鲍氏不动杆菌属黄嘌呤脱氢酶类。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶可以适应碱性测定条件的样品，比已有报道具有更高的底物亲和力和最高的催化效率，可以更加灵敏地降解和检测次黄嘌呤/黄嘌呤和PNP酶和5`‑核苷酸酶，与PNP酶联用检测无机磷酸和腺苷脱氨酶，有利于提高酶催化效率、降低成本，更加有利于工业应用过程。本发明还提供将黄嘌呤脱氢酶用于检测包括血清和尿液在内的样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的方法。本发明进一步提供检测样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的检测试剂盒。本发明所提供检测方法和检测试剂盒不受样品中溶解氧影响，比现有技术检测范围更宽、灵敏度更高，便于推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106318918A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201510406718.5
申请日：2015-07-10
Applicant: 无锡源清天木生物科技有限公司 , 清华大学无锡应用技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用。本发明公开蛋白，包括黄嘌呤脱氢酶大亚基和黄嘌呤脱氢酶小亚基。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶，为首次报道的经过实验证实的鲍氏不动杆菌属黄嘌呤脱氢酶类。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶可以适应碱性测定条件的样品，比已有报道具有更高的底物亲和力和最高的催化效率，可以更加灵敏地降解和检测次黄嘌呤/黄嘌呤和PNP酶和5`-核苷酸酶，与PNP酶联用检测无机磷酸和腺苷脱氨酶，有利于提高酶催化效率、降低成本，更加有利于工业应用过程。本发明还提供将黄嘌呤脱氢酶用于检测包括血清和尿液在内的样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的方法。本发明进一步提供检测样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的检测试剂盒。本发明所提供检测方法和检测试剂盒不受样品中溶解氧影响，比现有技术检测范围更宽、灵敏度更高，便于推广应用。
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公开(公告)号：CN105734027A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410764840.5
申请日：2014-12-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤脱氢酶及其编码基因与应用。本发明公开一种蛋白，该蛋白是由如下(1)所示的蛋白质和/或(2)所示的蛋白质组成：(1)SEQ ID No.4所示的蛋白质或将SEQ ID No.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质；(2)SEQ ID No.5所示的蛋白质或将SEQ ID No.5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。本发明公开的黄嘌呤脱氢酶有利于与其他酶类联用进一步开发新的应用领域，尤其适合于样品检测和工业化应用等商业化应用的需求。
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公开(公告)号：CN108624568B
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN201710152663.9
申请日：2017-03-15
Applicant: 清华大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明公开了一种变异黄嘌呤脱氢酶及其应用。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶是将野生变异黄嘌呤脱氢酶进行如下任一突变后获得的：1)在野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基的D358与E359位之间插入一段长度由QDISAVCYKLSKRFE组成的15各氨基酸多肽片段；2)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行F270L突变；3)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行S362A突变。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶的黄嘌呤氧化酶活性显著增强，与野生型黄嘌呤脱氢酶相比，利用空气中氧气作为电子受体，催化氧化黄嘌呤底物的活性分别增加2125倍，63倍和122倍，可降低生产成本，更加适用于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN105734027B
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201410764840.5
申请日：2014-12-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤脱氢酶及其编码基因与应用。本发明公开一种蛋白，该蛋白是由如下(1)所示的蛋白质和/或(2)所示的蛋白质组成：(1)SEQ ID No.4所示的蛋白质或将SEQ ID No.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质；(2)SEQ ID No.5所示的蛋白质或将SEQ ID No.5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。本发明公开的黄嘌呤脱氢酶有利于与其他酶类联用进一步开发新的应用领域，尤其适合于样品检测和工业化应用等商业化应用的需求。
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公开(公告)号：CN108624568A
公开(公告)日：2018-10-09
申请号：CN201710152663.9
申请日：2017-03-15
Applicant: 清华大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明公开了一种变异黄嘌呤脱氢酶及其应用。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶是将野生变异黄嘌呤脱氢酶进行如下任一突变后获得的：1)在野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基的D358与E359位之间插入一段长度由QDISAVCYKLSKRFE组成的15各氨基酸多肽片段；2)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行F270L突变；3)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行S362A突变。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶的黄嘌呤氧化酶活性显著增强，与野生型黄嘌呤脱氢酶相比，利用空气中氧气作为电子受体，催化氧化黄嘌呤底物的活性分别增加2125倍，63倍和122倍，可降低生产成本，更加适用于工业化生产应用。
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