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公开(公告)号：CN102703367A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201110075105.X
申请日：2011-03-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌。该重组甲基扭曲杆菌，是将紫色杆菌素生物合成相关基因簇导入宿主甲基扭曲杆菌中得到的。本发明的制备紫色杆菌素的方法成本低廉，一方面发酵使用的培养基成分简单、成本低廉，另一方面本发明方法只需以甲醇作为碳源，就可以发酵得到紫色杆菌素，甲醇是能够通过石油或者生物可再生资源合成的，价格低廉，本发明方法实现了用廉价可再生资源工业化生产紫色杆菌素；本发明方法操作简单，产率高，可达0.15g/l发酵液。本发明的重组菌产紫色杆菌素的效果好。因此，本发明重组菌及紫色杆菌素的制备方法具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101368169B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200810224359.1
申请日：2008-10-17
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了产脱氧紫色杆菌素的重组恶臭假单孢菌及其应用。本发明的重组恶臭假单孢菌将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入恶臭假单孢菌中获得的重组菌，所述脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇编码紫色杆菌素合成途径中的VioA、VioB、VioC和VioE四种酶。所述重组恶臭假单孢菌可用来生产脱氧紫色杆菌素。生产脱氧紫色杆菌素的方法是以L-色氨酸为底物利用所述重组恶臭假单孢菌发酵生产脱氧紫色杆菌素。本发明的重组恶臭假单孢菌生产的脱氧紫色杆菌素，其产率较高，可用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN101368169A
公开(公告)日：2009-02-18
申请号：CN200810224359.1
申请日：2008-10-17
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了产脱氧紫色杆菌素的重组恶臭假单孢菌及其应用。本发明的重组恶臭假单孢菌将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入恶臭假单孢菌中获得的重组菌，所述脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇编码紫色杆菌素合成途径中的VioA、VioB、VioC和VioE四种酶。所述重组恶臭假单孢菌可用来生产脱氧紫色杆菌素。生产脱氧紫色杆菌素的方法是以L－色氨酸为底物利用所述重组恶臭假单孢菌发酵生产脱氧紫色杆菌素。本发明的重组恶臭假单孢菌生产的脱氧紫色杆菌素，其产率较高，可用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN101633691B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200810116975.5
申请日：2008-07-22
Applicant: 清华大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12P3/00 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种产氢相关蛋白及其编码基因与应用。本发明公开的蛋白，是(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与产氢相关的由序列1衍生的蛋白质。将本发明提供的产氢相关蛋白命名为LdhD，灭活E.aerogenes IAM1183中所述蛋白的编码基因1dhd得到了一株工程菌。本发明获得的工程菌对环境适应性强、底物范围广、利用底物能力强、产氢效率高，可应用于生物制氢，对利用产气肠杆菌制氢具有巨大的指导意义。
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公开(公告)号：CN101608180B
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN200910090169.X
申请日：2009-07-29
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达660.3IU/L培养基，比酶活可达1.931IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101319219A
公开(公告)日：2008-12-10
申请号：CN200810116601.3
申请日：2008-07-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种生产脱氧紫色杆菌素的方法及其专用重组菌。该方法是将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入大肠杆菌BL21－CodonPlus(DE3)－RIL中获得的重组菌，该重组菌以色氨酸为底物发酵生产脱氧紫色杆菌素。其中，脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇，是将由VioA、VioB、VioC、VioD和VioE组成的紫色杆菌素合成基因簇中的VioD基因敲除，获得重组基因簇。所述重组菌是将所述的基因簇导入大肠杆菌BL21－CodonPlus(DE3)－RIL中获得的产脱氧紫色杆菌素的重组菌。本发明生产脱氧紫色杆菌素的方法产率较高，可以达到0.17g/L发酵液，且提取方便，分离纯化简单。
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公开(公告)号：CN102099477A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200980125871.3
申请日：2009-04-22
Applicant: 清华大学 , 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
CPC classification number: C12N15/52 , C12P17/165
Abstract: 一种产脱氧紫色杆菌素的重组菌及其应用，其中重组菌是通过将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL或恶臭假单孢菌中获得的重组菌。脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇是通过将由VioA、VioB、VioC、VioD和VioE组成的紫色杆菌素合成基因簇中的VioD基因敲除获得的，其核苷酸序列如序列表中序列1所示。一种以L-色氨酸为底物，通过发酵产脱氧紫色杆菌素重组菌生产脱氧紫色杆菌素的方法，该方法生产脱氧紫色杆菌素的效率高，提取方便，并且分离纯化简单。
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公开(公告)号：CN101974580A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010273764.X
申请日：2010-09-06
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种制备色素的方法。该方法是在基因工程菌株C.freundii/pComvio发酵过程中，向发酵液中添加表面活性剂十二烷基磺酸钠；所述色素由紫色杆菌素与脱氧紫色杆菌素组成。所述方法中，向发酵液中添加表面活性剂十二烷基磺酸钠之后，再向发酵液中补加反应底物。本发明在基因工程菌C.freundii/pComvio发酵过程中添加了表面活性剂后，该菌株生长快、易培养，色素生物合成稳定性好、产量提高，发酵周期缩短。在最佳处理条件下，菌体的色素产量可达2.1±0.1896g·L-1发酵液。
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公开(公告)号：CN101942024A
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN201010259905.2
申请日：2010-08-20
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素酶II融合蛋白及其编码基因与表达方法。本发明提供的融合蛋白(命名为MBP-HepB)，是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列2的第1-1118所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。将上述基因导入重组大肠杆菌中表达的蛋白肝素酶酶活可达118.4IU/L发酵液，表达量可达179mg/L发酵液，比酶活可达0.66IU/mg。本发明还可通过亲和分离实现了该融合蛋白的一步纯化。
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公开(公告)号：CN101608180A
公开(公告)日：2009-12-23
申请号：CN200910090169.X
申请日：2009-07-29
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8－1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达660.3IU/L培养基，比酶活可达1.931IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。
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