封装生物样品的方法以及在冷冻电镜成像中的应用

    公开(公告)号:CN118033179A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202311799755.8

    申请日:2023-12-25

    Abstract: 本发明属于生物电镜技术领域,涉及封装生物样品的方法以及在冷冻电镜成像中的应用。特别地,本发明涉及利用两面石墨烯膜封装生物样品的方法以及利用两面石墨烯膜封装的生物样品,用以进行冷冻电镜或常温电镜观测。本文所述一种封装生物样品的方法包括如下步骤:(1)滴加合适浓度的生物样品溶液至石墨烯膜电镜载网,石墨烯膜电镜载网滴加生物样品前经过亲水化处理;(2)在滴加了样品的石墨烯膜电镜载网上方(或所滴加的样品上方)再额外施加自支撑石墨烯膜,以得到石墨烯膜封装样品。

    一种生物活性配体功能化石墨烯薄膜及其制备方法

    公开(公告)号:CN111470500A

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN201910062667.7

    申请日:2019-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种生物活性配体功能化石墨烯薄膜及其制备方法。所述生物活性配体连接于石墨烯薄膜上,生物活性配体为Ni-氨三乙酸配体;所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜的制备方法为:将石墨烯薄膜转移至电镜载网上;采用高锰酸钾和碱性化合物的混合水溶液处理石墨烯薄膜;采用氨三乙酸活化石墨烯薄膜,然后与镍盐反应即得。本发明中石墨烯的功能化修饰可解决石墨烯的疏水性问题,利用化学链接引入高密度的生物活性配体,可以实现支持膜与生物分子的选择特异性结合,准确控制蛋白质分布。本发明生物活性配体功能化石墨烯薄膜可通过在未来优化中直接定位或捕获细胞裂解物中的目标生物分子,将生物分子纯化和冷冻电镜样品制备结合到一个步骤中是可预期的。

    一种功能化石墨烯薄膜在冷冻电镜三维重构中的应用

    公开(公告)号:CN111477265B

    公开(公告)日:2022-12-06

    申请号:CN201910062668.1

    申请日:2019-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种功能化石墨烯薄膜在冷冻电镜三维重构中的应用。所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜能够用于冷冻电子显微镜三维重构中,所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜由生物活性配体连接于石墨烯薄膜上形成,生物活性配体为Ni‑氨三乙酸配体;其中生物活性配体功能化石墨烯薄膜作为或用于制备冷冻电镜的支撑膜;生物活性配体功能化石墨烯薄膜特异性捕获带His标签的蛋白或生物大分子。本发明生物活性配体功能化石墨烯薄膜可以通过在未来优化中直接定位或捕获细胞裂解物中的目标生物分子,将生物分子纯化和冷冻电镜样品制备结合到一个步骤中是可预期的。

    一种功能化石墨烯薄膜在冷冻电镜三维重构中的应用

    公开(公告)号:CN111477265A

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN201910062668.1

    申请日:2019-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种功能化石墨烯薄膜在冷冻电镜三维重构中的应用。所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜能够用于冷冻电子显微镜三维重构中,所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜由生物活性配体连接于石墨烯薄膜上形成,生物活性配体为Ni-氨三乙酸配体;其中生物活性配体功能化石墨烯薄膜作为或用于制备冷冻电镜的支撑膜;生物活性配体功能化石墨烯薄膜特异性捕获带His标签的蛋白或生物大分子。本发明生物活性配体功能化石墨烯薄膜可以通过在未来优化中直接定位或捕获细胞裂解物中的目标生物分子,将生物分子纯化和冷冻电镜样品制备结合到一个步骤中是可预期的。

    一种生物活性配体功能化石墨烯薄膜及其制备方法

    公开(公告)号:CN111470500B

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN201910062667.7

    申请日:2019-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种生物活性配体功能化石墨烯薄膜及其制备方法。所述生物活性配体连接于石墨烯薄膜上,生物活性配体为Ni‑氨三乙酸配体;所述生物活性配体功能化石墨烯薄膜的制备方法为:将石墨烯薄膜转移至电镜载网上;采用高锰酸钾和碱性化合物的混合水溶液处理石墨烯薄膜;采用氨三乙酸活化石墨烯薄膜,然后与镍盐反应即得。本发明中石墨烯的功能化修饰可解决石墨烯的疏水性问题,利用化学链接引入高密度的生物活性配体,可以实现支持膜与生物分子的选择特异性结合,准确控制蛋白质分布。本发明生物活性配体功能化石墨烯薄膜可通过在未来优化中直接定位或捕获细胞裂解物中的目标生物分子,将生物分子纯化和冷冻电镜样品制备结合到一个步骤中是可预期的。

    循环流化床锅炉炉内烟气成分采样装置

    公开(公告)号:CN116337553A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202310324062.7

    申请日:2023-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种循环流化床锅炉炉内烟气成分采样装置。该循环流化床锅炉炉内烟气成分采样装置延伸至锅炉内用于进行烟气采样;包括探杆、探头和风帽,所述探杆埋设于锅炉内水冷屏、再热屏、过热屏中一种或多种的底部的浇筑料层中,所述探杆的一端位于所述锅炉外且另一端位于所述锅炉内,所述探杆内设有沿所述探杆长度方向延伸的烟气采样通道;所述探头的一端与所述探杆的另一端连接且与所述烟气采样通道连通;所述风帽盖设在所述探头的另一端上,所述风帽上设有与所述探头内部连通的第一进气孔。本发明不易发生磨损和堵塞,可以用于循环流化床锅炉炉内烟气的长周期稳定采样。

    一种多功能化石墨烯载网及其制备方法

    公开(公告)号:CN113960089B

    公开(公告)日:2023-01-17

    申请号:CN202010696941.9

    申请日:2020-07-20

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种多功能化石墨烯载网(MFG载网)及其制备方法。MFG载网的制备方法包括如下步骤:刻蚀采用CVD生长的石墨烯薄膜覆盖的铜箔作为电镜载网,即得到石墨烯载网;将石墨烯载网进行氧等离子体处理;然后采用含有EDC和NHS的MES缓冲液处理石墨烯载网;再采用氨三乙酸和生物素活化石墨烯载网;最后与镍盐反应即得。本发明MFG载网能够特异性地将目标生物分子锚定在其表面上,从而避免了空气与水的界面问题,而且还能够控制颗粒取向分布,通过把相关的蛋白纯化标签构建到每个生物大分子的不同方向上,提供了丰富的欧拉角,并且让生物大分子的结构解析更加的可靠以及更加的高效,因此,MFG载网将促进在结构生物学分析中应用冷冻电镜的通用性和可重复性。

    一种还原氧化石墨烯膜及其制备方法

    公开(公告)号:CN111908455B

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN201911043381.0

    申请日:2019-10-30

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种还原氧化石墨烯膜及其制备方法。所述还原氧化石墨烯膜的制备方法包括如下步骤:将氧化石墨烯转移至电镜载网上,经还原即得;所述还原的步骤如下:在氩氢气的环境下,加热至300~600℃并恒温,实现对所述氧化石墨烯的还原。本发明还原氧化石墨烯膜的导电性更强,因而能够减少拍照曝光时电子造成的漂移;与氧化石墨烯相比,还原氧化石墨烯的导电性更高,减少光束照射带来的样品漂移问题。此外,还原氧化石墨烯的厚度更薄,因此透射电子显微镜照片的背景噪音也更低。本发明提供的还原氧化石墨烯膜能够给冷冻电镜的制样以及后期三维重构带来极大便利。

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